Reliable and simple methods are req

Reliable and simple methods are required for detection of low concentrations of cytokines and
some other proteins in complex biological fluids. This is especially important when monitoring
the immune responses under various physiological and pathophysiological conditions in vivo
or following production of these compounds in in vitro systems. Cytokines and other
immunologically active molecules are being predominantly detected by enzyme-linked
immunosorbent assays (ELISA) and newly also by immuno-polymerase chain reactions
(iPCR). New simplified variants of iPCR have recently been described where antibodies are
connected with multiple DNA templates through gold nanoparticles (Au-NPs) to form a new
class of detection reagents. In this study we compared functionalized Au-NP-based iPCR (NanoiPCR)
with standard ELISA and iPCR for the detection of interleukin (IL)-3 and stem cell factor
(SCF). The same immunoreagents (IL-3- and SCF-specific polyclonal antibodies and their
biotinylated forms) were used throughout the assays. The obtained data indicate that both
Nano-iPCR and iPCR are superior in sensitivity and detection range than ELISA. Furthermore,
Nano-iPCR is easier to perform than the other two methods. Nano-iPCR was used for
monitoring changes in concentration of free SCF during growth of mast cells in SCF-conditioned
media. The results show that growing cultures gradually reduce the amount of SCF in
supernatant to 25% after 5 days. The combined data indicate that Nano-iPCR assays may be
preferable for rapid detection of low concentrations of cytokines in complex biological fluids.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วิธีที่ง่าย และน่าเชื่อถือจะต้องตรวจความเข้มข้นต่ำสุดของ cytokines และบางอื่น ๆ โปรตีนในของเหลวทางชีวภาพที่ซับซ้อน นี้มีความสำคัญอย่างยิ่งเมื่อตรวจสอบการตอบสนองของภูมิคุ้มกันที่สภาวะต่าง ๆ pathophysiological และสรีรวิทยาในสัตว์ทดลองหรือต่อการผลิตสารเหล่านี้ในระบบการเพาะเลี้ยง Cytokines และอื่น ๆโมเลกุล immunologically ใช้กำลังส่วนใหญ่ตรวจพบ โดยเอนไซม์ลิงค์immunosorbent assays (ELISA) และใหม่ยัง โดยปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรส immuno(iPCR) ตัวแปรภาษาใหม่ของ iPCR เพิ่งได้อธิบายที่เป็นแอนตี้เชื่อมต่อกับดีเอ็นเอแม่แบบที่หลายผ่านเก็บกักทอง (Au-NPs) แบบใหม่คลาสของ reagents ตรวจ ในการศึกษานี้ เราเปรียบเทียบ iPCR สแตน functionalized Au NP-ตาม (NanoiPCR)มาตรฐาน ELISA และ iPCR สำหรับตรวจ interleukin (IL) -3 และตัวเซลล์ต้นกำเนิด(SCF) Immunoreagents เดียวกัน (IL-3 และ SCF-เฉพาะแอนตี้ polyclonal และของพวกเขาแบบฟอร์ม biotinylated) ถูกใช้ตลอด assays ข้อมูลที่ได้รับการบ่งชี้ว่า ทั้งสองนาโน-iPCR และ iPCR เหนือกว่าในช่วงความไวและตรวจพบมากกว่า ELISA นอกจากนี้IPCR นาโนสามารถทำมากกว่าสองวิธีอื่น ๆ ได้ IPCR นาโนใช้สำหรับติดตามการเปลี่ยนแปลงในความเข้มข้นของ SCF ฟรีระหว่างการเจริญเติบโตของเซลล์เสาในปรับอากาศ SCFสื่อ ผลลัพธ์แสดงว่า เติบโตวัฒนธรรมค่อย ๆ ลดจำนวน SCF ในsupernatant 25% หลังจาก 5 วัน รวมข้อมูลบ่งชี้ว่า นาโน iPCR assays อาจตรวจความเข้มข้นต่ำสุดของ cytokines ในของเหลวทางชีวภาพที่ซับซ้อนอย่างรวดเร็วกว่า