The efficiency of the multiplex assa

The efficiency of the multiplex assay was further confirmed
when we looked for Shigella in artificially contaminated food
samples. The sensitive detection of foodborne pathogens in
produce requires optimal cell lysis and efficient DNA purification
to remove associated PCR inhibitors (Schrader et al., 2012).
Boiling in PBS or water has been the DNA isolation method of
choice in the FDA Survey of Domestic and Import Fresh Produce
assignments for Shigella because its cost is low and it can easily
be used to process a large volume of samples, however there is
no step to remove eventual food matrix-associated PCR in-
hibitors (Warren et al., 2009). Such inhibitors would cause false
negative PCR results with potentially serious public health
consequences when a contaminated food is not removed from
circulation. We found that the reagents and methods used in
DNA extraction had some impact on the PCR outcome. The
presence of inhibitors produced false negative PCR results in
DNA prepared from three commercial DNA extraction kits, but
this effect was not seen with the boiling method, probably
because the DNA and DNA inhibitors were more diluted. Indeed,
we found that diluting the DNA template 1:10 before the assay
reduced the concentration of inhibitory compounds to a level
that did not affect DNA amplification and Shigella could be
detected. Nevertheless, as a protective measure, it may be useful
to add an internal amplification control as we did recently for the TaqMan-based multiplex real-time assay for Shigella and
EIEC (Deer and Lampel, 2010).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Efficiency ของทดสอบ multiplex ได้เพิ่มเติม confirmedเมื่อเรามองหา Shigella artificially ปนเปื้อนอาหารตัวอย่างการ การตรวจพบที่สำคัญของ foodborne โรคในผลิตจำเป็นต้องใช้เซลล์สุด lysis และ efficient purification ดีเอ็นเอเอาเกี่ยวข้อง PCR inhibitors (Schrader et al., 2012)ใน PBS หรือน้ำเดือดได้รับวิธีการแยกดีเอ็นเอของทางเลือกในการสำรวจของ FDA ของประเทศและนำเข้าสดผลิตกำหนดสำหรับ Shigella เนื่องจากต้นทุนจะต่ำ และสามารถได้อย่างง่ายดายใช้ในการประมวลผลจำนวนมากอย่าง อย่างไรก็ตาม มีไม่มีขั้นตอนการเอาอาหารในเมตริกซ์สัมพันธ์กับ PCR ในhibitors (วอร์เรน et al., 2009) Inhibitors ดังกล่าวจะทำให้เป็นเท็จลบผล PCR อาจรุนแรงสาธารณสุขผลเมื่อไม่มีเอาอาหารที่ปนเปื้อนจากหมุนเวียน เราพบว่า reagents และวิธีที่ใช้ในสกัดดีเอ็นเอมีผลบางผล PCR ที่ของ inhibitors ผลิต PCR ผลลบเท็จในเตรียมจากสามค้าดีเอ็นเอแยกชุด ดีเอ็นเอ แต่ลักษณะพิเศษนี้ไม่เห็น ด้วยวิธีการเดือด คงเนื่องจากดีเอ็นเอและดีเอ็นเอ inhibitors ถูกผสมขึ้น แน่นอนเราพบว่า diluting 1:10 ก่อนการวิเคราะห์ดีเอ็นเอแม่แบบลดความเข้มข้นของสารลิปกลอสไขระดับที่ไม่ได้มีผลต่อดีเอ็นเอ amplification และ Shigella อาจตรวจพบ อย่างไรก็ตาม เป็นมาตรการป้องกัน มันอาจจะเป็นประโยชน์การเพิ่มตัวควบคุมภายใน amplification เป็นเราไม่ล่าสุดสำหรับการใช้ TaqMan ล็กแบบเรียลไทม์ assay ใน Shigella และEIEC (เดียร์และ Lampel, 2010)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ciency EF ไฟของการทดสอบหลายต่อไปเป็นนักโทษสาย rmed
