The Mx gene was originally found in

The Mx gene was originally found in laboratory mice in an infection experiment using influenza virus (Lindermann, 1962). Almost all of the mouse strains in that experiment died from the infection, and only the A2G strain had resistance to the virus. This resistant character was shown to be inherited as a single autosomal dominant trait (Lindermann et al., 1963; Lindermann, 1964; Haller et al., 1979). A congenic mouse strain was established by introducing the Mx+ allele of the A2G resistant strain into the Mx- sensitive inbred strain BALB/c (Staeheli et al., 1984). By immunizing parental BALB/c mice with extracts of interferon (IFN)-treated cultured cells from congenic BALB/c-Mx+ mice, a specific antibody against Mx protein was obtained (Horisberger et al., 1983; Staeheli et al., 1985). The Mx protein was detected in the nucleus of IFN-alpha/beta-treated mouse cells by immunofluorescence using the anti-Mx antibody (Dreiding et al., 1985). Thereafter, by using the antibody as an indicator, cDNA encoding the Mx protein was cloned from a cDNA library constructed from IFN-treated cells of congenic BALB/c-Mx+ mice (Staeheli et al., 1986a). IFN-treated Mx+ mouse cells contained a 3.5-kb Mx mRNA in the Northern blot, while Mx- cells failed to express the transcript. The functional Mx+ gene from an A2G mouse was found to contain 14 exons and encode 631 amino acids. The Mx- allelic mouse strains were found to be missing sequence of exons 9 through 11 or to contain a point mutation that converts lysine at position 389 to a stop codon (Staeheli et al., 1988). If these polymorphisms of the Mx gene could be detected in domestic animals, it would be possible to produce breeds that show resistance to infectious diseases.

using the double-stranded cDNA as a template with the Mx
gene-specific primers NE2-F (5-CCAGAATGCATCAGAG
GTGA-3, bp 671–690) and NE2-R (5-TCCTTTCCATGCATT
GTCTG-3, bp 1453–1434), and the adaptor primers AP1 (5-
CCATCCTAATACGACTCACTATAGGGC-3) and AP2 (5-
ACTCACTATAG GGCTCGAGCGGC-3). Furthermore, Mx
gene-specific primers, FUL-F (5-ATAGAGCAAGCCAGAA
GAACAGCAG-3, bp 113–137) and FUL-R (5-GCTTTGACA
AGGGTAGGCATATCAG-3, bp 2432–2408) were generated
based on the sequences of progressively amplified 5- and 3-
RACE to obtain the full-length Mx cDNA. Amplified fulllength
Mx cDNA fragments were cloned into pGEM-T Easy
vector (Promega).
Sequencing and

