2.3.2. Antibody quantification Anti

2.3.2. Antibody quantification
Antibody titre was determined by ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay).
Microtitre plate wells were coated with O-antigen from V. anguillarum or V. salmonicida.
Uncoated sites were blocked with horse serum. Fish serum diluted 1:200 was
applied and incubated over night at 4°C. Specific antibodies bound in the wells were
then detected by adding rabbit-anti-salmon-Ig (Department of Microbiology and Immunology,
Norwegian College of Veterinary Medicine, Norway) and donkey-anti-rabbit-
Ig conjugated to horseradish peroxidase (Amersham). ABTS (2,2’-azino-bis(3-ethylbenz-
thiazoline-6-sulfonic acid); Sigma) substrate was then added. The absorbance
(optical density) was read at 405 nm (OD,,,,) using a spectrophotometer.
Positive control sera were included in triplicate on every plate. The control serum
used for V. salmonicidu was pooled sera originating from Atlantic salmon after repeated
injections with a commercial vaccine against cold-water vibriosis. The control serum
used for V. anguillurum was pooled sera from Atlantic salmon breeders, assumed to be
environmentally subjected to the bacteria during their entire life cycle in sea water.
Every sample was analysed twice during the same day on duplicate plates. If the
correlation coefficients between the duplicate plates were lower than 0.8, the serum
samples were reanalysed. The mean OD-value of the two serum samples from the
duplicate plates were used in the statistical analyses.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.3.2. แอนติบอดีนับ Titre แอนติบอดีถูกกำหนด โดย ELISA (เอนไซม์เชื่อมโยง Immunosorbent Assay)Microtitre แผ่นบ่อถูกเคลือบ ด้วย O-ตรวจหาจาก V. anguillarum หรือ V. salmonicidaอเมริกาเคลือบบล็อกกับซีรั่มม้า ปลาเซรั่มที่ทำให้เจือจาง 1: 200 ได้ใช้ และ incubated ผ่านคืนที่ 4 องศาเซลเซียส แอนตี้เฉพาะที่ถูกผูกไว้ในบ่อมีจากนั้น ตรวจพบ โดยการเพิ่มแรบบิทป้องกันปลาแซลมอน-Ig (ภาควิชาจุลชีววิทยาและภูมิคุ้มกันวิทยาวิทยาลัยสัตวแพทยศาสตร์นอร์เวย์ นอร์เวย์) และลา-ป้องกัน-กระต่าย -Ig กลวงเพื่อ horseradish peroxidase (Amersham) รเรียน (2, 2'-azino-bis(3-ethylbenz-thiazoline-6-sulfonic กรด); แล้วมีเพิ่มพื้นผิวซิก) Absorbance ที่(ความหนาแน่นออปติคอล) ถูกอ่านที่ 405 nm (OD,) ใช้เป็นเครื่องทดสอบกรดด่างควบคุมค่าบวกจะถูกรวมอยู่ใน triplicate ในอาหารทุกจาน เซรั่มควบคุมใช้ V. salmonicidu ถูกรวมจะมาจากปลาแซลมอนแอตแลนติกหลังจากซ้ำฉีดกับวัคซีนพาณิชย์กับ cold-water vibriosis เซรั่มควบคุมใช้ V. anguillurum จะรวมจากบรีดเดอร์สปลาแซลมอนแอตแลนติก ถือสิ่งแวดล้อมอยู่ภายใต้การแบคทีเรียในระหว่างวัฏจักรทั้งในน้ำทะเลทุกอย่างถูก analysed ในวันเดียวกันบนแผ่นซ้ำสอง ถ้าการค่าสัมประสิทธิ์สหสัมพันธ์ระหว่างแผ่นซ้ำไม่ต่ำกว่า 0.8 เซรั่มตัวอย่างที่ reanalysed OD-ค่าเฉลี่ยของตัวอย่างซีรั่มที่สองจากการแผ่นซ้ำถูกใช้ในการวิเคราะห์ทางสถิติ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3.2 แอนติบอดีปริมาณ
titre แอนติบอดีถูกกำหนดโดยวิธี ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay).
microtitre บ่อแผ่นถูกเคลือบด้วย O-แอนติเจนจาก V. anguillarum หรือ V. salmonicida.
