Based on in vitro assessment, 6% DM

Based on in vitro assessment, 6% DMF was a less effective cryoprotectant when used with a slow freezing rate, whereas 10% EG resulted in acceptable survival. It was noteworthy that the pellet method was the most promising for both sperm survival and fertility rate. This method has already been successfully adapted to turkey sperm freezing [22] with 42% sperm survival. Unfortunately, fertility was not reported. The pellet method produced higher fertility rate in the present study than that reported earlier in guinea fowl [12] using DMF with moderate freezing rate (64 vs 20%, respectively). The slow protocol with 10% EG had a good survival rate of live, intact spermatozoa, but fertility was very low. Consequently, using only in vitro tests to assess the effectiveness of sperm cryopreservation methods can be very misleading. Notable, there were higher rates of morphologically abnormal sperm in slower protocols than in the faster ones (nitrogen vapour or pellet method). The significantly highest rate of abnormal spermatozoa was detected in slow protocol using EG. Regarding specific defects, damage to the midpiece was the most common abnormality in all protocols (data not shown). Based on the present experiment, cryoprotectant had a lesser impact on sperm morphology than the rate of freezing. To our knowledge, there are no data available regarding sperm abnormalities of frozen thawed guinea fowl semen. However analysed the abnormal sperm ratio in frozen-thawed gander spermatozoa, the rate of midpiece injuries, namely “bent neck”, were the most prevalent [23], similar to findings with emu spermatozoa [24].

When semen was preserved by the slow protocol, only 18–30% of eggs were fertilized; moreover 80–90% of them contained early dead embryos. According to earlier reports frozen–thawed avian spermatozoa are associated with an increased incidence of early embryonic mortality. Although only a single spermatozoon is required to activate an ovum, in the case of avian species, polyspermic fertilization occurs and an optimal number of sperm number are necessary for good fertility. The role of the other spermatozoa penetrated into the ovum is not fully understood yet. Previous studies reported that both too low [25], [26] and high [27] sperm concentration increase the chance of embryo mortality. Presumably, in the case of the present slow protocol there were not enough live, morphologically normal spermatozoa for the complete embryo development. Since the effect of freezing protocols was compared in the study, approximately similar amounts of sperm were used for inseminations. Certainly, the higher the sperm concentration, the higher the rate of intact spermatozoa and therefore the fertility. However, it is known that there is a limit in insemination doses since significant part of sperm is rejected from the cloaca if the doses are higher than 200 µL.

Furthermore, perhaps morphologically normal spermatozoa contained cryopreservation-induced damage to nuclear structures, including DNA [28]. In humans, DNA-damaged spermatozoa fertilized ova, but the rate of early embryonic death increased [29]. During storage of equine sperm, there is also a measurable increase in DNA damage as detected by the comet assay with both cooled and frozen storage [30], [31].

In conclusion, the pellet method was the most effective way for conservation of guinea fowl spermatozoa with a high rate of fertility. There are no data available about the long term duration of sperm in pellet form. Tselutin et al., [17] prefer slow freezing protocols to pellet method for special long term gene conservation purposes in the case of domestic fowl. Further investigations are in progress to check the effects of storage conditions in the case of pellet form.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

