2.3. Measurement of anti-inflammato

2.3. Measurement of anti-inflammatory activity
2.3.1. Determination of anti-inflammatory activity by
IL-6/luciferase assay on HeLa cells
HeLa cells were stably transfected with a luciferase reporter
gene controlled by the IL-6 promoter which is one of the target
genes for activated NF-_B. The cells were seeded into 24-well plates
and the extracts were tested in several concentrations (from 200 to
0.2_g/ml). As positive controls we used the solvents to dissolve the
samples (ethanol) and as negative controls we used unstimulated
cells. Parthenolide (Sigma) was used as a standard reference. The
enzymatic reaction was made with luciferase reagent (Promega),
measured and recorded using a Lucy-1 luminometer/photometer
(Anthos). More experimental details can be found in Bremner et al.
(2004, 2009).

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3 วัดของกิจกรรมต้านการอักเสบ
2.3.1 การกำหนดกิจกรรมต้านการอักเสบโดย
IL-6 / ทดสอบ luciferase ต่อเซลล์ HeLa
เซลล์ HeLa ถูก transfected เสถียรกับนักข่าว luciferase
ยีนควบคุมโดยโปรโมเตอร์ IL-6 ซึ่งเป็นหนึ่งในเป้าหมายของ
ยีนสำหรับการเปิดใช้งาน NF-_B เซลล์เป็นเมล็ดลงในแผ่น 24 หลุม
และสารสกัดจากได้มีการทดสอบในระดับความเข้มข้นต่างๆ (จาก 200 ถึง
0.2_g / ml) เป็นตัวควบคุมเชิงบวกที่เราใช้ตัวทำละลายในการละลาย
ตัวอย่าง (เอทานอล) และเป็นตัวควบคุมเชิงลบที่เราใช้ unstimulated
เซลล์ parthenolide (Sigma) ถูกนำมาใช้เป็นข้อมูลอ้างอิงมาตรฐาน
ปฏิกิริยาของเอนไซม์ที่ถูกสร้างขึ้นด้วยน้ำยา luciferase (Promega),
วัดและบันทึกโดยลูซี่-1 luminometer / photometer
(Anthos) รายละเอียดการทดลองเพิ่มเติมสามารถพบได้ใน Bremner et al.
(2004, 2009)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3 การวัดกิจกรรมต้านการอักเสบ
2.3.1 . กิจกรรมต้านการอักเสบ โดยการสร้างเอนไซม์ลูซิเฟอเรส (
/
Hela cells ในเซลล์ Hela เสถียร transfected กับลูซิเฟอเรส นักข่าว
ยีนควบคุมโดยโปรโมเตอร์ IL-6 ซึ่งเป็นหนึ่งในเป้าหมาย
ยีนกระตุ้น NF - _b เซลล์ถูก seeded 24 แผ่น
ดีและสารสกัดจากข้อมูลในความเข้มข้นต่าง ๆ ( จาก 200
0.2_g / ml ) เป็นตัวควบคุมบวกเราใช้ตัวทำละลายละลาย
ตัวอย่าง ( เอทานอล ) และเป็นตัวควบคุมเชิงลบที่เราใช้ unstimulated
เซลล์ parthenolide ( Sigma ) ถูกใช้เป็นข้อมูลอ้างอิงมาตรฐาน
ปฏิกิริยาเกิดขึ้นกับเอนไซม์ลูซิเฟอเรสต์ ( promega )

ลูมิโนมิเตอร์วัดและบันทึกการใช้เครื่องมือ / lucy-1 ( anthos )รายละเอียดเพิ่มเติมสามารถพบได้ในการทดลอง เบรมเนอร์ et al .

( 2004 , 2009 )