Preparation of co-immobilized yeast

Preparation of co-immobilized yeasts: S. cerevisiae and C. tropicalis
NSW-NW were initially revived on PDA medium for several
times. The revived seeds were grown in 250 mL Erlenmeyer flasks
containing 100 mL seed medium at 30 C on a rotary shaker incubator
at 120 rpm for 48 h. The culture was centrifuged at 4000 rpm
for 25 min, the precipitate was collected and suspended in sterile
0.1 g/mL physiological saline solution. The cell number of
S. cerevisiae suspension was approximately 4.84  108 cells/mL
calculated by blood cell counting method. The cell number of
C. tropicalis NSW-NW suspension was approximately 3.43  108
cells/mL. Next, a 0.5 mL C. tropicalis NSW-NW suspension and a
0.5 mL S. cerevisiae suspension were mixed with 20 mL embedding
solution (2% SA, 6% PVA, and 1% SiO2). This mixture was dispensed
through a 20 mL syringe into the fixing solution (3% CaCl2
and 5% H3BO3) with mild agitation, resulting in spherical beads
approximately 3–5 mm in diameter. The two yeasts were
co-immobilized in the beads, and the mixed culture system II
was successfully constructed. After overnight at 4 C, the
SA–PVA–SiO2 beads were collected and washed with physiological
saline solution. Then, the beads were cultured in PDA medium at
30 C for 24 h to regenerate.
Preparation of immobilized S. cerevisiae: 1mL S. cerevisiae suspension
was mixed with 20 mL embedding solution (2% SA, 6%PVA, and 1% SiO2). This mixture was dispensed through a 20 mL
syringe into the fixing solution (3% CaCl2 and 5% H3BO3) with mild
agitation, resulting in spherical beads approximately 3–5 mm in
diameter. The beads were carried out the above regeneration
treatment.
Ethanol fermentation in hydrolysate by co-immobilized yeasts
and immobilized S. cerevisiae: 20 mL co-immobilized yeasts beads
and immobilized S. cerevisiae were transferred separately into
250 mL Erlenmeyer flasks containing 30 mL fermented liquors
and covered with rubber stopper. The flasks were placed on a
rotary shaker incubator at 30 C at 90 rpm for 12 h. After fermentation,
the fermented products were collected and distilled in a still.
The ethanol content was analyzed using a spectrophotometric
method for the determination of chromic ion according to Caputi
et al. [36]. The residual sugars content was analyzed by the DNS
method.
Ethanol batch fermentation in hydrolysate by co-immobilized
yeasts: 20 mL SA–PVA–SiO2 beads were transferred into 250 mL
Erlenmeyer flasks containing 30 mL fermented liquors and covered
with rubber stopper. The flasks were placed on a rotary shaker