คะแนนจากการประเมินในหลอดทดลอง 6% DMF ถูก cryoprotectant มีประสิทธิภาพน้อยเมื่อใช้กับตรึงอัตราช้า ในขณะที่ 10% เช่นส่งผลให้อยู่รอดได้ มันเป็นสิ่งที่น่าสังเกตว่าเม็ดวิธีการอยู่รอดของตัวอสุจิและอัตราเจริญพันธุ์ว่า วิธีนี้มีอยู่แล้วการดัดแปลงไปตุรกีสเปิร์มแช่แข็ง [22] มีสเปิร์ม 42% อยู่รอดประสบความสำเร็จ อับ ความอุดมสมบูรณ์ไม่ได้รายงาน เม็ดวิธีผลิตอัตราเจริญพันธุ์สูงกว่าในการศึกษามากกว่าที่รายงานก่อนหน้าในเสริ์ [12] ด้วย DMF ปานกลางอัตราการตรึง (64 vs 20% ตามลำดับ) โพรโทคอที่ช้าลง 10% เช่นมีอัตราการอยู่รอดดีตัวสด เหมือนเดิม แต่ความอุดมสมบูรณ์ก็ต่ำมาก ดังนั้น โดยใช้การทดสอบในหลอดทดลองเท่านั้นเพื่อประเมินประสิทธิภาพของวิธีช่วยอสุจิได้เข้าใจมาก โดดเด่น มีอัตราที่สูงของตัวอสุจิผิดปกติ morphologically ในโพรโทคอช้ากว่าในคนเร็ว (ไนโตรเจนของไอน้ำ หรือเม็ดวิธี) อัตราสูงสุดอย่างมีนัยสำคัญของตัวอสุจิที่ผิดปกติพบในโพรโทคอช้าใช้ EG เกี่ยวกับเฉพาะข้อบกพร่อง ความเสียหายที่ midpiece แก้ไขความผิดปกติที่พบมากที่สุดในโพรโทคอทั้งหมด (ไม่ได้แสดงข้อมูล) จากการทดลองปัจจุบัน cryoprotectant มีผลกระทบน้อยกว่าในสัณฐานสเปิร์มกว่าอัตราการแข็งตัว ความรู้ของเรา ไม่มีไม่มีข้อมูลเกี่ยวกับตัวอสุจิผิดปกติของน้ำเชื้อแช่แข็งเตรียมไก่กินี อย่างไรก็ตาม วิเคราะห์อัตราส่วนของอสุจิที่ผิดปกติในตัวอสุจิแช่แข็งเตรียมแกนเดอร์ อัตราการบาดเจ็บ midpiece คือ "งอคอ" เป็นแพร่หลายมากที่สุด [23], คล้ายกับผลการวิจัยกับ emu ตัวอสุจิ [24]เมื่อน้ำอสุจิถูกเก็บรักษาไว้ โดยโพรโทคอช้า เฉพาะ 18 – 30% ของไข่ที่ถูกปฏิสนธิ นอกจากนี้ 80-90% ของพวกเขาอยู่ตัวอ่อนตายก่อน ตามรายงานก่อนหน้านี้ แช่แข็ง – เตรียมตัวอสุจินกจะเกี่ยวข้องกับอุบัติการณ์การเพิ่มขึ้นของช่วงตัวอ่อนตาย แม้ว่าที่ spermatozoon เดียวเท่านั้นจำเป็นต้องเปิดใช้งานไว้ ในกรณีของสายพันธุ์นก polyspermic ปฏิสนธิเกิดขึ้น และปรับจำนวนสเปิร์มเลขจำเป็นสำหรับความอุดมสมบูรณ์ดี บทบาทตัวอื่น ๆ ที่เจาะเข้าไปในไข่จะไม่เข้าใจเลย การศึกษาก่อนหน้านี้รายงานว่า ทั้งสองจัด [25], [26] และความเข้มข้นอสุจิสูง [27] เพิ่มโอกาสของการตายของตัวอ่อน ในกรณีของโพรโทคอช้าอยู่ ได้ไม่เพียงพอตัวอสุจิสด morphologically ปกติสำหรับการพัฒนาตัวอ่อนสมบูรณ์ เนื่องจากผลของการแช่แข็งการโพรโทคอในการศึกษาการเปรียบเทียบ ประมาณคล้ายจำนวนสเปิร์มถูกใช้สำหรับ inseminations แน่นอน ความเข้มข้นอสุจิสูง ราคาสูงกว่าตัวเหมือนเดิม และดังนั้นพันธุ์ อย่างไรก็ตาม เป็นที่รู้จักกันว่า มีข้อจำกัดในปริมาณการผสมเทียมเนื่องจากส่วนสำคัญของสเปิร์มถูกปฏิเสธจาก cloaca ถ้าปริมาณสูงกว่า 200 µLนอกจากนี้ อาจเป็นตัวอสุจิปกติ morphologically อยู่เพื่อช่วยให้เกิดความเสียหายต่อโครงสร้างนิวเคลียร์ รวมทั้งดีเอ็นเอ [28] ในมนุษย์ ดีเอ็นเอที่เสียหายตัวอสุจิปฏิสนธิ ova แต่อัตราการเสียชีวิตตัวอ่อนเพิ่มขึ้น [29] ระหว่างการเก็บรักษาของตัวอสุจิม้า มีการเพิ่มขึ้นที่วัดได้ในความเสียหายของดีเอ็นเอเป็นที่ตรวจพบ โดยการวิเคราะห์ดาวหางทั้งเย็น และแช่แข็งเก็บ [30], [31]ในบทสรุป เม็ดวิธีแก้ไขวิธีมีประสิทธิภาพสูงสุดเพื่อการอนุรักษ์ไก่กินีตัวด้วยอัตราสูงสุดของความอุดมสมบูรณ์ ไม่มีไม่มีข้อมูลเกี่ยวกับระยะเวลาระยะยาวของตัวอสุจิในรูปแบบเม็ด Tselutin et al., [17] ต้องการโพรโทคอแช่แข็งช้าไปเม็ดวิธีวัตถุประสงค์ระยะยาวยีนอนุรักษ์ในกรณีเป็ดไก่ การสอบสวนที่ดำเนินการตรวจสอบผลกระทบของสภาพการจัดเก็บในกรณีรูปแบบเม็ด

