Purification of the laccase protein

Purification of the laccase protein. The culture supernatant of P. pastoris harboring pPICHOLI-Lacc was collected by centrifugation at 2,500 ×g for 10 min. The supernatant was precipitated by ammonium sulfate fractionation. The precipitant was dissolved in phosphate buffered saliine buffer and then loaded onto a DEAESephadex column (Amersham Biosciences). The bound protein was eluted by NaCl gradient in 30 mM sodium phosphate buffer (pH 7.0). The flow rate was 1 mL/min.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ทำให้บริสุทธิ์ของโปรตีน laccase Supernatant วัฒนธรรมของ P. pastoris harboring pPICHOLI Lacc ถูกรวบรวม โดย centrifugation ที่ 2500 × g สำหรับ 10 นาที Supernatant ถูกตกตะกอน ด้วยแอมโมเนียมซัลเฟตแยกส่วน Precipitant ถูกละลายในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ saliine ถูกบัฟเฟอร์แล้ว โหลดลงในคอลัมน์ DEAESephadex (เวลาออก Amersham) โปรตีนถูกผูกไว้ที่ eluted โดยไล่ระดับ NaCl ใน 30 mM โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 7.0) อัตราการไหล 1 mL/min

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การทำให้บริสุทธิ์ของโปรตีนแลคเคส ใสวัฒนธรรมของพี pastoris เก็บงำ pPICHOLI-LACC ที่ถูกเก็บรวบรวมโดยการหมุนเหวี่ยงที่ 2500 ×กรัมเป็นเวลา 10 นาที สารละลายได้รับการตกตะกอนโดยแยกแอมโมเนียมซัลเฟต กระตุ้นให้เกิดถูกละลายในฟอสเฟตบัฟเฟอร์บัฟเฟอร์ saliine และโหลดแล้วลงในคอลัมน์ DE​​AESephadex (Amersham ชีววิทยาศาสตร์) โปรตีนที่ถูกผูกไว้โดยถูกชะลาดโซเดียมคลอไรด์ใน 30 โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์มิลลิ (pH 7.0) อัตราการไหล 1 มิลลิลิตร / นาที

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

- การทำให้บริสุทธิ์ของโปรตีน วัฒนธรรมนำของหน้า pastoris harboring ppicholi lacc รวบรวมโดยการเหวี่ยงแยก 2500 × G 10 นาทีมาตกตะกอนด้วยแอมโมเนียม ซัลเฟต ( น่าน . ที่ละลายได้ในกรดสารตกตะกอนฟอสเฟตบัฟเฟอร์ saliine แล้วโหลดลงในคอลัมน์ ( ที่ deaesephadex Biosciences )ผูกพันโปรตีนขนาดตัวอย่างโดยการใน 30 มิลลิเมตรโซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7.0 ) อัตราการไหลเท่ากับ 1 มิลลิลิตร / นาที