To test that these 5 primer pairs w

To test that these 5 primer pairs were specific to the targetpathogens, the primer sequenceswere used to search against the National Center for Biotechnology Information (NCBI) databases using the Basic Local Alignment Tool (BLAST) [24].
Amplification of m-PCR and analysis of its products m-PCR amplification system in 25 lL of reaction mixtures was as follows: 2 lL of extracted DNA, PCR buffer (20 mM Tris hydrochloride pH 8.4, 50 mM KCl and 2.0 mM MgCl2), 0.2 mM of each dNTP, 1.25 U of Taq DNA polymerase (D334A, TakaRa Dalian, China), SAL-F and SAL-R 0.08 lM, LIS-F, LIS-R, ESC-F and ESC-R 0.06 lM, YE-F and YE-R 0.256 lM, ST-F and ST-R 0.4 lM, 16S-F and 16S-R 0.03 lM. The PCR amplification was performed in a Mastercycler ep cycler (Eppendorf Germany) under the following conditions: heat denaturation at 95 C for 5 min followed by 35 cycles of heat denaturation at 95 C for 50 s, primer annealing at 54 C for 40 s and DNA extension at 72 C for 50 s. This was followed by incubation at 72 C for 7 min [18] and cooling at 4 C.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เพื่อทดสอบว่า รองพื้น 5 คู่นี้ได้เฉพาะ targetpathogens, sequenceswere พื้นที่ใช้ค้นหากับศูนย์แห่งชาติในฐานข้อมูลข้อมูลเทคโนโลยีชีวภาพ (NCBI) โดยใช้การพื้นฐานท้องถิ่นตำแหน่งเครื่องมือ (ระเบิด) [24]ขยายของ m-PCR และการวิเคราะห์ของผลิตภัณฑ์ PCR เมตรขยายระบบ 25 จะน้ำยาผสมปฏิกิริยาเป็นดังนี้: 2 จะแยกดีเอ็นเอ PCR ของ dNTP แต่ละ 0.2 mM, 1.25 U Taq DNA พอลิเมอเรส (D334A, TakaRa ต้าเหลียน จีน), แซล F และแซล-R 0.08 lM, LIS F (20 mM ทริสเรทติ้งไฮโดรคลอไรด์ pH 8.4, KCl 50 มม.และ 2.0 มม. MgCl2), กันชน, LIS-R, ESC F และ ESC-R 0.06 lM, YE-F และ YE-R 0.256 lM, ST-F และ ST-R 0.4 lM, 16S F และ 16S-R 0.03 lM ขยาย PCR ถูกดำเนินการในการ Mastercycler ep cycler (Eppendorf เยอรมนี) ภายใต้เงื่อนไขต่อไปนี้: denaturation ความร้อนที่ 95 C สำหรับ 5 นาทีตาม ด้วยรอบ 35 ของ denaturation ความร้อนที่ 95 C สำหรับ 50 s พื้นการอบเหนียวที่ 54 C 40 s และภายในดีเอ็นเอที่ 72 C สำหรับ 50 s นี้ถูกตาม ด้วยคณะทันตแพทยศาสตร์ที่ 72 C สำหรับ 7 นาที [18] และระบายความร้อนที่ค. 4

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

To test that these 5 primer pairs were specific to the targetpathogens, the primer sequenceswere used to search against the National Center for Biotechnology Information (NCBI) databases using the Basic Local Alignment Tool (BLAST) [24].
Amplification of m-PCR and analysis of its products m-PCR amplification system in 25 lL of reaction mixtures was as follows: 2 lL of extracted DNA,PCR buffer ( 20 มม. และ 50 มม. ซึ่ง pH 5.6 KCl และ 2.0 มม. MgCl2 ) 0.2 มม. ของแต่ละ dntp 1.25 U ของดีเอ็นเอพอลิเมอเรส ทัค ( d334a Takara , Dalian , จีน ) , sal-f sal-r 0.08 และ LM lis-f lis-r , , , และ esc-f esc-r 0.06 LM ye-f ye-r LM , และคน , และ st-f st-r 0.4 โดย 16s-f 16s-r , 0.03 และอิม( ร่วมแสดงใน mastercycler EP รอบ ( เพนดอร์ฟ เยอรมนี ) ภายใต้เงื่อนไขดังต่อไปนี้ : ความร้อน ( 95  องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาที ตามด้วย 35 รอบ ความร้อน ( 95  C 50 s เมอร์ annealing ที่ 54  C 40 และดีเอ็นเอส่วนขยายที่ 72  C 50 วินาทีนี้ คือ ตามด้วยการบ่มที่ 72  องศาเซลเซียสเป็นเวลา 7 นาที [ 18 ] ตัวที่ 4  C