3. Results3.1. Isolation of rice pr

3. Results
3.1. Isolation of rice protoplasts and protoplast transfection efficiency
Preparation of high-quality rice protoplasts is essential for successful transformation and subsequent procedures and analyses.
Firstly, it is important to prepare protoplasts from fresh, wellgrown seedlings. We usually used 2-week-old rice seedlings
germinated on ½ MS medium. These seedlings were superior to
those cultivated on wet gauze and produced more protoplasts with
a large, round shape. Secondly, the middle region of the seedlings,
rather than the whole seedlings, gave the best results (Fig. 1A).
Isolation of rice protoplasts was performed as described with the
changes noted in the Section 2. Evans blue staining of the prepared
protoplasts, in which dead cells stained blue, showed that almost
all of the protoplasts were viable (Fig. 1B). We used a simple visual
assay to assess transfection efficiency after transfecting protoplasts
with a GFP expression plasmid (HBT-sGFP). More than 70% of protoplasts showed strong GFP fluorescence (Fig. 1C and D). These
results showed that we had prepared high-quality protoplasts
and achieved high transfection rates.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

3. ผลลัพธ์3.1 การแยกข้าวโปและ protoplast transfection efficiencyเตรียมข้าวคุณภาพโปเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการแปลงเสร็จเรียบร้อยแล้ว และขั้นตอนต่อมา และวิเคราะห์ประการแรก มันเป็นสิ่งสำคัญเพื่อจัดเตรียมโปจากกล้าไม้สด wellgrown เรามักใช้ข้าวเก่า 2 สัปดาห์กล้าไม้เปลือกงอกบนกลาง½ MS กล้าไม้เหล่านี้ก็จะcultivated บนผ้าเปียก และผลิตโปเพิ่มเติมด้วยขนาดใหญ่ กลมรูปร่าง ประการที่สอง ภาคกลางของกล้าไม้นอกจากกล้าไม้ทั้งหมด ให้ผลดีสุด (Fig. 1A)ทำการแยกข้าวโปดังที่มีการการเปลี่ยนแปลงใน 2 ส่วน อีแวนสีน้ำเงินย้อมสีของเตรียมไว้โป สีฟ้า ที่เซลล์ตายพบว่าเกือบทั้งหมดของโปได้ทำงานได้ (Fig. 1B) เราใช้ภาพอย่างง่ายทดสอบประเมิน transfection efficiency หลัง transfecting โปด้วยมี GFP นิพจน์ plasmid (HBT-sGFP) กว่า 70% ของโปแสดงให้เห็นว่ารัดกุม fluorescence GFP (Fig. 1C และ D) เหล่านี้ผลลัพธ์ที่แสดงให้เห็นว่า เราได้เตรียมโปคุณภาพสูงและราคาสูง transfection ทำได้

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

3 . ผลลัพธ์
3.1 . การแยกโปรโตพลาสต์ข้าวและโปรโตพลาสต์สำหรับ EF จึงประสิทธิภาพ
การเตรียม protoplasts ข้าวคุณภาพสูงเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการเปลี่ยนแปลงที่ประสบความสำเร็จ และขั้นตอนต่อมา และ วิเคราะห์
ตอนแรก , มันเป็นสิ่งสำคัญเพื่อเตรียมโปรโตพลาสต์จากสด wellgrown ต้นกล้า เรามักจะใช้ 2-week-old ต้นกล้าข้าวงอกบน
½ MS . ต้นกล้าเหล่านี้เหนือกว่า
ผู้ที่ปลูกบนผ้าเปียก และผลิตเอนไซม์กับ
รูปร่างกลมใหญ่ , . ประการที่สอง ภาคกลางของ seedlings
มากกว่าต้นกล้าทั้งหมด ให้ผลลัพธ์ที่ดีที่สุด ( รูปที่ 1A ) .
แยกข้าวต่อการตามที่อธิบายไว้ด้วยการระบุไว้ในส่วน
2 อีแวนส์สีฟ้าคราบของเตรียม
พลาสต์ซึ่งในเซลล์ที่ตายแล้วเปื้อนสีฟ้า พบว่าเกือบ
ทั้งหมดของพบว่าได้ ( รูปที่ 1A ) เราใช้วิธีง่าย ๆสำหรับภาพ
เพื่อประเมินประสิทธิภาพ หลังจาก transfecting EF จึงต่อด้วยการแสดงออกของ GFP
พลาสมิด ( hbt sgfp ) มากกว่า 70% ของเอนไซม์พบว่าแข็งแรงfl uorescence GFP ( ภาพ c และ d ) ผลลัพธ์เหล่านี้แสดงให้เห็นว่า เราได้เตรียม

และความเหมาะสมสำหรับที่มีคุณภาพสูงราคาสูง