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

จากการประเมินในหลอดทดลอง, 6% DMF เป็น cryoprotectant มีประสิทธิภาพน้อยเมื่อใช้กับอัตราการแช่แข็งช้าในขณะที่ 10% EG ส่งผลให้ได้รับการยอมรับในการอยู่รอด มันเป็นที่น่าสังเกตว่าวิธีเม็ดก็มีแนวโน้มมากที่สุดสำหรับทั้งการอยู่รอดของสเปิร์มและอัตราความอุดมสมบูรณ์ วิธีการนี้ได้รับการดัดแปลงมาประสบความสำเร็จในการแช่แข็งไก่งวงสเปิร์มอยู่รอดของสเปิร์ม [22] กับ 42% แต่น่าเสียดายที่ความอุดมสมบูรณ์ไม่ได้รับรายงาน วิธีการผลิตเม็ดอัตราการเกิดของประชากรที่สูงขึ้นในการศึกษาปัจจุบันกว่าที่รายงานก่อนหน้านี้ในไก่ต๊อก [12] โดยใช้ DMF มีอัตราการแช่แข็งปานกลาง (64 VS 20% ตามลำดับ) โปรโตคอลช้ากับ 10% EG มีอัตราการอยู่รอดที่ดีของสด, สเปิร์มเหมือนเดิม แต่ความอุดมสมบูรณ์ต่ำมาก ดังนั้นใช้เฉพาะในการทดสอบในหลอดทดลองเพื่อประเมินประสิทธิภาพของวิธีการเก็บรักษาสเปิร์มอาจทำให้เข้าใจผิดมาก ที่โดดเด่นมีอัตราที่สูงขึ้นของสเปิร์มที่ผิดปกติในโปรโตคอลช้ากว่าในคนที่เร็วขึ้น (ไอไนโตรเจนหรือวิธีเม็ด) อัตราการอย่างมีนัยสำคัญสูงสุดของตัวอสุจิผิดปกติถูกตรวจพบในโปรโตคอลช้าใช้ EG เกี่ยวกับข้อบกพร่องเฉพาะความเสียหายให้กับ midpiece เป็นความผิดปกติที่พบมากที่สุดในโปรโตคอลทั้งหมด (ไม่ได้แสดงข้อมูล) ขึ้นอยู่กับการทดลองปัจจุบัน cryoprotectant มีผลกระทบน้อยกว่าในรูปร่างของตัวอสุจิกว่าอัตราของการแช่แข็ง ความรู้ของเรามีไม่มีข้อมูลเกี่ยวกับความผิดปกติของสเปิร์มของการแช่แข็งละลายน้ำเชื้อไก่ตะเภา อย่างไรก็ตามการวิเคราะห์อัตราส่วนอสุจิผิดปกติในการแช่แข็งละลายตัวอสุจิตัวผู้อัตราการบาดเจ็บ midpiece กล่าวคือ "คองอ" เป็นที่แพร่หลายมากที่สุด [23] คล้ายกับการค้นพบกับนกอีมูอสุจิ [24].

