Seed cultures were prepared by tran

Seed cultures were prepared by transferring a loop of lawn from the fully grown slant into a 250 mL flask containing 50 mL of MLB medium and incubated at 30C on a rotary shaker at 150 rpm for 36 h. 0.5 mL of this precultured fluid was inoculated in 250 mL Erlenmeyer flask containing 50 mL of main culture medium with the following composition (%): Tryptone 1, KH2PO4 0.05, MgSO47H2O 0.03; CaCl2 2H2O 0.1; NaCl 0.1; and glycerol 10.0 mL. The initial pH of the medium was adjusted to 7.0 by 1 N NaOH or 1 N HCl. Main culture medium was maintained at the same conditions for 48 h. The cells or cell debris were removed by centrifugation at 10,000 g and at 4C for 10 min. Supernatants were harvested as crude protease. All experiments were triplicated and the standard deviation was within 5%

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เมล็ดวัฒนธรรมโดยโอนวนของสนามหญ้าจากเอียงปลูกเต็มไปหนาว 250 mL ที่ประกอบด้วย 50 mL ของกลางคู่ MLB และ incubated ที่ 30 C ในเชคเกอร์หมุนที่รอบต่อนาที 150 mL 0.5 h. 36 ของของเหลว precultured เป็น inoculated ในหนาว Erlenmeyer 250 mL ประกอบด้วย 50 mL ของหลักวัฒนธรรมสื่อกับองค์ประกอบต่อไปนี้ (%): Tryptone 1, KH2PO4 0.05, MgSO4 7H2O 0.03 CaCl2 2H2O 0.1 NaCl 0.1 และกลีเซอร 10.0 mL มีการปรับปรุง pH เริ่มต้นกลาง 7.0 ด้วย 1 N NaOH หรือ 1 N HCl หลักวัฒนธรรมกลางถูกเก็บรักษาในเงื่อนไขเดียวกันสำหรับ 48 h เซลล์หรือเซลล์เศษออก โดย centrifugation ที่ 10000 g และ 4 C สำหรับ Supernatants 10 นาทีถูกเก็บเกี่ยวเป็นรติเอสดิบ ทดลองทั้งหมดถูก triplicated และส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานเป็นภายใน 5%

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วัฒนธรรมที่ได้เตรียมเมล็ดพันธุ์โดยการโอนห่วงของสนามหญ้าจากเอียงเติบโตอย่างเต็มที่ใน 250 มิลลิลิตรขวดมี 50 มล. ของเอ็มขนาดกลางและบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสในเครื่องปั่นหมุนที่ 150 รอบต่อนาที 36 ชั่วโมง 0.5 มิลลิลิตรของของเหลว precultured นี้เชื้อใน 250 มิลลิลิตร Erlenmeyer ขว​​ดมี 50 มล. ของสื่อวัฒนธรรมหลักที่มีองค์ประกอบดังต่อไปนี้ (%): Tryptone 1 KH2PO4 0.05, MgSO4 7H2O 0.03; CaCl2 2H2O 0.1; โซเดียมคลอไรด์ 0.1; และกลีเซอรอล 10.0 มิลลิลิตร พีเอชเริ่มต้นของกลางมีการปรับ 7.0 โดย 1 N NaOH หรือ 1 N HCl วัฒนธรรมสื่อหลักยังคงอยู่ที่เงื่อนไขเดียวกันเวลา 48 ชั่วโมง เซลล์หรือเศษเซลล์ที่ถูกถอดออกโดยการหมุนเหวี่ยงที่ 10,000 กรัมและที่ 4 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 นาที supernatants เก็บเกี่ยวเป็นน้ำย่อยดิบ การทดลองทั้งหมดถูก triplicated และส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานเป็นภายใน 5%

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วัฒนธรรมเตรียมเมล็ดโดยการโอนวงของสนามหญ้าจากโตเต็มเอียงในขวดมี 250 ml ผสม 50 มิลลิลิตร ( ขนาดกลาง และบ่มที่อุณหภูมิ 30  C เครื่องปั่นหมุนที่ความเร็ว 150 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 36 ชั่วโมง 0.5 ml ของของเหลว 1949 หัวเชื้อหมักในฟลาสก์ขนาด 250 มิลลิลิตร บรรจุ 50 ml ขวดอาหารเลี้ยงเชื้อหลักกับ องค์ประกอบต่อไปนี้ ( % ) : ทริพโทน 1 , kh2po4 0.05 MgSO4 ใ  7h2o 0.03 ;ผลิต  2H2O-dx 0.1 ; NaCl 0.1 มิลลิลิตร และกลีเซอรอล 10.0 พีเอชเริ่มต้นของอาหารปรับ 7.0 โดย 1 N NaOH หรือ 1 N HCl . อาหารเลี้ยงเชื้อหลักไว้ที่เงื่อนไขเดียวกันสำหรับ 48 ชั่วโมงเศษเซลล์หรือเซลล์ถูกเอาออกโดยการเหวี่ยงแยกที่ 10 , 000 กรัม และ ที่ 4  C 10 นาที supernatants เก็บเป็นดิบโปรติเอสทุกการทดลอง triplicated และส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน ภายใน 5 ปี