This method allows large-scale scre

This method allows large-scale screening of conditions in
96- or 384-multiwell plates. Nevertheless, some caution is needed
because LDH activity tends to decrease with time due to instability
and proteolytic degradation, and it can be affected by several variables,
including pH and the presence of specific components in the
culture medium, such as pyruvate [29]. LDH activity in the culture
medium can be measured by the CytoTox 96 Assay (Promega),
which is based on a two-step reaction. In the first step, LDH catalyzes
the coupled redox conversion of NAD+ to NADH and H+ and
lactate to pyruvate. In the second step, diaphorase uses the newly-
formed NADH and H+ to catalyze the reduction of a tetrazolium
salt [2-p-(iodophenyl)-3-(p-nitrophenyl)-5-phenyltetrazolium
chloride, INT] to highly-colored formazan, which absorbs at 490–
520 nm. The amount of formazan formed is proportional to the
amount of LDH released into the culture medium. The major
advantage of measuring LDH release is that it is an endpoint assay

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วิธีนี้ช่วยให้สภาพคัดขนาดใหญ่แผ่น 96 - หรือ 384-multiwell อย่างไรก็ตาม ข้อควรระวังบางอย่างจำเป็นเนื่องจากกิจกรรม LDH มีแนวโน้มที่จะ ลดเวลาเนื่องจากความไม่แน่นอนและย่อยสลาย proteolytic และสามารถได้รับผลจากตัวแปรต่าง ๆรวมถึงค่า pH และสถานะของคอมโพเนนต์เฉพาะในการสื่อวัฒนธรรม เช่น pyruvate [29] กิจกรรม LDH ในวัฒนธรรมสื่อที่สามารถวัด โดยการทดสอบ 96 CytoTox (Promega),ซึ่งจะขึ้นอยู่กับปฏิกิริยาสองขั้นตอน ในขั้นแรก LDH catalyzesการ redox ควบคู่แปลงและ + NADH และ H + และlactate ไป pyruvate ในขั้นตอนสอง diaphorase ใช้แบบใหม่-NADH และ H + ลด tetrazolium เป็นสถาบันที่เกิดขึ้นเกลือ [2-p-(iodophenyl)-3-(p-nitrophenyl)-5-phenyltetrazoliumคลอไรด์ INT] การ formazan สูงสี การดูดซับที่ 490-520 nm จำนวน formazan ที่เกิดขึ้นเป็นสัดส่วนกับการจำนวน LDH ปล่อยสื่อวัฒนธรรม หลักการประโยชน์ของ LDH ปล่อยวัดคือ เป็นการทดสอบปลาย

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วิธีนี้จะช่วยให้การตรวจคัดกรองขนาดใหญ่ของเงื่อนไขใน
96- หรือจาน 384 multiwell อย่างไรก็ตามระมัดระวังเป็นสิ่งจำเป็น
เพราะกิจกรรม LDH มีแนวโน้มที่จะลดลงด้วยเวลาเนื่องจากความไม่แน่นอน
และความเสื่อมโทรมของโปรตีนและสามารถรับผลกระทบจากหลายตัวแปร
รวมทั้งค่า pH และการปรากฏตัวของส่วนประกอบเฉพาะใน
อาหารเลี้ยงเชื้อเช่นไพรู [29] กิจกรรม LDH ในวัฒนธรรม
กลางสามารถวัดได้โดย CytoTox 96? Assay (Promega)
ซึ่งจะขึ้นอยู่กับปฏิกิริยาสองขั้นตอน ในขั้นตอนแรก, LDH กระตุ้น
การแปลงอกซ์คู่ของ NAD + เพื่อ NADH และ H + และ
ให้น้ำนมเพื่อไพรู ในขั้นตอนที่สองหมื่น diaphorase ใช้
รูปแบบ NADH และ H + เพื่อกระตุ้นการลดลงของ tetrazolium
เกลือ [2 p- (iodophenyl) -3- (P-nitrophenyl) -5-phenyltetrazolium
คลอไรด์ INT] เพื่อสีสูง formazan ซึ่งดูดซับที่ 490
520 นาโนเมตร ปริมาณของ formazan ที่เกิดขึ้นเป็นสัดส่วนกับ
ปริมาณของ LDH ปล่อยลงไปในอาหารเลี้ยงเชื้อ ที่สำคัญ
ประโยชน์จากการวัดการปล่อย LDH คือว่ามันเป็นจุดสิ้นสุดของการทดสอบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วิธีนี้จะช่วยให้การขนาดใหญ่ของเงื่อนไขใน
96 - หรือ 384 multiwell จาน อย่างไรก็ตาม ข้อควรระวังบางอย่างจำเป็น
เพราะกิจกรรมหลังมีแนวโน้มลดลงกับเวลา เนื่องจากความไม่แน่นอนและการย่อยสลาย
จำเพาะ และสามารถรับผลกระทบจากหลายตัวแปร
รวมทั้ง Ph และสถานะของคอมโพเนนต์เฉพาะใน
สื่อวัฒนธรรม เช่น ไพรูเวท [ 29 ] ลีดาเฮกิจกรรมวัฒนธรรม
ขนาดกลางโดยสามารถวัด cytotox 96  assay ( promega )
ซึ่งขึ้นอยู่กับปฏิกิริยาสองขั้นตอน ในขั้นตอนแรกและคู่หลัง
1 การแปลงของ NAD กับ NADH และ lactate pyruvate และ H
เพื่อ . ในขั้นตอนที่สอง diaphorase ใช้ใหม่ -
รูปแบบ NADH และ H เร่งลดลงของ tetrazolium
เกลือ [ 2-p - ( iodophenyl ) - 3 - ( p-nitrophenyl ) - 5-phenyltetrazolium
คลอไรด์1 . เพื่อปฏิบัติการสีสูงซึ่งดูดซับที่ 490 -
520 nm . จํานวนปฏิบัติการที่เกิดขึ้นเป็นสัดส่วนกับปริมาณของลีดาเฮ
ออกเป็นวัฒนธรรมสื่อ ประโยชน์หลักของการวัด
หลังปล่อยก็คือว่ามันเป็นข้อมูลการทดสอบ