2.2.4. Preparation of levan and poly(-glutamic acid)
The preparation of levan by B. subtilis (natto) Takahashiwas carried
out by following the protocol described previously [30,35].
The natto bacteria inoculums prepared above were inoculated
(5%, v/v) into 100 ml of a medium composed of sucrose (200 g/L),
MgSO4·7H2O (0.5 g/L), NaH2PO4·2H2O (3 g/L), Na2HPO4·12H2O
(3 g/L) in a 250-ml flask, and then were incubated at 37 ◦C, pH
7.0 with shaking at 150rpm for 21 h. The culture medium was
centrifuged to remove the bacterial cells, and then the levan was
harvested by precipitation with the addition of cold 95% ethanol
from the culture broth, followed by dialysis through a membrane
with 10 kDa cut-off. For selective production of -PGA by
B. subtilis (natto) Takahashi, the bacteria inoculums were grown in
Medium E composed of glutamic acid (20 g/L), citric acid (12 g/L),
glycerol (80 g/L), NH4Cl (7 g/L), MgSO4·7H2O (0.5 g/L), FeCl3·6H2O
(0.04 g/L), K2HPO4 (0.5 g/L), and CaCl2·7H2O (0.15 g/L). The -PGA
was extracted and purified by a method described previously [36].
The products were characterized by 1H NMR, 13C NMR and gel
permeation chromatography (GPC).
2.2.4. Preparation of levan and poly(-glutamic acid)The preparation of levan by B. subtilis (natto) Takahashiwas carriedout by following the protocol described previously [30,35].The natto bacteria inoculums prepared above were inoculated(5%, v/v) into 100 ml of a medium composed of sucrose (200 g/L),MgSO4·7H2O (0.5 g/L), NaH2PO4·2H2O (3 g/L), Na2HPO4·12H2O(3 g/L) in a 250-ml flask, and then were incubated at 37 ◦C, pH7.0 with shaking at 150rpm for 21 h. The culture medium wascentrifuged to remove the bacterial cells, and then the levan washarvested by precipitation with the addition of cold 95% ethanolfrom the culture broth, followed by dialysis through a membranewith 10 kDa cut-off. For selective production of -PGA byB. subtilis (natto) Takahashi, the bacteria inoculums were grown inMedium E composed of glutamic acid (20 g/L), citric acid (12 g/L),glycerol (80 g/L), NH4Cl (7 g/L), MgSO4·7H2O (0.5 g/L), FeCl3·6H2O(0.04 g/L), K2HPO4 (0.5 g/L), and CaCl2·7H2O (0.15 g/L). The -PGAwas extracted and purified by a method described previously [36].The products were characterized by 1H NMR, 13C NMR and gelpermeation chromatography (GPC).
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.2.4 การเตรียม Levan และโพลี (? - กรดกลูตามิ)
ในการจัดทำ Levan โดย subtilis บี (นัตโตะ) Takahashiwas
ดำเนิน. โดยต่อไปนี้โปรโตคอลอธิบายไว้ก่อนหน้า [30,35]
แบคทีเรียนัตโตะเตรียมหัวเชื้อแบคทีเรียดังกล่าวข้างต้นถูกเชื้อ
(5% โวลต์ / v) เป็น 100 มล. ของกลางประกอบด้วยน้ำตาลซูโครส (200 กรัม / ลิตร),
MgSO4 · 7H2O (0.5 กรัม / ลิตร) NaH2PO4 · 2H2O (3 กรัม / ลิตร) Na2HPO4 · 12H2O
(3 กรัม / ลิตร) ใน ขวด 250 มลแล้วถูกบ่มที่อุณหภูมิ 37 ◦Cค่า pH
7.0 ที่มีการสั่นที่ 150rpm 21 ชั่วโมง สื่อวัฒนธรรมได้รับการหมุนเหวี่ยงเพื่อเอาเซลล์แบคทีเรียแล้ว Levan ถูกเก็บเกี่ยวโดยการตกตะกอนด้วยนอกเหนือจากเอทานอล95% เย็นจากน้ำซุปวัฒนธรรมตามด้วยการล้างไตผ่านเมมเบรนที่มี 10 กิโลดาลตันตัด สำหรับการผลิตเลือก? -PGA โดยบี subtilis (นัตโตะ) ทากาฮาชิแบคทีเรียหัวเชื้อแบคทีเรียที่ถูกปลูกในกลางE ประกอบด้วยกรดกลูตามิก (20 กรัม / ลิตร), กรดซิตริก (12 กรัม / ลิตร), กลีเซอรอล (80 กรัม / ลิตร), NH4Cl (7 กรัม / ลิตร) MgSO4 · 7H2O (0.5 กรัม / ลิตร), FeCl3 · 6H2O (0.04 กรัม / ลิตร) K2HPO4 (0.5 กรัม / ลิตร) และ CaCl2 · 7H2O (0.15 กรัม / ลิตร) หรือไม่ -PGA ถูกสกัดและทำให้บริสุทธิ์โดยวิธีการที่อธิบายไว้ก่อนหน้า [36] ได้. ผลิตภัณฑ์ที่โดดเด่นด้วย 1H NMR, 13C NMR และเจลโคซึมผ่าน(GPC)
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.2.4 . การเตรียมการของ 4 และพอลิ ( - glutamic acid )
4 จัดทำโดย B . subtilis ( ถั่วเน่า ) takahashiwas อุ้ม
ออกตามขั้นตอนที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [ 30,35 ] .
นัตโตะ 18 ชั่วโมงเตรียมปลูกเชื้อแบคทีเรียข้างบน
( 5% v / v ) ใน 100 มิลลิลิตร ประกอบด้วยน้ำตาลซูโครส ( ขนาดกลาง 200 กรัม / ลิตร ) ,
MgSO4 ใด้วย 7h2o ( 0.5 กรัม / ลิตร ) , nah2po4 ด้วย 2H2O-dx ( 3 กรัม / ลิตร ) , na2hpo4 ด้วย 12h2o
3 g / L ) ขวด 250 มล.และจากนั้นถูกบ่มที่ 37 ◦ C , pH
7.0 เขย่า ที่ 150rpm 21 . วัฒนธรรมอาหาร
ไฟฟ้าเพื่อขจัดเซลล์แบคทีเรีย แล้วมีการเก็บเกี่ยวโดยการตกตะกอนด้วย 4
2
เอทานอล 95% เย็นจากวัฒนธรรมอาหาร ตามด้วยการล้างไตผ่านเยื่อ
10 กิโลดาลตัน ตัด ผลิต พีจีเอ - เลือกโดย
B . subtilis ( natto ) ทาคาฮาชิ18 ชั่วโมง แบคทีเรียเติบโตใน
กลาง E ประกอบด้วย กรดกลูตามิก ( 20 กรัมต่อลิตร ) , กรดซิตริก ( 12 g / L )
กลีเซอรอล ( 80 กรัม / ลิตร ) , 4 . ( 7 กรัม / ลิตร ) , MgSO4 ใด้วย 7h2o ( 0.5 กรัม / ลิตร ) , FeCl3 ด้วย 6h2o
( 0.04 กรัมต่อลิตร ลิตร ) , k2hpo4 ( 0.5 กรัม / ลิตร และผลิตด้วย 7h2o ( 0.15 กรัม / ลิตร ) การ - PGA
สกัดบริสุทธิ์โดยวิธีที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [ 36 ] .
ผลิตภัณฑ์ลักษณะ 1H NMR , 13C NMR และโครมาโทกราฟีใช้เจล
( GPC )
การแปล กรุณารอสักครู่..