เมื่อน้ำอสุจิที่ถูกเก็บรักษาไว้โดยช้า โปรโตคอลเพียง 18-30% ของไข่ปฏิสนธิ; ยิ่งไปกว่า 80-90% ของพวกเขาที่มีตัวอ่อนตายในช่วงต้น ตามรายงานก่อนหน้านี้แช่แข็งละลายตัวอสุจินกมีความเกี่ยวข้องกับอุบัติการณ์ที่เพิ่มขึ้นของอัตราการตายของตัวอ่อนในช่วงต้น แม้ว่าจะมีเพียงตัวอสุจิเดียวจะต้องเปิดใช้งานไข่ในกรณีของนกชนิดปฏิสนธิ polyspermic เกิดขึ้นและในจำนวนที่เหมาะสมของจำนวนสเปิร์มเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับความอุดมสมบูรณ์ดี บทบาทของตัวอสุจิอื่น ๆ ซึมเข้าไปในไข่ยังไม่เข้าใจเลย การศึกษาก่อนหน้ามีรายงานว่าทั้งสองต่ำเกินไป [25] [26] และสูง [27] ความเข้มข้นของอสุจิเพิ่มโอกาสของตัวอ่อนตาย สันนิษฐานในกรณีของโปรโตคอลช้าปัจจุบันมีไม่สดพอตัวอสุจิปกติของสัณฐานวิทยาของการพัฒนาตัวอ่อนที่สมบูรณ์ เนื่องจากผลกระทบของโปรโตคอลแช่แข็งเมื่อเทียบในการศึกษาจำนวนเงินที่คล้ายกันโดยประมาณของสเปิร์มที่ใช้สำหรับ inseminations แน่นอนที่สูงกว่าความเข้มข้นของสเปิร์มที่สูงกว่าอัตราของสเปิร์มเหมือนเดิมและดังนั้นจึงอุดมสมบูรณ์ แต่ก็เป็นที่รู้กันว่ามีขีด จำกัด ในปริมาณผสมเทียมตั้งแต่ส่วนสำคัญของสเปิร์มจะถูกปฏิเสธจากโสโครกถ้าปริมาณที่สูงกว่า 200 ไมโครลิตร.

นอกจากนี้ตัวอสุจิอาจจะปกติของสัณฐานวิทยาที่มีความเสียหายที่เก็บรักษาที่เกิดขึ้นกับโครงสร้างนิวเคลียร์รวมทั้งดีเอ็นเอ [ 28] ในมนุษย์ดีเอ็นเอเสียหายอสุจิไข่ที่ปฏิสนธิ แต่อัตราการตายของตัวอ่อนในช่วงต้นเพิ่มขึ้น [29] ระหว่างการเก็บรักษาของตัวอสุจิม้านอกจากนี้ยังมีการเพิ่มขึ้นที่วัดความเสียหายในดีเอ็นเอที่ตรวจพบโดยการทดสอบดาวหางที่มีทั้งเย็นและการจัดเก็บแช่แข็ง [30] [31].

สรุปวิธีเม็ดเป็นวิธีที่มีประสิทธิภาพมากที่สุดสำหรับการอนุรักษ์ตะเภา สเปิร์มไก่ที่มีอัตราที่สูงของความอุดมสมบูรณ์ ไม่มีข้อมูลเกี่ยวกับระยะเวลาในระยะยาวของสเปิร์มในรูปแบบเม็ดมี Tselutin et al. [17] ต้องการโปรโตคอลแช่แข็งช้าเม็ดวิธีการระยะยาวมีวัตถุประสงค์เพื่ออนุรักษ์ยีนพิเศษในกรณีของนกในประเทศ สืบสวนต่อไปจะมีความคืบหน้าในการตรวจสอบผลกระทบของสภาพการเก็บรักษาในกรณีของรูปแบบเม็ด