เว็บไซต์ที่ถูกบล็อกเคลือบผิวด้วยเซรั่มม้า ซีรั่มปลาเจือจาง 1: 200 ถูก
นำมาใช้และบ่มข้ามคืนที่ 4 ° C แอนติบอดีที่เฉพาะเจาะจงที่ถูกผูกไว้ในบ่อได้รับการ
ตรวจพบแล้วโดยการเพิ่มกระต่ายป้องกันปลาแซลมอน Ig (ภาควิชาจุลชีววิทยาและวิทยาภูมิคุ้มกัน,
นอร์เวย์วิทยาลัยสัตวแพทยศาสตร์, นอร์เวย์) และลาป้องกัน rabbit-
Ig conjugated เพื่อ peroxidase มะรุม (Amersham) ABTS (2,2'-azino ทวิ (3 ethylbenz-
กรด thiazoline-6-sulfonic); Sigma) พื้นผิวที่ถูกเพิ่มเข้ามาแล้ว การดูดกลืนแสง
(ความหนาแน่นแสง) ได้อ่านที่ 405 นาโนเมตร (OD ,,,,) โดยใช้สเปก.
ซีรั่มควบคุมบวกถูกรวมอยู่ในเพิ่มขึ้นสามเท่าในอาหารทุกจาน ซีรั่มควบคุม
ที่ใช้สำหรับการ V. salmonicidu ถูก pooled ซีรั่มที่มาจากปลาแซลมอนแอตแลนติกหลังจากที่ซ้ำ
กับการฉีดวัคซีนในเชิงพาณิชย์กับวิบริโอน้ำเย็น ซีรั่มควบคุม
ที่ใช้สำหรับการ V. anguillurum ถูก pooled ซีรั่มจากพ่อพันธุ์แม่พันธุ์ปลาแซลมอนแอตแลนติกสันนิษฐานว่าจะต้อง
อยู่ภายใต้สิ่งแวดล้อมแบคทีเรียในช่วงวงจรชีวิตของพวกเขาทั้งในน้ำทะเล.
ตัวอย่างทุกคนได้รับการวิเคราะห์สองครั้งในช่วงวันเดียวกันบนจานที่ซ้ำกัน ถ้า
สัมประสิทธิ์สหสัมพันธ์ระหว่างแผ่นที่ซ้ำกันมีค่าต่ำกว่า 0.8, เซรั่ม
ตัวอย่าง reanalysed ค่าเฉลี่ย OD มูลค่าของทั้งสองตัวอย่างซีรั่มจาก
แผ่นที่ซ้ำกันถูกนำมาใช้ในการวิเคราะห์ทางสถิติ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3.2 . ปริมาณแอนติบอดี แอนติบอดี
titre ถูกกําหนดโดยวิธี ELISA ( เอนไซม์เชื่อมโยง immunosorbent assay ) .
บ่อ microtitre ถูกเคลือบด้วยแผ่น o-antigen จาก V . anguillarum หรือ V salmonicida .
ไม่มีเว็บไซต์ที่ถูกบล็อกด้วยม้า เซรั่ม เซรั่มลด 1:200 เป็นปลา
ประยุกต์โดยผ่านคืนที่ 4 องศา แอนติบอดีที่เฉพาะเจาะจงไว้ในบ่ออยู่
แล้วที่ตรวจพบโดยการเพิ่มความเข้มข้นต่อต้านปลาแซลมอนกระต่าย ( ภาควิชาจุลชีววิทยาและวิทยาภูมิคุ้มกัน
นอร์เวย์วิทยาลัยสัตวแพทยศาสตร์ , นอร์เวย์ ) และลาป้องกันกระต่าย -
ig conjugated กับพืชชนิดหนึ่งเปอร์ออกซิเดส ( ชาม ) Abbr ( 2 , 2 ' - azino ทวิ ( 3-ethylbenz -
thiazoline-6-sulfonic acid ) ; Sigma ) พื้นผิวก็เพิ่ม น
( ความหนาแน่นของแสง ) คืออ่านที่ 405 nm ( OD , , , ,) โดยใช้ Spectrophotometer .
( ควบคุมบวกรวมทั้งสามใบทุกจาน การควบคุมการใช้เซรั่ม
V salmonicidu คือ pooled Sera ที่มาจากปลาแซลมอนแอตแลนติกหลังจากฉีดพร้อมกับวัคซีนซ้ำ
พาณิชย์กับเฉียบพลัน น้ำหนาว การควบคุมการใช้เซรั่ม
V anguillurum คือ pooled ( พ่อพันธุ์แม่พันธุ์ปลาแซลมอนแอตแลนติก ที่ถือว่าเป็น
สิ่งแวดล้อม จำนวนแบคทีเรียในช่วงวัฏจักรชีวิตทั้งหมดของพวกเขาในน้ำทะเล
ทุกตัวอย่างวิเคราะห์สองครั้งในวันเดียวกันบนแผ่นซ้ำกัน ถ้าสัมประสิทธิ์สหสัมพันธ์ระหว่างซ้ำ
แผ่นต่ำกว่า 0.8 , เซรั่ม
จำนวน reanalysed . หมายถึงค่า OD ของทั้งสองตัวอย่างซีรั่มจาก
ซ้ำแผ่น ถูกใช้ในการวิเคราะห์ทางสถิติ