Further, we examined the effect of

Further, we examined the effect of scPPX1 on the single channel activity of TRPM8 in planar lipid bilayers (Fig. 8, 9). Channels were obtained in presence of 1% diC16 PtdIns(4,5)P2 and 500 μM menthol with subsequent addition of 2 μg/ml scPPX1. No change in channel activity was detected when scPPX1 was added to the external side of TRPM8. Conversely, addition of scPPX1 to the internal side resulted in the inhibition of TRPM8 currents by affecting both the open probability and conductance of the channel. We first analyzed the changes in the open probability of the channel upon the cleavage of polyP. We found that TRPM8 channel openings in inward direction were eliminated very rapidly (within 1–2 min) after the addition of scPPX1. In contrast, the open probabilityof the channel in outward direction exhibited much slower changes (up to 30min). Figure 8A demonstrates current traces recordings obtained at −150 +150 mV voltage ramps before and after the treatment with scPPX1 in a time courseat the beginning of 3rd, 10th, 18th, 28th and 33rd minutes. The statistics of
the changes in open probability was obtained at different voltages in gap-free recordings for TRPM8 alone or after the treatment with scPPX1 for the following intervals of time: 5–7 min, 9–11 min, 14–16 min, 20–23 min, and 28–32 min
(Fig. 8B). Overall 16 experiments were conducted and open probabilities valuesobtained for each voltage were derived from the analysis of at least 550–2636events.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ต่อไป เราตรวจสอบผลของ scPPX1 กิจกรรมช่องเดียวของ TRPM8 ในระนาบไขมัน bilayers (Fig. 8, 9) ช่องทางได้รับของ 1% diC16 p 2 PtdIns (4,5) และอินเดีย μM 500 scPPX1 μg/ml 2 บวกตามมา ไม่เปลี่ยนแปลงในช่องกิจกรรมพบเมื่อมีเพิ่ม scPPX1 TRPM8 ข้างภายนอก ในทางกลับกัน เพิ่ม scPPX1 ในด้านภายในผลในการยับยั้งกระแส TRPM8 โดยส่งผลกระทบต่อทั้งความน่าเป็นเปิดความต้านทานของช่องสัญญาณ เราต้องวิเคราะห์การเปลี่ยนแปลงในความน่าเป็นการเปิดช่องสัญญาณตามความแตกแยกของโปลิ เราพบว่า TRPM8 ช่องเปิดในทิศทางขาเข้าถูกตัดออกอย่างรวดเร็ว (ภายใน 1-2 นาที) หลังจากการเพิ่ม scPPX1 ในทางตรงกันข้าม probabilityof เปิดช่องในทิศทางขาออกจัดแสดงการเปลี่ยนแปลงช้ามาก (เกิน 30 นาที) 8A รูปแสดงให้เห็นถึงปัจจุบันร่องรอยบันทึกได้ที่ −150 ทางลาด +150 mV แรงดันไฟฟ้าก่อน และ หลังการรักษาด้วย scPPX1 ใน courseat เวลาเริ่มต้นที่ 3, 10, 18, 28 และ 33 นาที สถิติของเปลี่ยนแปลงน่าเป็นเปิดไม่ได้ที่แรงดันต่าง ๆ ในบันทึกฟรีช่องว่าง TRPM8 เพียงอย่างเดียว หรือ หลังการรักษาด้วย scPPX1 ในช่วงต่อเวลา: 5 – 7 นาที 9-11 นาที ต่ำสุด 14-16, 20 – 23 นาที และ 28 – 32 นาที(Fig. 8B) ได้ดำเนินการทดลอง 16 ทั้งหมด และเปิดกิจกรรม valuesobtained สำหรับแรงดันแต่ละได้มาจากการวิเคราะห์น้อย 550 – 2636events

