HeLa cell monolayer cultures were m

HeLa cell monolayer cultures were maintained in Dulbecco's modified minimum essential medium (DMEM) supplemented with 10% (v/v) fetal bovine serum (FBS), penicillin and streptomycin in a humidified atmosphere containing 5% CO2 at 37 °C. Subconfluent cells were infected with wild-type human Adenovirus, Type 5 (Ad5 wildtype, ATCC, catalog No. VR-1516) at a multiplicity of infection of 120 infection units (IFU) per cell (1000 viral particles (VP)/cell). Briefly, cells were washed once with DMEM supplemented with 2% (v/v) FBS and inoculated with virus in DMEM with 2% FBS. During the incubation for 1 h cells were agitated four to five times. Afterwards, the medium was removed and replaced by fresh medium supplemented with 10% serum. Cells were incubated at 37 °C until the time for fixation and processing for immunofluorescence.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

มีรักษาวัฒนธรรม monolayer เซลล์ hela ในดุลเบกโกของปรับเปลี่ยนขั้นต่ำจำเป็นปานกลาง (DMEM) เสริม ด้วย serum วัว 10% (v/v) และทารกในครรภ์ (FBS), ยาเพนนิซิลลิน และ streptomycin ในบรรยากาศ humidified ประกอบด้วย 5% CO2 ที่ 37 องศาเซลเซียส Subconfluent เซลล์ติดเชื้อชนิดป่ามนุษย์ Adenovirus, 5 ชนิด (Ad5 wildtype, ATCC แค็ตตาล็อกเลข VR-1516) ที่มากมายหลายหลากของเชื้อ 120 ติดหน่วย (IFU) ต่อเซลล์ (1000 อนุภาคไวรัส (VP) / เซลล์) สั้น ๆ เซลล์ล้างครั้งเดียว ด้วย DMEM เสริม ด้วย 2% (v/v) FBS และ inoculated กับไวรัสใน DMEM 2% FBS ในระหว่างการฟักตัวใน 1 h เซลล์ได้นั้นกระตุ้นทำสี่ห้าเท่า ภายหลัง สื่อถูกเอาออก และแทนที่ ด้วยสื่อสดเสริม ด้วยเซรั่ม 10% เซลล์ถูก incubated ที่ 37 ° C จนถึงเวลาสำหรับปฏิกิริยาการตรึงและการประมวลผลสำหรับ immunofluorescence

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

HeLa วัฒนธรรม monolayer เซลล์ได้รับการดูแลในขั้นต่ำของการปรับเปลี่ยนที่สำคัญ Dulbecco กลาง (DMEM) เสริมด้วย 10% (v / v) ซีรั่มวัวของทารกในครรภ์ (FBS) ยาปฏิชีวนะและ streptomycin ในบรรยากาศที่มีความชื้น CO2 5% ที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส Subconfluent เซลล์มีการติดเชื้อชนิดป่ามนุษย์ Adenovirus ประเภทที่ 5 (AD5 wildtype, ATCC แคตตาล็อกฉบับที่ VR-1516) ที่หลายหลากของการติดเชื้อ 120 หน่วยการติดเชื้อ (IFU) ต่อเซลล์ (1000 อนุภาคไวรัส (VP) / มือถือ) . สั้น ๆ , เซลล์ถูกล้างครั้งเดียวกับ DMEM เสริมด้วย 2% (v / v) FBS และเชื้อไวรัสใน DMEM กับ 2% FBS ในระหว่างการบ่มเป็นเวลา 1 ชั่วโมงเซลล์ถูกตื่นเต้น 4-5 ครั้ง หลังจากนั้นสื่อจะถูกลบออกไปและแทนที่ด้วยสื่อสดเสริมด้วยซีรั่ม 10% เซลล์ที่ถูกบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสจนกว่าจะถึงเวลาการตรึงและการประมวลผลสำหรับอิมมูโน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ล่าเซลล์วัฒนธรรมอย่างถูกเก็บรักษาไว้ในดัลเบโค่การจำเป็นที่สุดขนาดกลาง ( dmem ) เสริมด้วย 10% ( v / v ) ของวัว เซรั่ม ( FBS ) , penicillin และ streptomycin ในบรรยากาศที่มีคาร์บอนไดออกไซด์ humidified 5% ที่ 37 องศา subconfluent เซลล์ติดเชื้ออะดีโนไวรัสของมนุษย์ 5 ประเภท ( ad5 wildtype ) , , รายการไม่vr-1516 ) ที่หลายหลากของการติดเชื้อของ 120 หน่วย การติดเชื้อ ( ifu ) ต่อเซลล์ ( อนุภาคไวรัส 1000 ( VP ) เซลล์ ) สั้น ๆ เซลล์ก็ล้างอีกครั้งกับ dmem เสริมด้วย 2% ( v / v ) FBS และหัวเชื้อกับไวรัสใน dmem ร้อยละ 2 FBS ในระหว่างการบ่มเป็นเวลา 1 ชั่วโมง เซลล์ก็ปั่นป่วน สี่ถึงห้าครั้ง หลังจากนั้น สื่อจะถูกลบออกและแทนที่ด้วยอาหารสด เสริมด้วย 10% เซรั่มเซลล์ที่อุณหภูมิ 37 องศา C ถึงเวลาสำหรับการตรึงและการประมวลผลสำหรับ D .