The second reason these methylases

The second reason these methylases are of interest is that the modification state of plasmid DNA can affect the frequency of transformation in special situations. Transformation efficiency will be reduced when 1) Dam-modified plasmid DNA is introduced into Dam- E. coli (one might do this in order to prepare DNA for digestion with BclI (NEB #R0160), for example); and 2) Dam or Dcm-modified DNA is introduced into certain other bacterial species. In the first instance, it has been shown that replication initiation is suppressed when plasmid DNA is hemimethylated at Dam sites (4). Dam-modified plasmids therefore replicate once in Dam-cells, and are unable to replicate again. The second phenomenon, poor transformation into other bacterial species, has not been comprehensively characterized, but may be due to modification-dependent restriction systems (5-8) analogous to the Mcr and Mrr systems found in E. coli. By using Dam- Dcm- strains to grow shuttle vectors, the modification-dependent restriction found in such bacteria can be avoided.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เหตุผลที่สอง methylases นี้มีน่าสนใจอยู่ที่ปรับเปลี่ยนสถานะของ plasmid DNA อาจมีผลต่อความถี่ของการเปลี่ยนแปลงในสถานการณ์พิเศษ เปลี่ยนแปลงประสิทธิภาพจะลดลงเมื่อ 1) แก้ไขเขื่อน plasmid DNA ถูกนำเข้าไปในเขื่อน - E. coli (หนึ่งอาจทำเพื่อเตรียมดีเอ็นเอสำหรับการย่อยอาหารด้วย BclI (NEB #R0160), ตัวอย่างเช่น); และ 2) เขื่อนหรือแก้ไข Dcm ดีเอ็นเอถูกนำมาใช้เป็นสายพันธุ์แบคทีเรียบางอย่าง แรก มันได้ถูกแสดงให้เริ่มต้นการจำลองแบบจะถูกระงับเมื่อ plasmid DNA hemimethylated ไซต์เขื่อน (4) แก้ไขเขื่อน plasmids จึงซ้ำกันในเซลล์เขื่อน และไม่สามารถที่จะทำซ้ำอีกครั้ง ปรากฏการณ์สอง เปลี่ยนแปลงยากในสายพันธุ์อื่น ๆ แบคทีเรีย มีไม่ได้ครอบคลุมลักษณะ แต่อาจเนื่องจากข้อจำกัดขึ้นอยู่กับการปรับเปลี่ยน ระบบ (5-8) คล้ายกับ Mcr และ Mrr ระบบพบใน E. coli โดยใช้เขื่อน - Dcm-สายพันธุ์เติบโตรถเวกเตอร์ ข้อจำกัดขึ้นอยู่กับการเปลี่ยนแปลงที่พบในแบคทีเรียดังกล่าวสามารถหลีกเลี่ยง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เหตุผลที่สอง methylases เหล่านี้เป็นที่น่าสนใจคือการที่รัฐเปลี่ยนแปลงของดีเอ็นเอพลาสมิดจะมีผลต่อความถี่ของการเปลี่ยนแปลงในสถานการณ์พิเศษ ประสิทธิภาพการแปลงจะลดลงเมื่อ 1) พลาสมิดดีเอ็นเอเขื่อนแก้ไขจะนำเข้าสู่ความเสียหาย E. coli (หนึ่งอาจทำเช่นนี้เพื่อเตรียมความพร้อมสำหรับการย่อยอาหารดีเอ็นเอกับ BclI (NEB # R0160) เช่น); และ 2) เขื่อนหรือดีเอ็นเอ Dcm แก้ไขจะถูกนำเข้าสู่บางชนิดของเชื้อแบคทีเรียอื่น ๆ ในกรณีแรกจะได้รับการแสดงให้เห็นว่าการเริ่มต้นการจำลองแบบถูกระงับเมื่อดีเอ็นเอพลาสมิดเป็น hemimethylated ที่เว็บไซต์เขื่อน (4) เขื่อนที่ปรับเปลี่ยนพลาสมิดจึงทำซ้ำครั้งในเขื่อนเซลล์และไม่สามารถที่จะทำซ้ำอีกครั้ง ปรากฏการณ์ที่สองการเปลี่ยนแปลงที่น่าสงสารเข้าไปในแบคทีเรียชนิดอื่น ๆ ที่ยังไม่ได้รับมีลักษณะกว้าง แต่อาจจะเป็นเพราะการปรับเปลี่ยนขึ้นอยู่กับระบบการ จำกัด (5-8) คล้ายคลึงกับ Mcr และ Mrr พบใน E. coli ระบบ โดยใช้สายพันธุ์เสียหาย Dcm- จะเติบโตเวกเตอร์รถรับส่งข้อ จำกัด การปรับเปลี่ยนขึ้นอยู่กับที่พบในแบคทีเรียดังกล่าวสามารถหลีกเลี่ยงได้

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เหตุผลที่สอง methylases เหล่านี้ที่น่าสนใจคือการปรับเปลี่ยนสถานะของ plasmid DNA อาจมีผลต่อความถี่ของการเปลี่ยนแปลงในสถานการณ์พิเศษ ประสิทธิภาพการแปลงจะลดลงเมื่อ 1 ) พลาสมิดดีเอ็นเอคือเข้าไปแก้ไขเขื่อนเขื่อน - E . coli ( หนึ่งอาจทำเพื่อเตรียมดีเอ็นเอสำหรับการย่อยด้วย bcli ( เอ็น # r0160 ) , ตัวอย่างเช่น ) และ 2 ) เขื่อนหรือ DCM ดีเอ็นเอแก้ไขเข้าไปในแบคทีเรียบางชนิดอื่น ๆ ในกรณีแรก มันได้ถูกแสดงว่าการปราบปรามเมื่อพลาสมิดดีเอ็นเอคือการเป็น hemimethylated ที่เว็บไซต์เขื่อน ( 4 ) เขื่อนเขื่อนจึงทำซ้ำดัดแปลง ) เมื่อเซลล์ และไม่สามารถที่จะทำซ้ำอีกครั้ง ปรากฏการณ์ที่สอง จนแปลงร่างเป็นแบคทีเรียชนิดอื่น ๆ ยังไม่ครอบคลุมลักษณะ แต่อาจเป็นเพราะระบบการจำกัดขึ้นอยู่กับการปรับเปลี่ยน ( 5-8 ) คล้ายคลึงกับ mcr และระบบสูงสุดพบใน E . coli โดยใช้ดัม - DCM - สายพันธุ์เติบโตเวกเตอร์รถรับส่ง , การปรับเปลี่ยนขึ้นอยู่กับข้อ จำกัด ที่พบในแบคทีเรียที่สามารถหลีกเลี่ยงได้