HaCaT cell culture: HaCaT, an immortalized human
keratinocyte line was a generous gift from Nathalie
Gault (Commissariat à l'Énergie Atomique, Bruyère Le
Châtel, France) (Boukamp et al., 1988; Gault et al., 2002).
Cells were routinely grown in Costar plastic flasks in
monolayer cultures in DMEM medium supplemented
with 10% (v/v) FCS, and 5 M of HEPES + 80 mg.L-1 of
gentamicin. They were grown in a humidified
atmosphere of 5% CO2 in air. The medium was
routinely renewed 2, 4 and 6 days after passage and
when confluence was reached; cells were trypsinized
and split for subcultures (seeding density 3,500 cells/
cm2 in a 75 cm2 flask) or used for cytotoxicity assays.
Cells were used for experiments within 10 passages to
ensure cell line stability. All the experiments were
carried out at 37°C.
การเพาะเลี้ยงเซลล์ HaCaT: HaCaT, มนุษย์ immortalized
สาย keratinocyte เป็นของขวัญจากนาตาลี
แกนท์ (เสบียงà l'Énergie Atomique, Bruyère Le
(.. Boukamp et al, 1988; แกนท์และคณะ, 2002). Châtel, ฝรั่งเศส)
เซลล์ได้ เติบโตขึ้นเป็นประจำใน Costar ขวดพลาสติกใน
วัฒนธรรม monolayer ในสื่อ DMEM เสริม
กับ 10% (v / v) FCS และ 5 เมตรของ HEPES + 80 mg.L-1 ของ
GENTAMICIN พวกเขาได้รับการปลูกในความชื้น
บรรยากาศของ CO2 5% ในอากาศ ขนาดกลางที่ได้รับการ
ต่ออายุ 2 ประจำ 4 และ 6 วันหลังจากที่ทางและ
เมื่อมาถึงจุดบรรจบ; เซลล์ถูก trypsinized
และแยกสำหรับวัฒนธรรม (ความหนาแน่นเพาะ 3,500 เซลล์ /
cm2 ในขวด 75 cm2) หรือใช้สำหรับการตรวจพิษ.
เซลล์ที่ถูกนำมาใช้สำหรับการทดลองภายใน 10 ทางเดินเพื่อ
ให้มั่นใจเสถียรภาพสายพันธุ์ของเซลล์ การทดลองทั้งหมดถูก
ดำเนินการที่อุณหภูมิ 37 ° C
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)
การเพาะเลี้ยงเซลล์ hacat : hacat , immortalized มนุษย์
คีราติโนไซต์ไลน์ ขวัญใจดีจากนาตาลี
Gault ( เกียกกายล่าสุด L ' É nergie Atomique bruy , อีเบย์เลอ
Ch â tel , ฝรั่งเศส ) ( boukamp et al . , 1988 ; Gault et al . , 2002 ) .
เซลล์ถูกตรวจที่ปลูกใน คอสตาร์พลาสติก ขวดใน
อย่างวัฒนธรรมใน dmem MS
10% ( v / v ) FCS , และ 5 เมตรของฮีเปส 80 mg.l-1 ของ
โปงลางสะออน .พวกเขาเติบโตขึ้นใน humidified
บรรยากาศของ CO2 5% ในอากาศ กลางคือ
ตรวจต่ออายุ 2 , 4 และ 6 วัน หลังจากผ่านและ
เมื่อบรรจบครบ เซลล์ถูก trypsinized
และแยกสำหรับ subcultures ( เมล็ดพันธุ์ความหนาแน่น 500 เซลล์ /
cm2 ใน 75 cm2 ขวด ) หรือใช้พิษ ) .
เซลล์ถูกใช้เพื่อการทดลองภายใน 10 หัวข้อ
ให้มั่นใจเสถียรภาพเซลล์ .การทดลองทั้งหมดถูก
ดำเนินการที่ 37 องศา
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)