Resistance to antibiotics of isolat

Resistance to antibiotics of isolated strains
Antibiotic susceptibilities of isolated strains were examined by
agar overlay diffusion method as described by Cebeci and Gürakan
(2003) with some modification. MRS agar plates were overlaid with
0.7% soft agar with 200 ml of each culture (108 CFU/ml), grown
overnight in MRS broth at 30
C, and stood for 1 h at 30
C. Then
paper discs were placed and antibiotics were applied onto the discs.
After 24 h incubation at 30
C, the diameters of inhibition zones
were measured. The strains were tested for their susceptibilities
against ampicillin, chloramphenicol, cyclohexamide, erythromycin,
neomycin, streptomycin, spectinomycin, tetracycline, rifampicin
and vancomycin. Antibiotics were used at the concentration of
0.5e2048 mg per disc.
K.W. Lee et al. / LWT - Food Science and Technology 71 (2016) 130e137 131
2.6. Adhesion capacity of isolated strains
Adhesion capacity of isolated strains to HT-29 cells, human
colorectal adenocarcinoma cell line, was investigated. HT-29 cells
were cultured in RPMI 1640 medium with L-glutamine (300 mg/L)
(GlutaMAX, Gibco, Life Technologies, Rockville, MD, USA) supplemented
with 25 mM Hepes, 25 mM NaHCO3, 10% (v/v) fecal bovine
serum (FBS, Gibco, Life Technologies), 100 U/ml penicillin and
100 mg/ml streptomycin. Cells were grown at 37
C in atmosphere
of 5% CO2 and 95% air until a confluent monolayer was obtained.
Monolayers of HT-29 cells were seeded at a concentration of
5  105 cells/ml and dispensed into each 200 mm2 well of a 6 well
tissue culture plate. LAB strains were resuspended in HT-29 growth
medium to final concentration of 108 CFU/ml and 1 ml of the suspensionwas
added to each well of the tissue culture plate. After 1 h
incubation, the monolayers were washed four times with PBS (pH
7.4) in order to remove non-adherent bacteria. HT-29 cells were
lysed by the addition of 0.1% (v/v) Triton-X100 and the number of
viable adherent bacteria was determined by plating serially diluted
samples onto MRS agar plates. Colonies were enumerated after
anaerobic incubation for 24 h at 30 or 37
C and the adhesion capacity
was described as the number of bacterial cells adhered to a
HT-29 cell. Lactobacillus rhamnosus GG (ATCC53103) was used as a
highly adhesive positive control. Each adhesion assay was conducted
three times (three different passages) with duplicate
determinations.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ความต้านทานต่อยาปฏิชีวนะของสายพันธุ์ที่แยกยาปฏิชีวนะ susceptibilities แยกสายพันธุ์ถูก examined โดยวุ้นวิธีกระจายซ้อนทับตามที่อธิบายไว้ โดย Cebeci และ Gürakan(2003) ด้วยการปรับเปลี่ยนบางอย่าง จานอาหารเลี้ยงเชื้อ MRS ถูกซ้อนด้วย0.7% วุ้นนุ่ม ด้วย 200 ml ของแต่ละวัฒนธรรม (108 CFU/ml), ปลูกพักค้างคืนที่น้ำซุป MRS ที่ 30 C และยืนสำหรับ h 1 ที่ 30 c แล้วแผ่นกระดาษวางอยู่ และใช้ยาปฏิชีวนะลงบนดิสก์หลังจากบ่ม 24 ชั่วโมงที่ 30 C สมมาตรของโซนการยับยั้งถูกวัด สายพันธุ์ทดสอบสำหรับ susceptibilities ของพวกเขากับโกคอคคัสแดง cyclohexamide ร่างนีโอมัยซิน เตตราไซคลีน spectinomycin, streptomycin, rifampicinและ vancomycin ใช้ยาปฏิชีวนะที่ความเข้มข้นของ0.5e2048 มิลลิกรัมต่อแผ่นK.W. Lee et al. / LWT - วิทยาศาสตร์การอาหารและเทคโนโลยี 71 130e137 (2016) 1312.6 การความจุยึดเกาะของสายพันธุ์ที่แยกกำลังยึดเกาะของเซลล์ HT-29 มนุษย์แยกสายพันธุ์รับการตรวจสอบบรรทัดของเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ เซลล์ HT-29ถูกล้างใน RPMI 1640 กับ L-กลูตา (300 mg/L)เสริม (GlutaMAX Gibco เทคโนโลยีชีวิต ร็อควิลล์ MD สหรัฐอเมริกา)ด้วย Hepes, 25 มม. NaHCO3, 10% (v/v) อุจจาระวัว 25 มม.