All the preparative steps were carr

All the preparative steps were carried out at 4
C with
continuous stirring. Skin pieces were treated with 0.1 N
NaOH to remove non-collagenous proteins at a solid to
solution ratio of 1:10 (w/v) for 3 days and washed with
distilled water till the washed water became neutral or
slightly basic pH. The alkali solution was changed every
day. Then, the sample was defatted with 10% butyl alcohol
at a solid to solvent ratio of 1:10 (w/v) for 24 h,
washed with ample amount of distilled water and lyophilized.
The lyophilized matter was extracted with 0.5 M
acetic acid for 3 days. Then, 10% of pepsin (1:10,000
units, Junsei Chemical Co. Ltd., Tokyo, Japan), according
to the lyophilized weight was added and hydrolysed
for 48 h. The viscous solution was centrifuged at
12,000 · g for 1 h at 4
C and supernatant was collected.
The supernatant was salted out by adding NaCl to a final
concentration of 0.7 M and followed by precipitation
by addition of NaCl to a final concentration of
2.3 M in 0.05 M Tris–HCl (pH 7.5). The resultant precipitate
was separated by centrifugation at 12,000 · g
for 1 h at 4
C. The precipitate was then dissolved in
0.5 M acetic acid, dialysed against 0.1 M acetic acid, distilled
water, and lyophilized.
2.4. Sodium dodecyl sulphate polyacrylamide gel

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ทุกขั้นตอนกราที่ดำเนินการใน 4 Cการกวนต่อเนื่อง ผิวชิ้นได้รับการรักษา ด้วย 0.1 NNaOH การเอาโปรตีนไม่ใช่ collagenous ที่เป็นของแข็งการแก้ไขปัญหาอัตราส่วน 1:10 (w/v) สำหรับ 3 วัน และล้างด้วยน้ำกลั่นจนน้ำล้างเป็นกลาง หรือพื้นฐานเล็กน้อยค่า pH เปลี่ยนแปลงแก้ไขปัญหาด่างทุกวัน แล้ว ตัวอย่างถูก defatted กับแอลกอฮอล์ 10%ที่จริงอัตราส่วนตัวทำละลาย 1:10 (w/v) ใน 24 hล้าง ด้วยน้ำกลั่นจำนวนเพียงพอ และ lyophilizedเรื่อง lyophilized ถูกสกัด ด้วย 0.5 ม.กรดซิตริก 3 วัน เพพซิน (1:10, 000 แล้ว 10%ตามหน่วย จุนเคมี จำกัด โตเกียว ญี่ปุ่น),การที่ lyophilized น้ำหนักเพิ่ม และซึ่งจะสำหรับ 48 h การแก้ไขปัญหาที่มีความหนืดถูกเหวี่ยงที่ขาย 12,000 กรัมสำหรับ 1 ชั่วโมงที่ 4 C และ supernatant รวบรวมSupernatant ไม่เค็มออก โดยการเพิ่ม NaCl เป็นครั้งสุดท้ายความเข้มข้น 0.7 เมตร และตาม ด้วยฝนนอกของ NaCl ความเข้มข้นสุดท้ายของการ2.3 M ใน 0.05 M ทริ – HCl (ค่า pH 7.5) ตะกอนที่ผลลัพธ์เป็นแยก โดยการหมุนเหวี่ยงที่ 12,000 · กรัมสำหรับ h 1 ที่ 4 c ตะกอนที่ละลายแล้วใน0.5 M กรดอะซิติก dialysed กับกรด 0.1 M กลั่นน้ำ และ lyophilized2.4. โซเดียม dodecyl ซัลเฟต polyacrylamide เจ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ทุกขั้นตอนการเตรียมได้ดำเนินการที่ 4 องศาเซลเซียสกับ
กวนอย่างต่อเนื่อง ชิ้นผิวได้รับการรักษาด้วย 0.1 N
NaOH เพื่อเอาโปรตีนที่ไม่ใช่ collagenous ที่มั่นคงในการ
อัตราการแก้ปัญหา 1:10 (w / v) เป็นเวลา 3 วันและล้างด้วย
น้ำกลั่นจนกลายเป็นน้ำล้างเป็นกลางหรือ
พื้นฐานเล็กน้อยค่า pH วิธีการแก้ปัญหาด่างก็เปลี่ยนไปทุก
วัน จากนั้นกลุ่มตัวอย่างได้รับโปรตีนที่มีแอลกอฮอล์บิวทิล 10%
ที่มั่นคงในการทำละลายอัตราส่วน 1:10 (w / v) เป็นเวลา 24 ชั่วโมง,
การล้างด้วยเงินเพียงพอของน้ำกลั่นและแห้ง.
เรื่องแห้งถูกสกัดด้วย 0.5 M
กรดอะซิติก 3 วัน จากนั้น 10% ของเปปซิน (1: 10,000
หน่วย Junsei เคมี จำกัด กรุงโตเกียวประเทศญี่ปุ่น) ตาม
น้ำหนักแห้งถูกบันทึกและย่อย
เป็นเวลา 48 ชั่วโมง วิธีการแก้ปัญหาที่มีความหนืดถูกหมุนเหวี่ยงที่
12,000 ·กรัมเป็นเวลา 1 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียสและสารละลายที่ถูกเก็บรวบรวม.
ใสถูกเค็มออกโดยการเพิ่มโซเดียมคลอไรด์จะเป็นครั้งสุดท้าย
ความเข้มข้น 0.7 M และตามมาด้วยการตกตะกอน
โดยการเติมโซเดียมคลอไรด์ความเข้มข้นสุดท้ายของ
2.3 เอ็ม 0.05 M Tris-HCl (pH 7.5) ตะกอนผลลัพธ์
ถูกแยกจากกันโดยการหมุนเหวี่ยงที่ 12,000 ·กรัม
เป็นเวลา 1 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียส ตะกอนก็เลือนหายไปแล้วใน
0.5 M กรดอะซิติก, ไตกับ 0.1 M กรดอะซิติกกลั่น
น้ำและแห้ง.
2.4 โซเดียมโดเดซิลซัลเฟตเจลอะคริเลต