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เดิมพบยีน Mx ในหนูห้องปฏิบัติการในการทดลองเชื้อไวรัสไข้หวัดใหญ่ (Lindermann, 1962) โดยใช้ เกือบทุกสายพันธุ์ของเมาส์ในการทดลองที่เสียชีวิตจากการติดเชื้อ และพันธุ์ A2G เท่านั้นมีความต้านทานต่อไวรัส ตัวละครตัวนี้ทนได้แสดงการสืบทอดมาเป็นตัวเดียว autosomal หลักติด (Lindermann et al., 1963 Lindermann, 1964 Haller et al., 1979) ต้องใช้เมาส์ congenic ก่อตั้งขึ้น โดยการแนะนำ Mx + allele ของพันธุ์ A2G ทนเป็น Mx-ลับ inbred สายพันธุ์ BALB/c (Staeheli et al., 1984) โดย immunizing หนู BALB/c โดยผู้ปกครองกับบางส่วนของอินเตอร์เฟียรอน (IFN) -บำบัดอ่างเซลล์จาก congenic BALB/c - Mx + หนู แอนติบอดีที่เฉพาะกับ Mx โปรตีนได้รับ (Horisberger และ al., 1983 Staeheli และ al., 1985) โปรตีน Mx พบในนิวเคลียสของเซลล์ IFN-อัลฟา/เบต้ารักษาเมาส์ โดย immunofluorescence ใช้แอนติบอดีต่อต้าน-Mx (Dreiding และ al., 1985) หลังจากนั้น โดยใช้แอนติบอดีที่เป็นตัวบ่งชี้ cDNA ที่เข้ารหัสโปรตีน Mx ถูกโคลนจากรี cDNA ที่สร้างจากเซลล์รับ IFN ของ congenic BALB/c-Mx + หนู (Staeheli et al., 1986a) รับ IFN Mx + เมาส์เซลล์อยู่ mRNA Mx 3.5 kb ในการเหนือคืนในตา ในขณะที่เซลล์ Mx ไม่สามารถแสดงหลักฐานการศึกษา ทำงาน Mx + ยีนจากการเมาส์ A2G พบประกอบด้วย 14 exons และเข้ารหัสกรดอะมิโน 631 สายพันธุ์ allelic เมาส์ Mx - พบลำดับของ exons 9 ถึง 11 หายไป หรือมีการกลายพันธุ์ของจุดที่แอล-ไลซีนที่ตำแหน่ง 389 แปลงรหัสพันธุกรรมหยุด (Staeheli et al., 1988) ถ้าพบเหล่านี้ polymorphisms ยีน Mx สัตว์ภายในประเทศ มันจะเป็นไปได้ในการผลิตสายพันธุ์ที่ทนต่อโรคใช้ cDNA ควั่นคู่เป็นแม่กับ Mxยีนเฉพาะไพรเมอร์ NE2-F (5-CCAGAATGCATCAGAGGTGA-3, bp 671-690) และ NE2-R (5-TCCTTTCCATGCATTGTCTG-3, bp 1453 – 1434), และไพรเมอร์อะแดปเตอร์ AP1 (5-CCATCCTAATACGACTCACTATAGGGC-3) และ AP2 (5-ACTCACTATAG GGCTCGAGCGGC-3) นอกจากนี้ Mxยีนเฉพาะไพรเมอร์ FUL-F (5-ATAGAGCAAGCCAGAAGAACAGCAG-3, bp 113 – 137) และ FUL-R (5-GCTTTGACAAGGGTAGGCATATCAG-3, bp 2432-2408) สร้างขึ้นตามลำดับของความก้าวหน้าเอาต์ 5 - 3-การแข่งขันรับ cDNA Mx ปราศจาก Fulllength เอาต์บางส่วนของ cDNA Mx มีโคลนเป็น Easy pGEM-Tเวกเตอร์ (Promega)ลำดับเบส และ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ยีน Mx ถูกค้นพบครั้งแรกในหนูทดลองในการทดลองโดยใช้การติดเชื้อไวรัสไข้หวัดใหญ่ (Lindermann, 1962) เกือบทั้งหมดของสายพันธุ์เมาส์ในการทดลองที่เสียชีวิตจากการติดเชื้อและมีเพียงสายพันธุ์ที่มีความต้านทาน A2G ไวรัส ตัวละครที่ทนถูกนำมาแสดงจะได้รับมรดกเป็นลักษณะที่โดดเด่น autosomal เดียว (Lindermann et al, 1963;. Lindermann 1964. ฮาลเลอร์, et al, 1979) สายพันธุ์เมาส์ congenic ก่อตั้งขึ้นโดยการแนะนำอัลลีล Mx + ของสายพันธุ์ที่ทน A2G เข้าไปในสายพันธุ์ที่มีความสำคัญมา แต่กำเนิด Mx- Balb / C (Staeheli et al., 1984) โดยภูมิคุ้มกันของผู้ปกครอง Balb / C หนูด้วยสารสกัดจาก interferon (IFN) -treated เซลล์เพาะเลี้ยงจาก congenic Balb / C-Mx + หนูแอนติบอดีที่เฉพาะเจาะจงกับโปรตีนที่ได้รับ Mx (Horisberger et al, 1983;.. Staeheli, et al, 1985) . โปรตีน Mx ถูกตรวจพบในนิวเคลียสของ IFN-อัลฟา / เบต้าเซลล์ที่ได้รับการรักษาโดยการใช้เมาส์ immunofluorescence ใช้แอนติบอดีต่อต้าน Mx (Dreiding et al., 1985) หลังจากนั้นเป็นต้นมาโดยใช้แอนติบอดีเป็นตัวบ่งชี้, การเข้ารหัสยีนโปรตีน Mx ถูกโคลนจากห้องสมุด cDNA สร้างขึ้นจากเซลล์ IFN รับการรักษาของ congenic Balb / C-Mx + หนู (Staeheli et al., 