2.5. PCR amplificationThe quality o

2.5. PCR amplification
The quality of extracted gDNA from urine was assessed by PCR
amplification of four different sized fragments of different genes
(Table 1) using a Bio-Rad MyCycler Thermal Cycle (Bio-Rad Laboratories,
Hercules, CA). Amplification reactions were carried out in
a final volume of 50 l containing 1×
PCR buffer (50 mM Tris–HCl,
100 mM NaCl, pH 8.3), 10 l of isolated DNA sample, 4 mM Mg2+,
50 M dNTP, 6 U Taq DNA polymerase and 20 pmol each of the
PCR primers. Amplification profile for K-ras was: 94 ◦C for 5 min

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.5 การขยาย PCR
คุณภาพของ gDNA แยกจากปัสสาวะถูกประเมิน โดย PCR
ขยายสี่ต่าง ๆ ขนาดชิ้นส่วนของยีนที่แตกต่างกัน
(Table 1) โดยใช้รอบความร้อน MyCycler Bio Rad (ห้องปฏิบัติการชีวภาพ Rad,
เฮอร์คิวลิส CA) ปฏิกิริยาขยายได้ดำเนินการ
ปริมาตรสุดท้ายของ 50 l ประกอบด้วย 1 ×
บัฟเฟอร์ PCR (50 มม. Tris–HCl,
100 มม. NaCl, pH 8.3), ตัวอย่างดีเอ็นเอแยก l 10, 4 มม. Mg2,
dNTP 50 เมตร 6 U Taq DNA พอลิเมอเรส และ 20 pmol ละของ
ไพรเมอร์ PCR โพรไฟล์การขยายสำหรับ K-ราถูก: ◦C 94 ใน 5 นาที

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.5 ขยาย PCR
ที่มีคุณภาพของ gDNA สกัดจากปัสสาวะได้รับการประเมินโดยวิธี PCR
การขยายของสี่ชิ้นส่วนขนาดแตกต่างกันของยีนที่แตกต่างกัน
(ตารางที่ 1) โดยใช้ Bio-Rad MyCycler ความร้อนวงจร (Bio-Rad Laboratories,
ดาว, แคลิฟอร์เนีย) ปฏิกิริยาการขยายออกใน
เล่มสุดท้ายของ 50? ลิตรมี 1 ×
บัฟเฟอร์ PCR (50 mM Tris-HCl,
100 มิลลิโซเดียมคลอไรด์, pH 8.3), 10? ลิตรตัวอย่างดีเอ็นเอแยก 4 มิลลิ Mg2 +
50? M dNTP, 6 U โพลิเมอร์ Taq ดีเอ็นเอและ 20 pmol แต่ละ
PCR ไพรเมอร์ รายละเอียดการขยาย K-ras เป็น: 94 ◦ C เป็นเวลา 5 นาที

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.5 PCR (
gdna คุณภาพสกัดจากปัสสาวะถูกประเมินโดยวิธี PCR
แบบสี่แตกต่างกันขนาดชิ้นส่วนของยีนที่แตกต่างกัน
( ตาราง 1 ) โดยใช้ไบโอ ราด mycycler ความร้อนวงจร ( ไบโอ ราดห้องปฏิบัติการ
Hercules , CA ) ปฏิกิริยาแบบทดลองใน
ปริมาณสุดท้าย 50  L ที่มีบัฟเฟอร์ PCR 1 ×
( 50 มม. โดย– HCL
100 mM NaCl , pH 8.3 )10  ล. แยกตัวอย่างดีเอ็นเอ mg2 4 mm , 50  M dntp
6 U แท็ค DNA polymerase และ 20 pmol แต่ละ
PCR ไพรเมอร์ . การเพิ่มโปรไฟล์สำหรับ◦ตามลำดับคือ : 94 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาที