2.3. Determination of CML in model muffins
The CML measuring method employed here is adapted from Peng et al. (2010). Following defatting, protein reduction, hydrolysis,and derivatization using o-phthaldialdehyde, CML determination was performed using a Waters Alliance high-performance liquid chromatography (HPLC System 600, Milord, MA, USA) with a fluorescence detector (Waters 474). The HPLC system was equipped with a Waters Sun Fire C18 column (150 _ 4.6 mm, 5 lm; Milord, MA, USA). The flow rate was 1.0 ml/min and the injection volume was 10 ll. The mobile phases were acetate buffer and acetonitrile (9:1, v/v) (solvent A) and 50% acetonitrile (solvent B). Detection was at 340 nm (excitation) and 455 nm (emission).The peaks for CML-derivatives in the muffin samples were confirmed by comparison with an authentic sample of CML provided by PolyPeptide Laboratories France SAS (Strasbourg, France). Identified compounds were quantified using the external standard calibration procedure. The limit of detection (LOD) was 0.42 ng, the limit of quantification (LOQ) was 1.29 ng, the recovery of the analyte compared to the internal standard was _100% (SD = 10.03%),and the repeatability (method precision) was 3.65% (coefficient of variations).
2.3 การกำหนดของ CML ในรูปมัฟฟินCML วิธีวัดการทำงานที่นี่จะปรับจาก Peng et al. (2010) ต่อ defatting โปรตีน ไฮโตรไลซ์ และลดใช้ o-phthaldialdehyde derivatization, CML กำหนดถูกทำเป็นพันธมิตรน้ำประสิทธิภาพสูงของเหลว chromatography (HPLC ระบบ 600, Milord, MA, USA) ด้วยเครื่องตรวจจับ fluorescence (น้ำ 474) ระบบ HPLC มีพร้อมคอลัมน์ C18 ไฟซันวอเตอร์ (150 _ 4.6 มม. 5 lm Milord, MA สหรัฐอเมริกา) อัตราการไหล 1.0 ml/min และปริมาณฉีดได้ 10 จะ ระยะเคลื่อนบัฟเฟอร์ acetate และ acetonitrile (9:1, v/v) (ตัวทำละลาย A) และ 50% acetonitrile (ตัวทำละลาย B) ตรวจสอบได้ที่ 340 nm (ในการกระตุ้น) และ 455 nm (มลพิษ)แห่งสำหรับตราสารอนุพันธ์ CML ในตัวอย่าง muffin ถูกยืนยัน by comparison with อย่างแท้จริงของ CML โดย PolyPeptide ปฏิบัติฝรั่งเศส SAS (สตราสบูร์ก ฝรั่งเศส) ระบุสารถูก quantified โดยใช้วิธีการปรับเทียบมาตรฐานภายนอก ขีดจำกัดของการตรวจสอบ (ลอด) ถูก 0.42 ng จำนวนนับ (LOQ) ถูก 1.29 ng การฟื้นตัวของ analyte ที่เปรียบเทียบภายในมาตรฐาน _100% (SD = 10.03%),and 3.65% (สัมประสิทธิ์ของการแปรผัน) ถูกทำซ้ำใน (วิธีแม่นยำ)
การแปล กรุณารอสักครู่..

2.3. Determination of CML in model muffins
The CML measuring method employed here is adapted from Peng et al. (2010). Following defatting, protein reduction, hydrolysis,and derivatization using o-phthaldialdehyde, CML determination was performed using a Waters Alliance high-performance liquid chromatography (HPLC System 600, Milord, MA, USA) with a fluorescence detector (Waters 474). The HPLC system was equipped with a Waters Sun Fire C18 column (150 _ 4.6 mm, 5 lm; Milord, MA, USA). The flow rate was 1.0 ml/min and the injection volume was 10 ll. The mobile phases were acetate buffer and acetonitrile (9:1, v/v) (solvent A) and 50% acetonitrile (solvent B). Detection was at 340 nm (excitation) and 455 nm (emission).The peaks for CML-derivatives in the muffin samples were confirmed by comparison with an authentic sample of CML provided by PolyPeptide Laboratories France SAS (Strasbourg, France). Identified compounds were quantified using the external standard calibration procedure. The limit of detection (LOD) was 0.42 ng, the limit of quantification (LOQ) was 1.29 ng, the recovery of the analyte compared to the internal standard was _100% (SD = 10.03%),and the repeatability (method precision) was 3.65% (coefficient of variations).
การแปล กรุณารอสักครู่..

2.3 ความมุ่งมั่นของ CML ในมัฟฟินแบบ
CML วัดใช้วิธีการนี้ดัดแปลงมาจาก Peng et al . ( 2010 ) ต่อไปนี้ defatting โปรตีนลดการย่อย และการใช้ o-phthaldialdehyde CML ซัล , ตรวจสอบโดยใช้วิธีโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูง ( พันธมิตรน้ำ 2 ระบบ 600 , นายท่าน , MA , USA ) กับการตรวจจับ ( น้ำมัน )ระบบ HPLC เป็นอุปกรณ์ที่มีน้ำ Sun Fire คอลัมน์ C18 150 _ 4.6 มม. 5 อิม ; นายท่าน , MA , USA ) อัตราการไหลเท่ากับ 1.0 มิลลิลิตร / นาทีและปริมาณการฉีดได้ 10 จะ ระยะเคลื่อนที่เป็นบัฟเฟอร์อะซิเตท และไน ( 9 : 1 v / v ) ( ตัวทำละลาย ) และ 50% ไน ( ตัวทำละลาย B ) ตรวจจับอยู่ที่ 340 nm ( กระตุ้น ) และ 455 nm ( มลพิษ )ยอดสำหรับ CML อนุพันธ์ในมัฟฟินจำนวนยืนยันโดยการเปรียบเทียบกับตัวอย่างจริงของ CML โดย polypeptide ห้องปฏิบัติการฝรั่งเศส SAS ( Strasbourg , ฝรั่งเศส ) ระบุปริมาณสารที่ใช้สำหรับการสอบเทียบมาตรฐาน ขีดจำกัดของการตรวจหา ( LOD ) คือ 0.42 NG , ขีด จำกัด ของปริมาณ ( loq ) คือ 1.18 NG ,การฟื้นตัวของครูเมื่อเทียบกับมาตรฐานภายใน _100 % ( SD = 10.03 % ) และกาล ( วิธีการที่แม่นยำ ) คือ 3.65 % ( ค่าสัมประสิทธิ์ของความผันแปร
)
การแปล กรุณารอสักครู่..