เมื่อเรามองหา Shigella ในสาย Arti
ปนเปื้อนอาหารทางการตัวอย่าง การตรวจสอบที่มีความสำคัญของเชื้อโรคที่เกิดจากอาหารในการผลิตต้องมีการสลายเซลล์ที่ดีที่สุดและดีเอ็นเอเพียงพอไฟ EF Puri ไอออนไฟที่จะเอาสารยับยั้งPCR ที่เกี่ยวข้อง (Schrader et al., 2012). เดือดในพีบีเอสหรือน้ำได้รับวิธีการแยกดีเอ็นเอของทางเลือกในการสำรวจองค์การอาหารและยาของประเทศและนำเข้าผักสดที่ได้รับมอบหมายสำหรับ Shigella เพราะค่าใช้จ่ายที่ต่ำและสามารถนำมาใช้ในการประมวลผลปริมาณมากตัวอย่างแต่มีไม่มีขั้นตอนในการลบ PCR เมทริกซ์ที่เกี่ยวข้องอาหารในที่สุดห hibitors (วอร์เรน et al., 2009) สารยับยั้งการดังกล่าวจะทำให้เกิดความผิดพลาดผล PCR เชิงลบกับประชาชนที่อาจเกิดขึ้นต่อสุขภาพอย่างร้ายแรงผลที่ตามมาเมื่อมีการปนเปื้อนอาหารไม่ถูกลบออกจากการไหลเวียน เราพบว่าสารเคมีและวิธีการที่ใช้ในการสกัดดีเอ็นเอมีผลกระทบบางอย่างเกี่ยวกับผล PCR การปรากฏตัวของสารยับยั้งการผลิตผลลัพธ์ PCR เท็จลบในดีเอ็นเอที่เตรียมจากสามชุดสกัดดีเอ็นเอในเชิงพาณิชย์แต่ผลกระทบนี้ก็ไม่มีใครเห็นด้วยวิธีการต้มอาจจะเพราะดีเอ็นเอและสารยับยั้งดีเอ็นเอถูกเจือจางมากขึ้น อันที่จริงเราพบว่าแม่แบบเจือจางดีเอ็นเอ 01:10 ก่อนที่จะทดสอบลดความเข้มข้นของสารยับยั้งในระดับที่ไม่กระทบไอออนบวกสายampli DNA และ Shigella อาจจะตรวจพบ แต่เป็นมาตรการป้องกันก็อาจจะเป็นประโยชน์ที่จะเพิ่มการควบคุมไฟไอออนบวก ampli ภายในที่เราทำเมื่อเร็ว ๆ นี้สำหรับการทดสอบในเวลาจริงหลาย TaqMan ที่ใช้สำหรับ Shigella และ EIEC (กวางและ Lampel 2010)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การถ่ายทอดประสิทธิภาพของ EF ( multiplex คือ con เพิ่มเติม จึง rmed
เมื่อเราตามหาชิเกลลากิจึง cially ปนเปื้อนในตัวอย่างอาหาร

การตรวจหาความไวของเชื้อโรคอาหารเป็นพิษในเซลล์ที่เหมาะสมและการสลาย
ผลิต ต้อง EF จึง cient ดีเอ็นเอจึงประจุลบที่ Puri
PCR inhibitors ( ชเรเดอร์ et al . , 2012 ) .
เดือดใน PBS หรือน้ำที่ได้รับการสกัดดีเอ็นเอวิธี
ทางเลือกในการสำรวจขององค์การอาหารและยาในประเทศและนำเข้าสดผลิต
การบ้านสำหรับชิเกลล่า เพราะต้นทุนจะต่ำและมันได้อย่างง่ายดายสามารถ
ใช้กระบวนการปริมาณขนาดใหญ่ของตัวอย่าง แต่ไม่มีขั้นตอนการลบ PCR ที่
-
hibitors ในที่สุดในฟู้ดแมทริกซ์ ( วอร์เรน et al . , 2009 ) เช่นการทำให้เท็จ
ลบ PCR ผลด้วย
สาธารณสุขอาจร้ายแรงผลเมื่อปนเปื้อนในอาหารไม่ลบออกจาก
การหมุนเวียน เราจะพบว่า สารเคมีและวิธีการที่ใช้ในการสกัดดีเอ็นเอมี
ผลกระทบและผล
มีการผลิตลบปลอม PCR ผลดีเอ็นเอดีเอ็นเอ 3
จากโฆษณาชุดการสกัด แต่ผลนี้ไม่ได้เจอกับต้มอาจ
วิธีเพราะดีเอ็นเอและดีเอ็นเอโปรตีนถูกยิ่งเจือจาง แน่นอน
เราพบว่าเจือจางดีเอ็นเอแม่แบบ 10 ก่อน (
ลดความเข้มข้นของสารออกฤทธิ์ในระดับ
ที่ไม่มีผลต่อดีเอ็นเอ การถ่ายทอดและ ampli ชิเกลลาอาจ
ตรวจพบ อย่างไรก็ตาม มาตรการ ป้องกัน มันอาจจะมีประโยชน์
เพิ่มภายในการควบคุม ampli จึงเป็นเราได้เมื่อเร็ว ๆนี้สำหรับ taqman ตามวิธีมัลติเพล็กซ์แบบเรียลไทม์สำหรับชิเกลลาและ
eiec ( กวางและ lampel , 2010 )