Total RNA was isolated from the fro

Total RNA was isolated from the frozen peanut leaves and then reverse-transcribed into
cDNA. Reverse transcription was performed using an ABI 7500 FAST Real-Time PCR System.
The primers Actin-F and Actin-R were used to amplify the peanut reference gene Ah-Actin, and
the primers Ah-Chi-F and Ah-Chi-R were used to amplify the peanut chitinase gene (Ah-Chi). The
sequences of all primers used in this study are listed in Table 1. The amplification protocol was
as follows: 95°C for 2 min; followed by 40 cycles of 95°C for 10 s and 60°C for 40 s; and then a
slow increase to 95°C. A dissociation curve was then prepared. Each reaction was repeated. The
relative level of expression of the target gene was calculated according to the 2
method of
Livak and Schmittgen (2002).
- (ΔΔ Ct)

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

แยกต่างหากจากใบถั่วลิสงแช่แข็งแล้ว ย้อนกลับทับศัพท์เป็นอาร์เอ็นเอทั้งหมด cDNA Transcription กลับที่ดำเนินการโดยใช้ 7500 ABI เร็ว Real-Time PCR ระบบการ ไพรเมอร์ที่ใช้ขยายยีนอ้างอิงถั่วลิสง Ah-แอกติน F แอกตินและแอกติน R และไพรเมอร์ Ah-ชี-F และ Ah-ชี-R ถูกใช้ขยายยีน chitinase ถั่วลิสง (Ah-ชี) ที่ลำดับของไพรเมอร์ทั้งหมดที่ใช้ในการศึกษานี้แสดงไว้ในตารางที่ 1 โพรโทคอขยายดังนี้: 95° C สำหรับ 2 นาที ตามวงจรของ 95° C 40 s และ 60° C สำหรับ 40 10 s แล้วเพิ่มขึ้นช้าถึง 95 องศาเซลเซียส แล้วมีเตรียมเส้นโค้ง dissociation ปฏิกิริยาแต่ละไม่ซ้ำกัน ที่สัมพันธ์ระดับของยีนเป้าหมายถูกคำนวณตาม 2 วิธีการของLivak และ Schmittgen (2002)- (ΔΔ Ct)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

รวมอาร์เอ็นเอที่แยกได้จากใบถั่วแช่แข็งแล้วย้อนกลับเข้ามาถ่ายยีน ถอดความย้อนกลับได้ดำเนินการโดยใช้ ABI 7500 FAST Real-Time PCR ระบบ.
ไพรเมอร์โปรตีน-F และโปรตีน-R
ถูกนำมาใช้เพื่อขยายอ้างอิงถั่วลิสงยีนอาโปรตีนและไพรเมอร์อาจิ-F และอาจิ-R ถูกนำมาใช้ในการขยายยีนไคติเนสถั่วลิสง (อาจิ)
ลำดับของไพรเมอร์ทั้งหมดที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้มีการระบุไว้ในตารางที่ 1
การขยายโปรโตคอลเป็นดังต่อไปนี้: 95 ° C เป็นเวลา 2 นาที; ตามด้วย 40 รอบของ 95 ° C เป็นเวลา 10 วินาทีและ 60 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 40 วินาที แล้วเพิ่มขึ้นช้าถึง 95 ° C
เส้นโค้งที่แยกออกจากกันได้รับการจัดเตรียมไว้แล้ว ปฏิกิริยาของแต่ละคนได้ซ้ำแล้วซ้ำอีก
ระดับความสัมพันธ์ของการแสดงออกของยีนเป้าหมายที่คำนวณได้ตาม 2
วิธีการ
Livak และ Schmittgen (2002).
- (ΔΔกะรัต)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

อาร์เอ็นเอทั้งหมดได้จากใบถั่วแช่แข็งและเปลี่ยนการทับศัพท์ใน
ยีน . ถอดความย้อนกลับการใช้ระบบวิธีที่รวดเร็วจริงเวลา ABI 7500 .
actin-f actin-r ไพรเมอร์และถูกใช้เพื่อขยายถั่วลิสงอ้างอิง actin อ่า ยีน และดีเอ็นเอ และ ah-chi-r
ah-chi-f นำมาขยายถั่วลิสงตำแหน่งยีนไคติเนส ( อ่าจิ )
ลำดับของไพรเมอร์ที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้ มีการระบุไว้ในตารางที่ 1 การเพิ่มปริมาณระเบียบคือ
ดังนี้ : 95 องศา C เป็นเวลา 2 นาที ตามด้วย 40 รอบ 95 องศา C 10 และ 60 องศา C 40 s ; แล้ว
เพิ่มช้า ถึง 95 องศา การเป็นเส้นโค้งก็เตรียม แต่ละปฏิกิริยาที่ซ้ำ
เทียบระดับของการแสดงออกของยีนเป้าหมายที่คำนวณตามวิธีของ

2และ livak schmittgen ( 2002 ) .
- ( ΔΔ CT )