1986a) IFN รับการรักษา Mx + เซลล์เมาส์ที่มีอยู่ 3.5 กิโล Mx mRNA ใน blot ภาคเหนือในขณะที่เซลล์ Mx- ล้มเหลวที่จะแสดงหลักฐาน ทำงาน Mx + ยีนจากเมาส์ A2G พบว่ามี 14 exons และเข้ารหัส 631 กรดอะมิโน สายพันธุ์เมาส์ allelic Mx- ถูกพบว่ามีการขาดหายไปของลำดับ exons 9 ถึง 11 หรือที่จะมีการกลายพันธุ์ที่แปลงจุดไลซีนที่ตำแหน่ง 389 ที่จะหยุด codon (Staeheli et al., 1988) ถ้าความหลากหลายเหล่านี้ของยีน Mx สามารถตรวจพบได้ในสัตว์ในประเทศก็จะมีความเป็นไปได้ในการผลิตสายพันธุ์ที่แสดงความต้านทานต่อโรคติดเชื้อ. โดยใช้ยีนเกลียวคู่เป็นแม่แบบที่มี Mx ไพรเมอร์ยีนเฉพาะ NE2-F (5 CCAGAATGCATCAGAG GTGA-3, 671-690 bp) และ NE2-R (5 TCCTTTCCATGCATT GTCTG-3, bp 1453-1434) และไพรเมอร์อะแดปเตอร์ AP1 (5 CCATCCTAATACGACTCACTATAGGGC-3) และ AP2 (5 ACTCACTATAG GGCTCGAGCGGC-3) . นอกจากนี้ Mx ไพรเมอร์ยีนเฉพาะ FUL-F (5 ATAGAGCAAGCCAGAA GAACAGCAG-3, 113-137 bp) และ FUL-R (5 GCTTTGACA AGGGTAGGCATATCAG-3, bp 2432-2408) ถูกสร้างขึ้นตามลำดับของการขยายความก้าวหน้า 5 และ 3 การแข่งขันจะได้รับเต็มความยาวยีน Mx ขยาย fulllength Mx เศษ cDNA ถูกโคลนเข้า pGEM-T ง่ายเวกเตอร์ (Promega). ลำดับและ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ส่วน MX ยีนเดิมพบในหนูทดลอง ทดลองใช้ในการติดเชื้อไวรัสไข้หวัดใหญ่ ( ลินเดอร์มานน์ , 1962 ) เกือบทั้งหมดของเมาส์สายพันธุ์ที่ทดลองตายจากการติดเชื้อ และมีเพียง a2g สายพันธุ์มีความต้านทานต่อไวรัส ตัวป้องกันนี้ได้แสดงให้สืบทอดเป็นเดียวเกมพนัน ( ลินเดอร์มานน์ et al . , 1963 ; ลินเดอร์มานน์ , 1964 ; Haller et al . ,1979 ) เป็น congenic เมาส์สายพันธุ์ก่อตั้งโดยแนะนำ MX อัลลีลของสายพันธุ์ที่ทน a2g เข้า MX ที่สําคัญ - สายพันธุ์แท้สายพันธุ์ balb / C ( staeheli et al . , 1984 ) โดยภูมิคุ้มกันหนู balb C / ผู้ปกครอง ด้วยสารสกัดของรอน ( IFN ) - ดูแลเพาะเลี้ยงเซลล์จาก congenic balb / c-mx หนู , แอนติบอดีที่เฉพาะเจาะจงกับโปรตีน MX ได้ ( horisberger et al . , 1983 ; staeheli et al . ,1985 ) ส่วน MX โปรตีนที่ตรวจพบในนิวเคลียสของ IFN Alpha / Beta ถือว่าเมาส์เซลล์โดยวิธีการใช้แอนติบอดีต่อต้าน MX ( dreiding et al . , 1985 ) หลังจากนั้น โดยการใช้แอนติบอดีเป็นโปรตีนตัวบ่งชี้ cDNA ที่ MX การเข้ารหัสที่โคลนจากห้องสมุด cDNA ที่สร้างขึ้นจากหนึ่งถือว่าเป็นเซลล์ของ congenic balb / c-mx หนู ( staeheli et al . , 1986a )หนึ่งเซลล์มี 3.5-kb ถือว่า MX เมาส์ MX mRNA ใน blot ภาคเหนือในขณะที่ MX - เซลล์ไม่สามารถแสดงหลักฐาน . หน้าที่ MX ยีนจาก a2g เมาส์ก็พบว่ามี 14 โคและการเข้ารหัส 631 กรดอะมิโนส่วน MX - สายพันธุ์เมาส์ allelic พบหายดับที่มี 9 ถึง 11 หรือมีจุดเปลี่ยนแปลงที่แปลง lysine ที่ตำแหน่งที่จะหยุด codon ( staeheli et al . , 1988 ) ถ้าเหล่านี้ความหลากหลายของ MX ยีนสามารถตรวจพบได้ในสัตว์ในประเทศ ก็จะสามารถผลิตสายพันธุ์ที่แสดงความต้านทานต่อโรคติดเชื้อ .

ใช้คู่กับ stranded cDNA เป็นแม่แบบของยีนโดยเฉพาะ ne2-f ( 5-ccagaatgcatcagag MX

gtga-3 BP 671 ( 690 ) และ ne2-r ( 5-tcctttccatgcatt
gtctg-3 BP = ( การ ) และอะแดปเตอร์ไพรเมอร์ ap1 ( 5 -
ccatcctaatacgactcactatagggc-3 ) และ ap2 ( 5 -
actcactatag ggctcgagcggc-3 ) นอกจากนี้ ส่วนของดีเอ็นเอยีน MX
, ful-f ( 5-atagagcaagccagaa
gaacagcag-3 BP 113 ( 137 ) และ ful-r ( 5-gctttgaca
agggtaggcatatcag-3 BP 2432 ( 1346 ) ขึ้น
ตามลำดับอย่างต่อเนื่องขยาย 5 และ 3
แข่งเพื่อให้ได้เต็ม MX ยีน . ขยาย fulllength
MX cDNA ชิ้นส่วนถูกโคลนเข้า pgem-t เวกเตอร์ง่าย

และลำดับ ( promega )