incubator at 28 C at 90 rpm for 4 h. After fermentation, the fermented
products were collected, and beads were washed by sterile
physiological saline solution for the next batch of fermentation.
Batch fermentation carried out for two more times. The ethanol
and residual sugars content were analyzed. The structures of SA–
PVA–SiO2 beads were observed by SEM technology.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การเตรียมยีสต์แบบตรึงร่วม: S. cerevisiae และ C. tropicalisNSW NW ได้เริ่มฟื้นฟูบน PDA สื่อหลายครั้ง ฟื้นขึ้นมาเมล็ดที่ปลูกในขวด Erlenmeyer 250 มล.บรรจุ 100 มล.เมล็ดปานกลางที่ 30 C ในตู้อบแบบโรตารี่ปั่นที่ rpm 120 สำหรับ 48 ชั่วโมง วัฒนธรรมคือผลิตภัณฑ์ที่ 4000 รอบต่อนาที25 นาที ตะกอนรวบรวม และระงับในการฆ่าเชื้อแก้ปัญหาน้ำเกลือ physiological 0.1 g/mL จำนวนเซลล์S. cerevisiae ระงับแก้ไขประมาณ 4.84 108 เซลล์/มล.คำนวณ โดยวิธีการตรวจนับเม็ดเลือด จำนวนเซลล์C. tropicalis NSW NW ระงับแก้ไขประมาณ 3.43 108เซลล์/mL ถัดไป 0.5 mL C. tropicalis NSW NW ระงับและ0.5 mL S. cerevisiae ระงับถูกผสมกับฝัง 20 mLโซลูชัน (SA 2%, 6% PVA และ 1% SiO2) ส่วนผสมนี้ถูกจ่ายผ่านเข็มฉีดยาขนาด 20 มล.ลงในโซลูชันยึด (3% CaCl2และ 5% H3BO3) กับความปั่นป่วนรุนแรง ส่งผลให้ลูกปัดทรงกลมประมาณ 3-5 มม.เส้นผ่านศูนย์กลาง ยีสต์ 2 ถูกร่วมตรึงในเม็ด และระบบผสม IIสร้างเสร็จเรียบร้อย หลังจาก 4 C การลูกปัด SA – PVA – SiO2 ถูกรวบรวมไว้ และล้างด้วยทางสรีรวิทยาละลายน้ำเกลือ แล้ว เม็ดถูกล้างใน PDA ที่30 C ใน 24 ชมเพื่อสร้างการเตรียมแบบตรึง S. cerevisiae: 1 มิลลิลิตร S. cerevisiae ระงับถูกผสมกับ 20 mL ฝังโซลูชัน (SA 2%, 6% PVA และ 1% SiO2) ส่วนผสมนี้ถูกจ่ายผ่าน 20 mLเข็มฉีดยาเป็นยึดโซลูชัน (3% CaCl2 และ 5% H3BO3) มีน้อยความปั่นป่วน ผลทรงกลมลูกปัดประมาณ 3-5 มม.เส้นผ่าศูนย์กลาง เม็ดดำเนินการฟื้นฟูดังกล่าวข้างต้นการรักษาในฉีดโดยถูกตรึงร่วมกับยีสต์การหมักเอทานอลและตรึง S. cerevisiae: ประคำยีสต์แบบตรึงร่วม 20 mLและถูกตรึงกับ S. cerevisiae ได้โอนแยกเข้า250 มล. Erlenmeyer ขวดประกอบด้วย 30 mL หมักเหล้าและปกคลุม ด้วยจุกยาง ใส่ในเบ้าตู้อบหมุนปั่นที่ 30 C ที่ 90 rpm สำหรับ 12 ชม หลังจากหมักผลิตภัณฑ์หมักถูกรวบรวม และกลั่นในนิ่งเนื้อหาเอทานอลถูกวิเคราะห์โดยใช้การ spectrophotometricวิธีการในการกำหนดรตแอมโมเนียมเพไอออนตาม Caputiet al. [36] เนื้อหาที่เหลือน้ำตาลถูกวิเคราะห์ โดย DNSวิธีการเอทานอลในการฉีดโดยการหมักชุดร่วมตรึงยีสต์: ลูกปัด 20 mL SA – PVA – SiO2 ถูกโอนเข้า 250 มล.บรรจุ 30 mL ขวด Erlenmeyer หมักเหล้า และครอบคลุมมีจุกยาง เบ้าใส่ในที่ปั่นโรตารี่ตู้อบที่ 28 C ที่ 90 rpm สำหรับ 4 h หลังจากหมัก การหมักผลิตภัณฑ์ถูกเก็บรวบรวม และลูกปัดถูกล้าง โดยผ่านการฆ่าเชื้อน้ำเกลือ physiological โซลูชั่นสำหรับชุดต่อไปของการหมักชุดหมักดำเนินการสองครั้ง นอลและน้ำตาลเหลือเนื้อหามาวิเคราะห์ โครงสร้างของ SA –ลูกปัด PVA – SiO2 ถูกสังเกต โดย SEM เทคโนโลยี

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เตรียมความพร้อมของผู้ร่วมตรึงยีสต์: S. cerevisiae และ C. tropicalis
NSW-NW ฟื้นขึ้นมาครั้งแรกในกลาง PDA หลาย
ครั้ง เมล็ดฟื้นขึ้นมาปลูกในขวด 250 มล Erlenmeyer
ที่มีขนาดกลาง 100 มลเมล็ดพันธุ์วันที่ 30 องศาเซลเซียสในศูนย์บ่มเพาะปั่นแบบหมุน
ที่ 120 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 48 ชั่วโมง วัฒนธรรมถูกหมุนเหวี่ยงที่ 4000 รอบต่อนาที
เป็นเวลา 25 นาที, ตะกอนที่ถูกเก็บรวบรวมและระงับในการฆ่าเชื้อ
0.1 กรัมมลน้ำเกลือ / สรีรวิทยา จำนวนเซลล์ของ
เอส cerevisiae ระงับประมาณ 4.84? 108 เซลล์ / มล
คำนวณได้จากเลือดวิธีการนับเซลล์ จำนวนเซลล์ของ
ซี tropicalis NSW-NW ระงับประมาณ 3.43? 108
เซลล์ / มิลลิลิตร ถัดไป 0.5 มล C. tropicalis NSW-NW ระงับและ
ระงับ cerevisiae 0.5 มลเอสได้รับการผสมกับ 20 มลฝัง
แก้ปัญหา (2% SA, 6% PVA และ 1% SiO2) ส่วนผสมนี้ได้รับการจ่าย
ผ่านเข็มฉีดยามล 20 เข้าสู่การแก้ไขวิธีการแก้ปัญหา (3% CaCl2
และ 5% H3BO3) กับความปั่นป่วนรุนแรงที่เกิดขึ้นในลูกปัดทรงกลม
ประมาณ 3-5 มม ทั้งสองถูกยีสต์
ร่วมตรึงในลูกปัดและระบบผสมวัฒนธรรมครั้งที่สอง
ที่สร้างเสร็จเรียบร้อยแล้ว หลังจากค้างคืนที่ 4 องศาเซลเซียสที่
ลูกปัด SA-PVA-SiO2 ถูกเก็บรวบรวมและล้างด้วยสรีรวิทยา
น้ำเกลือ จากนั้นลูกปัดมาเพาะเลี้ยงในอาหาร PDA ที่
30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมงในการงอกใหม่?.
เตรียมตรึง S. cerevisiae: 1 mL เอสระงับ cerevisiae
ผสมกับ 20 มลวิธีการแก้ปัญหา (2% SA, PVA% 6 ฝังและ 1% SiO2) ส่วนผสมนี้ได้รับการจ่ายผ่านมล 20
เข็มฉีดยาเข้าไปในการแก้ไขวิธีการแก้ปัญหา (3% CaCl2 และ 5% H3BO3) อ่อน
กวนผลในลูกปัดทรงกลมประมาณ 3-5 มิลลิเมตร
เส้นผ่าศูนย์กลาง ลูกปัดได้ดำเนินการฟื้นฟูดังกล่าวข้างต้น
การรักษา.
การหมักเอทานอลไฮโดรไลเสทจากยีสต์ร่วมตรึง
และตรึง S. cerevisiae: 20 มลร่วมตรึงยีสต์ลูกปัด
และตรึง S. cerevisiae ถูกย้ายแยกออกเป็น
250 มิลลิลิตรขวด Erlenmeyer ที่มีขนาด 30 มลเมรัย
และปกคลุมด้วยจุกยาง ขวดถูกวางไว้ใน
ศูนย์บ่มเพาะปั่นโรตารี่วันที่ 30? C ที่ 90 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 12 ชั่วโมง หลังจากการหมัก
ผลิตภัณฑ์หมักถูกเก็บรวบรวมและการกลั่นในยังคง.
เนื้อหาเอทานอลที่ได้รับการวิเคราะห์โดยใช้สเปก
วิธีวิเคราะห์ไอออนโครตาม Caputi
et al, [36] เนื้อหาน้ำตาลที่เหลือได้รับการวิเคราะห์โดยการ DNS
วิธี.
การหมักเอทานอลในชุดไฮโดรไลโดยร่วมตรึง
ยีสต์: 20 มล SA-PVA-SiO2 ลูกปัดถูกโอนเข้ามา 250 มิลลิลิตร
ขวด Erlenmeyer มี 30 มลสุราหมักและปกคลุม
ด้วยจุกยาง ขวดถูกวางไว้บนเครื่องปั่นโรตารี่
ศูนย์บ่มเพาะวันที่ 28? C ที่ 90 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 4 ชั่วโมง หลังจากการหมักดอง
ผลิตภัณฑ์ที่ถูกเก็บรวบรวมและลูกปัดถูกล้างโดยผ่านการฆ่าเชื้อ
น้ำเกลือทางสรีรวิทยาสำหรับชุดต่อไปของการหมัก.
