Strains were grown on MacConkey aga

Strains were grown on MacConkey agar (Oxoid), and in Brain Heart broth, both supplemented with ertapenem (0.125 mg/l). One colony was taken from the plate and 50 μl from the broth. Both were suspended in 100 μl Extraction Solution (SIGMA, E7526). Mixtures were incubated at 95°C for 10 minutes, cooled to room temperature, 100 μl Dilution Buffer (SIGMA, D5688) was added and mixed. PCR reactions were carried out using PCR-ReadyMix™ (SIGMA, E3004). Amplification was performed on ABI 7500 Real-Time PCR system (LifeTech, Glasgow, UK). The temperature profile included initial denaturation of 4 min. at 94°C, followed by 50 cycles (40 cycles, protocol 2) of 94°C for 15 sec., and 60°C for 1 min.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สายพันธุ์ที่ปลูกบนอาหารเลี้ยงเชื้อ MacConkey (Oxoid), และในสมองหัวใจซุป ทั้งเสริม ด้วย ertapenem (0.125 mg/l) ฝูงหนึ่งถูกนำมาจากจานและ 50 μl จากน้ำซุป ทั้งสองถูกหยุดชั่วคราวใน 100 μl โซลูชันสกัด (ซิกม่า E7526) ส่วนผสมที่ได้รับการกกที่ 95° C 10 นาที เย็นที่อุณหภูมิห้อง 100 μl บัฟเฟอร์เจือจาง (ซิกม่า D5688) ถูกเพิ่ม และผสม ปฏิกิริยา PCR ที่ได้ดำเนินการโดยใช้ PCR-ReadyMix™ (ซิกม่า E3004) ดำเนินการขยายระบบ ABI 7500 แบบ Real-Time PCR (LifeTech กลาสโกว์ สหราชอาณาจักร) ค่าอุณหภูมิรวมแปรสภาพครั้งแรกของ 4 นาทีที่ 94° C ตาม ด้วย 50 รอบ (40 รอบ โพรโทคอล 2) 94° c สำหรับ 15 วินาที และ 60° C เป็นเวลา 1 นาที

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สายพันธุ์ที่ปลูกใน MacConkey วุ้น (Oxoid) และในสมองหัวใจน้ำซุปทั้งเสริมด้วย ertapenem (0.125 mg / l) หนึ่งอาณานิคมถูกนำมาจากแผ่นและ 50 ไมโครลิตรจากน้ำซุป ทั้งสองถูกระงับใน 100 โซลูชั่นสกัดไมโครลิตร (ซิกม่า E7526) ผสมถูกบ่มที่ 95 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 นาทีเย็นที่อุณหภูมิห้อง 100 ไมโครลิตร Dilution บัฟเฟอร์ (ซิกม่า D5688) ถูกบันทึกและผสม ปฏิกิริยา PCR ได้ดำเนินการโดยใช้ PCR-Readymix ™ (ซิกม่า E3004) การขยายกำลังดำเนินการ ABI 7500 เวลาจริงระบบ PCR (LifeTech, กลาสโกว์, สหราชอาณาจักร) รายละเอียดของอุณหภูมิรวม denaturation เริ่มต้น 4 นาที ที่ 94 ° C ตามด้วย 50 รอบ (40 รอบโปรโตคอล 2) 94 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 15 วินาที. และ 60 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 นาที

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สายพันธุ์ที่ปลูกใน Lynx ( oxoid ) และใน สมอง หัวใจ เสริมด้วยน้ำซุป ทั้งเออร์ตาพีเนม ( 0.125 รึเปล่า mg / l ) ฝูงหนึ่งได้มาจากแผ่นและ 50  μ L จากน้ำซุป ทั้งสองถูกระงับใน 100  μลิตรการสกัดสารละลาย ( Sigma , e7526 ) ผสมที่อุณหภูมิ 95 องศา C นาน 10 นาที เย็นที่อุณหภูมิห้อง , 100  μ L ในบัฟเฟอร์ ( Sigma , d5688 ) คือการเพิ่มและผสม ปฏิกิริยา PCR ได้ โดยใช้วิธี PCR readymix ™ ( Sigma , e3004 ) ( คือใช้ระบบ Real Time PCR ABI 7500 ( UK ไลฟ์เทค , กลาสโกว์ , ) อุณหภูมิรวม ( เริ่มต้น 4 ไหมมินที่ 94 ° C ตามด้วย 50 รอบ ( 40 รอบ ( 2 ) 94 ° C วินาที 15 รึเปล่า และ 60 °องศาเซลเซียส 1 มั้ย มิน