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

นอกจากนี้เราตรวจสอบผลกระทบของ scPPX1 กับกิจกรรมช่องทางเดียวของ TRPM8 bilayers ไขมันในระนาบ (รูปที่. 8, 9) ช่องทางที่ได้รับในการปรากฏตัวของ 1% diC16 PtdIns (4,5) P2 และ 500 ไมครอนเมนทอลด้วยนอกจากนี้ที่ตามมาของ 2 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร scPPX1 การเปลี่ยนแปลงในกิจกรรมที่ไม่มีช่องทางที่ตรวจพบเมื่อ scPPX1 ถูกบันทึกอยู่ด้านนอกของ TRPM8 ในทางกลับกันการเพิ่มขึ้นของ scPPX1 ไปทางด้านภายในมีผลในการยับยั้งการกระแส TRPM8 โดยมีผลกระทบต่อทั้งความน่าจะเป็นที่เปิดกว้างและเป็นสื่อกระแสไฟฟ้าของช่อง ครั้งแรกที่เราวิเคราะห์การเปลี่ยนแปลงในความน่าจะเปิดช่องทางตามความแตกแยกของปะการัง เราพบว่าการเปิดช่องทาง TRPM8 ในทิศทางขาเข้าถูกกำจัดอย่างรวดเร็ว (ภายใน 1-2 นาที) หลังจากที่นอกเหนือจาก scPPX1 ในทางตรงกันข้าม probabilityof เปิดช่องทางในทิศทางออกไปด้านนอกแสดงการเปลี่ยนแปลงช้ามาก (ไม่เกิน 30 นาที) รูปที่แสดงให้เห็นถึง 8A บันทึกร่องรอยปัจจุบันได้ที่ 150 -150 mV ลาดแรงดันไฟฟ้าก่อนและหลังการรักษาด้วย scPPX1 ในเวลา courseat จุดเริ่มต้นของ 3, 10, 18, ​​28 และนาทีที่ 33 สถิติของการเปลี่ยนแปลงในความน่าจะเปิดได้รับแรงดันไฟฟ้าที่แตกต่างกันในการบันทึกช่องว่างฟรีสำหรับ TRPM8 คนเดียวหรือหลังการรักษาด้วย scPPX1 สำหรับระยะเวลาดังต่อไปนี้: 5-7 นาที, 9-11 นาที, 14-16 นาที, 20 -23 นาทีและ 28-32 นาที (รูป. 8B) โดยรวม 16 ทดลองและน่าจะเปิด valuesobtained สำหรับแรงดันไฟฟ้าในแต่ละที่ได้มาจากการวิเคราะห์อย่างน้อย 550-2636events

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เพิ่มเติม เราได้ตรวจสอบผลของ scppx1 บนช่องเดี่ยว กิจกรรมของ trpm8 ในระนาบไขมันสองชั้น ( ภาพที่ 8 , 9 ) ช่องทางที่ได้รับในการแสดงตนของ 1% ptdins dic16 ( 4 , 5 ) และ 500 μ P2 M เมนทอลตามมาเพิ่ม 2 μ g / ml scppx1 . ไม่มีการเปลี่ยนแปลงในกิจกรรมช่องที่ตรวจพบเมื่อ scppx1 ถูกเพิ่มไปยังด้านนอกของ trpm8 . ในทางกลับกันนอกจากนี้ scppx1 ข้างๆภายในมีผลในการยับยั้ง trpm8 กระแส โดยส่งผลกระทบต่อทั้งระบบเปิดและความน่าจะเป็นของช่อง เราแรกวิเคราะห์การเปลี่ยนแปลงในโอกาสเปิดช่องทางบนแนวแตกเรียบของหินปะการัง . เราพบว่า trpm8 ช่องเปิดในทิศทางที่ด้านในถูกตัดออกอย่างรวดเร็ว ( ภายใน 1 – 2 นาที ) หลังจากเติม scppx1 .ในทางตรงกันข้าม การเปิด probabilityof ช่องทางในทิศทางขาออกมีการเปลี่ยนแปลงช้ามาก ( ไม่เกิน 30 นาที ) รูปที่แสดงให้เห็นร่องรอยการบันทึกที่ได้รับกระแส 8A − 150 150 MV แรงดันไฟฟ้าทางลาดก่อนและหลังการรักษาด้วย scppx1 ในเวลา courseat เริ่มต้นที่ 3 , 10 , 18 และ 28 - 33 นาที สถิติของ
การเปลี่ยนแปลงในโอกาสเปิดได้แรงดันไฟฟ้าที่แตกต่างกันในช่องว่างบันทึกฟรีสำหรับ trpm8 คนเดียวหรือหลังจากการรักษาด้วย scppx1 สำหรับตามช่วงของเวลา : 5 - 7 นาที 9 – 11 นาที 14 – 16 นาที 20 – 23 นาที , และ 28 – 32 นาที
( รูปที่ใส่ )รวม 16 การทดลอง และเปิดสถานะ valuesobtained แต่ละแรงดันได้มาจากการวิเคราะห์อย่างน้อย 550 – 2636events

.