หมักดำเนินการสำหรับอีกสองครั้ง เอทานอล
เนื้อหาและน้ำตาลที่เหลือถูกนำมาวิเคราะห์ โครงสร้างของ SA-
ลูกปัด PVA-SiO2 ถูกตั้งข้อสังเกตโดยเทคโนโลยี SEM

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การเตรียมการของยีสต์ S . cerevisiae Co ตรึง : C . tropicalis มีผลต่อnsw-nw ในขั้นแรกคืนชีพบน PDA ที่มีหลายครั้ง การฟื้นฟูเมล็ดปลูกหมักในฟลาสก์ขนาด 250 มิลลิลิตร ขวดที่มีเมล็ดขนาดกลาง 100 มิลลิลิตรที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสใน incubator shaker โรตารีที่ 120 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 48 ชั่วโมง อยู่ที่ 4000 รอบต่อนาทีระดับวัฒนธรรม25 นาทีที่รวบรวมและแขวนลอยในปลอดเชื้อ0.1 g / ml สรีรวิทยา น้ำเกลือ เซลล์จำนวนS . cerevisiae ช่วงล่างประมาณบริษัท 108 เซลล์ / มิลลิลิตรเลือดเซลล์นับคำนวณโดยวิธี เซลล์จำนวนC . tropicalis มีผลต่อ nsw-nw ช่วงล่างประมาณ 3.43 108เซลล์ถัดไป / มิลลิลิตร เป็น 0.5 มล. C . tropicalis มีผลต่อ nsw-nw ช่วงล่างและ0.5 มล. ผสมกับ S . cerevisiae ระงับ 20 ml ปกปิดสารละลาย ( 2 % ใน 6 % PVA และ 1% SiO2 ) ส่วนผสมนี้จ่ายผ่าน 20 ml เข็มเข้าไปในสารละลาย CaCl2 ( 3 ) ซ่อมและ 5% h3bo3 ) ไม่รุนแรง ไม่ส่งผลให้เม็ดทรงกลมประมาณ 3 – 5 มม. สองยีสต์คือCo ตรึงในเม็ดและผสมวัฒนธรรมที่สองระบบได้สร้าง หลังจากคืนที่ 4 ซีซา ( PVA ) SiO2 ลูกปัดถูกเก็บและล้างด้วยทางสรีรวิทยาน้ำเกลือ แล้วลูกปัดที่เพาะเลี้ยงในอาหาร PDA ที่30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง เพื่อสร้างการเตรียม ( S . cerevisiae : 1ml S . cerevisiae ระงับผสมกับ 20 ml การฝังตัวโซลูชั่น ( 2% Sa 6% PVA และ 1% SiO2 ) ส่วนผสมนี้คือจ่ายผ่าน 20 มล.ฉีดยาเข้าไปแก้ไข โซลูชั่น ( CaCl2 3 % และ 5 % h3bo3 ) ไม่รุนแรงเขย่าให้เม็ดประมาณ 3 – 5 มิล ทรงกลมในเส้นผ่าศูนย์กลาง ลูกปัดทดลองใหม่ข้างต้นการรักษาหมักเอธานอลในภาคใต้โดยยีสต์ตรึง COตรึงและ S . cerevisiae 20 มล. CO ( ยีสต์ ลูกปัดตรึงและ S . cerevisiae ถูกแยกเป็น250 ml . ขวดบรรจุ 30 ml สุราหมักเออร์เลนเมเยอร์หุ้มกันชนยาง ขวดที่ถูกวางไว้บนหมุนตู้อบที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสเขย่าที่ 90 รอบต่อนาที เป็นเวลา 12 ชั่วโมง หลังจากการหมักผลิตภัณฑ์หมักและกลั่นในการเก็บรวบรวมอยู่ทั้งเนื้อหา วิเคราะห์โดยใช้ )วิธีการหาปริมาณไอออนตาม caputi โครมิคet al . [ 36 ] น้ําตาลเหลือเนื้อหา โดยใช้ DNSวิธีการหมักเอทานอลในภาคใต้โดย CO ( ชุดยีสต์ : 20 ml ซา– PVA –ลูกปัดถูกย้ายเป็น SiO2 250 มิลลิลิตรเออร์เลนเมเยอร์ flasks สุราหมักที่มี 30 มล. และครอบคลุมกับกันชนยาง ขวดอยู่ในเครื่องปั่น โรตารี่เครื่องฟักไข่ที่ 28 C ที่ 90 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 4 ชั่วโมง หลังจากหมัก , หมักผลิตภัณฑ์ ศึกษาและลูกปัดที่ถูกล้างโดยการเป็นหมันเกลือทางสรีรวิทยาสำหรับชุดต่อไปของการหมักการหมักแบบออกมาอีกสองครั้ง เอทานอลเหลือน้ำตาลและปริมาณวิเคราะห์ โครงสร้างของซาจำกัดPVA ( SiO2 ลูกปัดที่พบโดย SEM เทคโนโลยี