2. Experimental
2.1. Plant material
Enteromorpha compressa (Linnaeus) Greville was kindly provided by (Dr. Marc Lahaye, INRA, France). The seaweed was heated in a current of hot air and ground to flour in a Waring Blender.
2.2. Extraction of pigments
The flour was depigmented by sequential extraction with organic solvents in a Soxhlet apparatus as described (Ghosh, Adhikari, Ghosal, Damonte, & Ray, 2004) except that acetone (48 h) and ethanol (48 h) were used instead of benzene (20 h), acetone (20 h) and methanol (20 h) used in earlier study. The resulting depigmented algal powder has been designated as DAP.
2.3. Sequential extraction with various inorganic solvents
The depigmented alga (DAP) was extracted sequentially with oxalate, and 1 and 4 M KOH solutions as described below.
2.3.1. Oxalate extraction
Extractions, at extractant (100 mM ammonium oxalate in 50 mM NaOAc buffer, pH 5) to algal flour (3 g) ratio of 150:1, were conducted in 1 L glass beakers stirred by a small propeller stirrer (1 h at 80 °C). Separation of the unextracted residue from the liquid was performed using a centrifuge followed by filtration of the centrifugate through fritted glass filter (G-3). The residue was briefly washed with additional extractant and the wash liquid was collected as well to maximize polysaccharide recovery. Here, washing was especially important, as the seaweed retain a large amount of residual solution. Next, the unextracted residue was extracted once more using similar condition. The combined extracts and washings were concentrated, dialyzed, and the concentrated retentate was diluted with 3-vol ethanol. The precipitate recovered by centrifugation as washed thoroughly with aqueous 80% and dry ethanol, acetone, and finally dried over P2O5 in vacuum to yield the oxalate soluble polymer (OSP; yield 780 mg).
2. Experimental
2.1. Plant material
Enteromorpha compressa (Linnaeus) Greville was kindly provided by (Dr. Marc Lahaye, INRA, France). The seaweed was heated in a current of hot air and ground to flour in a Waring Blender.
2.2. Extraction of pigments
The flour was depigmented by sequential extraction with organic solvents in a Soxhlet apparatus as described (Ghosh, Adhikari, Ghosal, Damonte, & Ray, 2004) except that acetone (48 h) and ethanol (48 h) were used instead of benzene (20 h), acetone (20 h) and methanol (20 h) used in earlier study. The resulting depigmented algal powder has been designated as DAP.
2.3. Sequential extraction with various inorganic solvents
The depigmented alga (DAP) was extracted sequentially with oxalate, and 1 and 4 M KOH solutions as described below.
2.3.1. Oxalate extraction
Extractions, at extractant (100 mM ammonium oxalate in 50 mM NaOAc buffer, pH 5) to algal flour (3 g) ratio of 150:1, were conducted in 1 L glass beakers stirred by a small propeller stirrer (1 h at 80 °C). Separation of the unextracted residue from the liquid was performed using a centrifuge followed by filtration of the centrifugate through fritted glass filter (G-3). The residue was briefly washed with additional extractant and the wash liquid was collected as well to maximize polysaccharide recovery. Here, washing was especially important, as the seaweed retain a large amount of residual solution. Next, the unextracted residue was extracted once more using similar condition. The combined extracts and washings were concentrated, dialyzed, and the concentrated retentate was diluted with 3-vol ethanol. The precipitate recovered by centrifugation as washed thoroughly with aqueous 80% and dry ethanol, acetone, and finally dried over P2O5 in vacuum to yield the oxalate soluble polymer (OSP; yield 780 mg).
การแปล กรุณารอสักครู่..
2 . ทดลอง
2.1 . วัสดุปลูก
เทอโรมอร์ฟา compressa ( Linnaeus ) เกรวิลก็กรุณาให้โดยทีมนักวิจัยของ ดร. มาร์ค ลาฮาเยอ , ฝรั่งเศส ) สาหร่ายทะเลก็อุ่นในปัจจุบันของพื้นดิน อากาศ ร้อนกับแป้งในสินค้าเครื่องปั่น .
. . การสกัดสารสี
แป้งเป็น depigmented โดยการสกัดด้วยตัวทำละลายอินทรีย์ ซึ่งเป็น 1 ในอุปกรณ์ที่อธิบายไว้ ( ghosh adhikari ghosal damonte , , , ,&เรย์ , 2004 ) ยกเว้นว่าอะซีโตน ( 48 ชั่วโมง ) และเอทานอล ( 48 ชั่วโมง ) ถูกใช้แทนน้ำมันเบนซิน ( 20 ชั่วโมง ) อะซิโตน ( 20 ชั่วโมง ) และเมทานอล ( 20 ชั่วโมง ) ที่ใช้ในก่อนหน้านี้การศึกษา ผล depigmented สาหร่ายผง ได้รับการแต่งตั้งเป็น DAP
2.3 ลำดับการสกัดด้วยตัวทำละลายสารอนินทรีย์ต่างๆ
depigmented สาหร่าย ( DAP ) ถูกสกัดราวกับออกซาเลตและ 1 และ 4 เมตร เกาะโซลูชั่นตามที่อธิบายไว้ด้านล่าง
2.3.1 . การสกัดสารออกซาเลต
สกัดที่สกัด ( 100 มม. แอมโมเนียมออกซาเลทในบัฟเฟอร์ naoac 50 มิลลิโมลาร์ pH 5 ) แป้งสาหร่าย ( 3 กรัม ) ในอัตราส่วนต่างๆ ถูกดำเนินการใน 1 แก้วบีกเกอร์ stirred โดยหมุนใบพัดขนาดเล็ก ( 1 ) 80 ° C )การแยกของ unextracted สารตกค้างจากของเหลวที่กระทำโดยใช้เครื่องตามด้วยการกรองของ centrifugate ผ่านกระจกกรองแสง fritted ( 3 ) ตกค้างสั้น ๆล้างด้วยสารสกัดเพิ่มเติม และล้างของเหลวเก็บเช่นกันเพื่อเพิ่มการกู้คืนไรด์ . ที่นี่ซักผ้าเป็นสิ่งสำคัญโดยเฉพาะอย่างยิ่งเป็นสาหร่ายรักษาจำนวนมากของโซลูชั่นที่เหลือ ต่อไป unextracted กากสกัดอีกครั้งโดยใช้เงื่อนไขที่คล้ายกัน สารสกัดรวมและ washings ถูกเข้มข้น ผ่าน และ รีเทนเททเข้มข้นเจือจางด้วย 3-vol เอทานอล ที่กู้คืนโดยการปั่นเหวี่ยงที่ล้างให้สะอาดด้วยน้ำ 80% และแห้ง แอลกอฮอล์ อะซีโตนและในที่สุดแห้งฟอสฟอรัสในสุญญากาศเพื่อให้ผลผลิตออกซาเลตละลายพอลิเมอร์ ( OSP ; ผลผลิต
780 มิลลิกรัม )
การแปล กรุณารอสักครู่..