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ทั้งหมดเตรียมขั้นตอนทดลองที่ 4 องศาเซลเซียสกวนอย่างต่อเนื่อง . ชิ้นผิวได้รับการรักษาด้วย 0.1 NNaOH เพื่อเอาโปรตีนที่ไม่ collagenous ของแข็งโซลูชั่นของอัตราส่วน 1 : 10 ( w / v ) เป็นเวลา 3 วัน และล้างด้วยน้ำกลั่นจนถึงล้างน้ำกลายเป็นกลาง หรือพื้นฐานการด่างเล็กน้อย pH เปลี่ยนแปลงทุกวัน แล้วตัวอย่างที่สกัดด้วย 10% ทิลแอลกอฮอล์ที่แข็งต่อตัวทำละลาย 1 : 10 ( w / v ) ตลอด 24 ชั่วโมงล้างด้วยน้ำกลั่น และจำนวนเงินที่เพียงพอของโปรตีน .โปรตีนที่สกัดด้วย 0.5 เมตรก็ตามกรดเป็นเวลา 3 วัน แล้ว 10% ( 1:10000 เพพซินหน่วย , จุนเซ่ เคมี จำกัด โตเกียว ประเทศญี่ปุ่น ตามให้โปรตีนที่พบมีน้ำหนักเพิ่มสำหรับ 48 ชั่วโมง คือ ที่ระดับสารละลายหนืด12000 ด้วยกรัมเป็นเวลา 1 ชั่วโมง ที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียส และสูงคือเก็บที่นำออกโดยการเพิ่มเกลือคือเค็ม ครั้งสุดท้ายความเข้มข้น 0.7 เมตร และตามด้วยการตกตะกอนโดยเพิ่มความเข้มข้นของเกลือ ครั้งสุดท้าย2.3 m ใน 0.05 M ทริส– HCl ( pH 7.5 ) ที่ ผลลัพธ์แยกโดยการเหวี่ยงแยกที่ด้วย 12 , 000 กรัม1 H 4 C ที่ถูกละลายใน0.5 M กรดอะซิติก dialysed กับ 0.1 M กรดอะซิติก กลั่นน้ำและแห้ง .2.4 . โซเดียมโดเดซิลซัลเฟตโพลีอะคริลาไมด์เจล