Current antiviral therapies cannot

Current antiviral therapies cannot cure hepatitis B virus (HBV) infection; successful HBV eradication would require inactivation of the viral genome, which primarily persists in host cells as episomal covalently closed circular DNA (cccDNA) and, to a lesser extent, as chromosomally integrated sequences. However, novel designer enzymes, such as the CRISPR/Cas9 RNA-guided nuclease system, provide technologies for developing advanced therapy strategies that could directly attack the HBV genome. For therapeutic application in humans, such designer nucleases should recognize various HBV genotypes and cause minimal off-target effects. Here, we identified cross-genotype conserved HBV sequences in the S and X region of the HBV genome that were targeted for specific and effective cleavage by a Cas9 nickase. This approach disrupted not only episomal cccDNA and chromosomally integrated HBV target sites in reporter cell lines, but also HBV replication in chronically and de novo infected hepatoma cell lines. Our data demonstrate the feasibility of using the CRISPR/Cas9 nickase system for novel therapy strategies aiming to cure HBV infection

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ปัจจุบันการรักษายาต้านไวรัสไม่สามารถรักษาเชื้อโรคไวรัส(ด้วยขั้น) ขจัดด้วยขั้นประสบความสำเร็จจะต้องมีการยกเลิกการเรียกของกลุ่มไวรัส ซึ่งส่วนใหญ่ยังคงอยู่ในเซลล์โฮสต์ เป็น DNA วงกลม episomal covalently ปิด (cccDNA) และ อาจน้อยกว่า เป็นลำดับรวม chromosomally อย่างไรก็ตาม นวนิยายเอนไซม์ออก เช่นระบบ nuclease CRISPR/อาร์ เอ็นเอ Cas9-แนะนำ ให้เทคโนโลยีสำหรับการพัฒนากลยุทธ์การรักษาขั้นสูงที่สามารถโจมตีโดยตรงกลุ่มด้วยขั้น สำหรับรักษาโรคในมนุษย์ nucleases ออกแบบดังกล่าวควรรู้จักศึกษาจีโนไทป์ด้วยขั้นต่าง ๆ และทำให้เกิดผลกระทบน้อยที่สุดออกจากเป้าหมาย ที่นี่ ให้เราระบุลักษณะทางพันธุกรรมข้ามนำด้วยขั้นลำดับในภูมิภาคกลุ่มด้วยขั้น S และ X ที่มีเป้าหมายความแตกแยกเฉพาะ และมีประสิทธิภาพ โดย Cas9 nickase วิธีการนี้ระหว่างสองวันไม่เพียง episomal cccDNA และ chromosomally รวมเว็บไซต์เป้าหมายด้วยขั้นในบรรทัดโปรแกรมรายงานเซลล์ แต่จำลองด้วยขั้นในโรคเรื้อรัง และ de novo บรรทัด hepatoma เซลล์ที่ติดเชื้อ ข้อมูลแสดงให้เห็นถึงความเป็นไปได้ของการใช้ระบบ nickase CRISPR/Cas9 สำหรับกลยุทธ์รักษานวนิยายมุ่งแก้ติดเชื้อด้วยขั้น

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การรักษาไวรัสปัจจุบันไม่สามารถรักษาไวรัสตับอักเสบบี (HBV) การติดเชื้อ; กำจัดไวรัสตับอักเสบบีที่ประสบความสำเร็จจะต้องมีการใช้งานของจีโนมของไวรัสซึ่งส่วนใหญ่ยังคงมีอยู่ในเซลล์โฮสต์เป็น episomal ปิด covalently ดีเอ็นเอวงกลม (cccDNA) และในระดับน้อยเป็นลำดับ chromosomally แบบบูรณาการ อย่างไรก็ตามเอนไซม์ออกแบบนวนิยายเช่น CRISPR / Cas9 ระบบ Nuclease RNA-แนะนำให้เทคโนโลยีเพื่อการพัฒนากลยุทธ์การรักษาขั้นสูงที่สามารถโจมตีโดยตรงจีโนมของไวรัสตับอักเสบบี สำหรับการประยุกต์ใช้ในการรักษาในมนุษย์นิออกแบบดังกล่าวควรรับรู้ยีนไวรัสตับอักเสบบีต่างๆและทำให้เกิดผลออกเป้าหมายน้อยที่สุด ที่นี่เราระบุข้ามพันธุ์อนุรักษ์ลำดับไวรัสตับอักเสบบีในภูมิภาค S และ X จีโนมของไวรัสตับอักเสบบีที่ถูกกำหนดเป้​​าหมายสำหรับความแตกแยกที่เฉพาะเจาะจงและมีประสิทธิภาพโดย Cas9 nickase วิธีการนี​​้ไม่เพียง แต่หยุดชะงัก cccDNA episomal และบูรณาการ chromosomally เว็บไซต์เป้าหมายไวรัสตับอักเสบบีในเซลล์นักข่าว แต่ยังจำลองแบบไวรัสตับอักเสบบีเรื้อรังในและโนโวที่ติดเชื้อตับเซลล์ ข้อมูลของเราแสดงให้เห็นถึงความเป็นไปได้ของการใช้ CRISPR / การ Cas9 ระบบ nickase สำหรับกลยุทธ์การรักษานวนิยายเป้าหมายที่จะติดเชื้อไวรัสตับอักเสบบีรักษา

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ปัจจุบันไวรัสซึ่งไม่สามารถรักษาโรคไวรัสตับอักเสบบี ( HBV ) พบการติดเชื้อ การประสบความสำเร็จจะต้องมีการยับยั้งของจีโนมไวรัส ซึ่งส่วนใหญ่ยังคงอยู่ในเซลล์โฮสต์เป็น episomal covalently ปิดวงกลมดีเอ็นเอ ( cccdna ) และในระดับที่น้อยกว่า โดยรวม chromosomally ลำดับ อย่างไรก็ตาม เอนไซม์ ออกแบบนวนิยาย เช่น crispr / cas9 อาร์เอ็นเอนำนิวเคลียสระบบ ,ให้เทคโนโลยีเพื่อพัฒนาขั้นสูงการรักษากลยุทธ์ที่สามารถโจมตีโดยตรงและการศึกษาจีโนม . สำหรับการประยุกต์ใช้ในมนุษย์ nucleases ออกแบบดังกล่าวควรจำพันธุ์ต่าง ๆและก่อให้เกิดผลกระทบน้อยที่สุดจากศูนย์เป้าหมาย ที่นี่เราระบุข้ามกับศูนย์อนุรักษ์ลำดับใน S และ X ภาคของการศึกษาจีโนมที่เป็นเป้าหมายสำหรับการที่เฉพาะเจาะจงและมีประสิทธิภาพโดย cas9 nickase . วิธีการนี้ต้องไม่เพียง แต่ episomal cccdna และบูรณาการ chromosomally พบเป้าหมายในเว็บไซต์นักข่าวเซลล์มะเร็ง แต่ยังพบการติดเชื้อเรื้อรัง และเดอโนโวตับเซลล์เส้นข้อมูลของเราแสดงให้เห็นถึงความเป็นไปได้ของการใช้ crispr / cas9 nickase ระบบใหม่มุ่งรักษาโรคไวรัสตับอักเสบบีรักษาด้วยกลยุทธ์