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ใช้ในการประเมินการ 6% DMF เป็นน้ำยาที่มีประสิทธิภาพน้อยลงเมื่อใช้กับช้าอัตราการแช่เยือกแข็งและ 10% เช่น ส่งผลให้เกิดการยอมรับ มันเป็นน่าสังเกตว่าเม็ดวิธีที่มีแนวโน้มมากที่สุดทั้งอสุจิรอดและอัตราภาวะเจริญพันธุ์ วิธีการนี้ได้ถูกดัดแปลงเรียบร้อยแล้วตุรกีอสุจิแช่แข็ง [ 22 ] 42 % รอดของอสุจิ ขออภัย และไม่ได้รายงาน เม็ดวิธีการผลิตอัตราเจริญพันธุ์สูงในการศึกษามากกว่าที่รายงานก่อนหน้านี้ในไก่ต๊อก [ 12 ] ใช้ DMF ปานกลางมีอัตราการแช่เยือกแข็ง ( 64 VS 20 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ ) โพรโทคอลช้า 10% เช่น มีอัตราการรอดชีวิตของอสุจิอยู่ เหมือนเดิม แต่ความอุดมสมบูรณ์ต่ำมาก จากนั้น ใช้เพียงในหลอดทดลอง ทดสอบเพื่อประเมินประสิทธิภาพของวิธีการที่เชื้ออสุจิสามารถเข้าใจมาก . เด่น มีอัตราที่สูงผิดปกติจากสเปิร์มในโปรโตคอลช้ากว่าในตัวเร็ว ( ไนโตรเจนประกอบ หรือแบบเม็ด ) สถิติสูงสุดอัตราอสุจิผิดปกติที่ตรวจพบในขั้นตอนช้าใช้เช่นเกี่ยวกับเฉพาะข้อบกพร่อง , ความเสียหายให้กับ midpiece คือความผิดปกติที่พบบ่อยที่สุดในทั้งหมดโปรโตคอล ( ข้อมูลไม่แสดง ) จากการทดลองปัจจุบันน้ำยาได้น้อยกว่าผลกระทบต่อรูปร่างตัวอสุจิมากกว่าอัตราการแช่แข็ง ความรู้ ไม่มีข้อมูลเกี่ยวกับความผิดปกติของอสุจิแช่แข็งละลายไก่ต๊อกน้ำเชื้อ อย่างไรก็ตามการวิเคราะห์อัตราส่วนสเปิร์มแช่แข็งที่ละลายแล้ว อสุจิผิดปกติใน Gander , อัตราของการบาดเจ็บ midpiece คือ " คอ " งอ เป็นที่แพร่หลายมากที่สุด [ 23 ] คล้ายกับค้นพบกับอีมูอสุจิ [ 24 ]เมื่อน้ำเชื้อถูกเก็บรักษาไว้โดยพิธีสาร ช้าแค่ 18 – 30 % ของไข่ไข่ นอกจากนี้ 80 – 90% ของพวกเขาที่มีอยู่ตัวตายเร็ว ตามรายงานก่อนหน้านี้ และอสุจิแช่แข็งที่ละลายแล้ว นกจะเกี่ยวข้องกับการเพิ่มขึ้นของต้นของการตาย แม้เพียงหนึ่งเดียวตัวอสุจิจะต้องเปิดใช้ไข่ ในกรณีของสัตว์ปีกชนิด polyspermic การปฏิสนธิเกิดขึ้น และมีจำนวนที่เหมาะสมของสเปิร์มจำนวนที่จําเป็นสําหรับดี ความอุดมสมบูรณ์ บทบาทของอสุจิเจาะเข้าไปในไข่ อื่นๆ ไม่เข้าใจเลย การศึกษาก่อนหน้านี้รายงานว่าทั้งต่ำเกินไป [ 25 ] [ 26 ] และ [ 27 ] ความเข้มข้นของอสุจิเพิ่มโอกาสของการตายตัวอ่อน . สันนิษฐานว่า ในกรณีของโปรโตคอล ช้า ปัจจุบันมีจำนวนไม่เพียงพออยู่ จากอสุจิที่ปกติสำหรับการพัฒนาตัวอ่อนที่สมบูรณ์ เนื่องจากผลของการแช่แข็งระบบเทียบในการศึกษาที่คล้ายกันประมาณปริมาณของอสุจิถูกใช้สำหรับ inseminations . แน่นอน ยิ่งความเข้มข้นของอสุจิ สูงกว่าอัตราปกติ ผนัง และความอุดมสมบูรณ์ อย่างไรก็ตาม เป็นที่ทราบกันว่ามีขีดจำกัดในการผสมเทียมขนาดยาตั้งแต่ส่วนของอสุจิถูกปฏิเสธจากล้างกลุ่มถ้าปริมาณสูงกว่า 200 µ Lนอกจากนี้ จากปกติที่มีเชื้ออสุจิอาจเกิดความเสียหายกับโครงสร้างนิวเคลียร์ รวมทั้งดีเอ็นเอ [ 28 ] ในมนุษย์ ดีเอ็นเอของอสุจิผสมไข่เสียหาย แต่อัตราแรกของตัวอ่อนตายเพิ่ม [ 29 ] การเก็บอสุจิของม้า ยังมีการบ้านเพิ่มขึ้นความเสียหายของดีเอ็นเอที่ตรวจพบโดยดาวหางวิเคราะห์ทั้งเย็นและแช่แข็งกระเป๋า [ 30 ] , [ 31 ]สรุป เม็ดวิธีเป็นวิธีที่มีประสิทธิภาพมากที่สุดเพื่อการอนุรักษ์ไก่ต๊อก ผนังที่มีอัตราสูงของความอุดมสมบูรณ์ ไม่มีข้อมูลเกี่ยวกับระยะยาวระยะเวลาของสเปิร์มในเม็ดรูปแบบ tselutin et al . , [ 17 ] ชอบช้าแช่แข็งโปรโตคอลที่จะเม็ดวิธีพิเศษยีนในระยะยาวประหยัดวัตถุประสงค์ในกรณีของไก่ในประเทศ การตรวจสอบต่อไปในความคืบหน้าเพื่อตรวจสอบผลของเงื่อนไขการจัดเก็บในกรณีของเม็ดรูปแบบ