เซรั่ม (FBS, Gibco ชีวิตเทคโนโลยี) 100 U/ml ยาเพนนิซิลลิน และstreptomycin 100mg/ml เซลล์ที่ปลูกที่ 37 C ในบรรยากาศ5% CO2 และ 95% อากาศจนได้รับเป็น monolayer confluentMonolayers เซลล์ HT-29 ถูกเตรียมที่ความเข้มข้นของ5 105 เซลล์/มล. และจ่ายเป็น mm2 ละ 200 ของ 6 ดีดีเยื่อแผ่น ห้องปฏิบัติการสายพันธุ์ถูก resuspended โต HT-29ปานกลางถึงขั้นสุดท้ายความเข้มข้น 108 CFU/ml และ 1 มิลลิลิตรของ suspensionwasเพิ่มดีแต่ละแผ่นเนื้อเยื่อ หลังจาก 1 ชมกกไข่ monolayers การถูกล้างสี่ครั้ง ด้วย PBS (pH7.4) เพื่อกำจัดแบคทีเรียไม่ใช่มติ เซลล์ HT-29นาทีที่ 37uc โดยการเพิ่ม 0.1% (v/v) X100 ไทรทันและจำนวนแบคทีเรียทำงานได้สาวกดโดยชุบเจือจาง seriallyตัวอย่างลงในจานอาหารเลี้ยงเชื้อ MRS อาณานิคมที่ระบุหลังจากไม่ใช้ออกซิเจนบ่ม 24 ชั่วโมงที่ 30 หรือ 37 C และกำลังการผลิตที่ยึดเกาะอธิบายไว้เป็นจำนวนเซลล์แบคทีเรียปฏิบัติตามเซลล์ HT-29 ใช้ lactobacillus rhamnosus GG (ATCC53103) เป็นการการควบคุมเชิงบวกสูงกาว ดำเนินการทดสอบการยึดเกาะแต่ละสามครั้ง (สามทางเดินแตกต่างกัน) พร้อมสำเนาวิเคราะห์ปริมาณ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ความต้านทานต่อยาปฏิชีวนะของแยกสายพันธุ์
ไวต่อยาปฏิชีวนะของสายพันธุ์ที่แยกได้มีการตรวจสอบโดย
วิธีการซ้อนทับแพร่วุ้นตามที่อธิบาย Cebeci และGürakan
(2003) กับการปรับเปลี่ยนบางอย่าง แผ่น MRS agar ถูกบุด้วย
วุ้นนุ่ม 0.7% กับ 200 มล. ของแต่ละวัฒนธรรม (108 CFU / ml) ปลูก
ค้างคืนในน้ำซุป MRS วันที่ 30 องศาเซลเซียสและยืนเป็นเวลา 1 ชั่วโมงวันที่ 30 องศาเซลเซียส จากนั้น
แผ่นกระดาษที่ถูกวางไว้และยาปฏิชีวนะถูกนำไปใช้บนแผ่น.
หลังจากบ่ม 24 ชั่วโมงวันที่ 30? C, ขนาดเส้นผ่าศูนย์กลางของโซนยับยั้ง
วัด สายพันธุ์ที่ได้รับการตรวจความไวของพวกเขา
กับจิบูตี, chloramphenicol, cyclohexamide, erythromycin,
neomycin, streptomycin, spectinomycin, tetracycline, rifampicin
และ vancomycin ยาปฏิชีวนะที่ถูกนำมาใช้ที่ความเข้มข้นของ
0.5e2048 มิลลิกรัมต่อแผ่นดิสก์.
KW Lee et al, / ไลท์เวท - วิทยาศาสตร์และเทคโนโลยี 71 (2016) อาหาร 130e137 131
2.6 ความจุของการยึดเกาะของสายพันธุ์ที่แยก
ความจุการยึดเกาะของสายพันธุ์บางแห่งถึงเป็น HT-29 เซลล์ของมนุษย์
สายพันธุ์ของเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ได้รับการตรวจสอบ HT-29 เซลล์
เพาะเลี้ยงใน RPMI 1640 กลางที่มี L-Glutamine (300 mg / L)
(GlutaMAX, Gibco เทคโนโลยีชีวิต Rockville, MD, USA) เสริม
ด้วย 25 มม HEPES, 25 มม NaHCO3 10% (v / V ) อุจจาระวัว
ซีรั่ม (FBS, Gibco, ไลฟ์เทคโนโลยีส์) 100 U / ml penicillin และ
100 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร streptomycin เซลล์ที่ถูกปลูกที่ 37 องศาเซลเซียสในชั้นบรรยากาศ
ของ CO2 5% และอากาศ 95% จนกว่า monolayer ไหลมารวมกันที่ได้รับ.
monolayers ของเซลล์ HT-29 เมล็ดที่มีความเข้มข้นของ
5? 105 เซลล์ / มล. และจ่ายในแต่ละ 200 mm2 ดี 6 ดี
จานเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ สายพันธุ์ LAB ถูก resuspended ใน HT-29 การเจริญเติบโต
ปานกลางถึงความเข้มข้นสุดท้าย 108 CFU / ml และ 1 มิลลิลิตรของ suspensionwas
เพิ่มไปยังดีจานเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อในแต่ละ หลังจาก 1 ชั่วโมง
บ่ม monolayers ถูกล้างครั้งที่สี่กับพีบีเอส (pH
7.4) เพื่อที่จะกำจัดเชื้อแบคทีเรียที่ไม่ใช่พรรคพวก HT-29 เซลล์ถูก
lysed โดยนอกเหนือจาก 0.1% (ที่ v / v) Triton-X100 และจำนวนของ
แบคทีเรียพรรคพวกที่ทำงานได้ถูกกำหนดโดยการชุบเจือจางลำดับ
ตัวอย่างลงบนจานอาหารเลี้ยงเชื้อ MRS อาณานิคมแจกแจงหลังจาก
บ่มแบบไม่ใช้ออกซิเจนเป็นเวลา 24 ชั่วโมงวันที่ 30 หรือ 37 องศาเซลเซียสและความสามารถในการยึดเกาะ
ได้รับการอธิบายว่าจำนวนของเซลล์แบคทีเรียยึดติดกับการให้
เซลล์ HT-29 Lactobacillus rhamnosus GG (ATCC53103) ถูกใช้เป็น
ควบคุมบวกกาวสูง แต่ละการทดสอบการยึดเกาะได้ดำเนินการ
สามครั้ง (สามทางเดินที่แตกต่างกัน) ด้วยซ้ำ
หาความ