ABSTRACT: A novel TiO2-based SPE st

ABSTRACT: A novel TiO2-based SPE strategy was developed for
eliminating normal ribonucleosides before mass spectrometry
(MS) analysis of 2′-deoxynucleosides and 2′-O-modified ribonucleosides.
The chromatographic research for the retention behavior
of ribonucleosides and 2′-deoxynucleosides on TiO2 materials was
investigated using TiO2 separation column. The results indicated a
specific affinity interaction mechanism between TiO2 and cis-diolcontaining
ribonucleosides, and the interaction was proved
effective even under a wide range of pH conditions and salt
concentrations. Benefiting from these features, a TiO2-based solid
phase extraction (SPE) method was developed for highly efficient
elimination of RNA contamination from genomic DNA.
Compared with the widely used enzymatic digestion method, the
proposed TiO2-based SPE method showed much more efficiency for the removal of RNA as well as provided high recoveries for
the 2′-deoxynucleosides. In addition, the sample processing time is dramatically shortened using the TiO2-based SPE method
(∼5 min) compared to the traditional enzymatic digestion method (∼12 h). Finally, the purification of 2′-O-methylated
ribonucleosides from RNA was successfully achieved in HeLa cells by the TiO2-based SPE method, which provided a proof-ofconcept
for the purification of relevant modified ribonucleosides from bulky normal ribonucleosides. Taken together, this
strategy developed in the current study offers a promising option to purify 2′-deoxynucleosides/2′-O-modified ribonucleosides
for their sensitive and accurate determination by eliminating normal ribonucleosides in biological samples

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

บทคัดย่อ: นวนิยาย SPE ที่ใช้ TiO2 กลยุทธ์ถูกพัฒนาขึ้นสำหรับ
ตัด ribonucleosides ปกติก่อนวิเคราะห์โดยรวม spectrometry
(MS) 2′ deoxynucleosides ก 2′ O-แก้ไข ribonucleosides
วิจัย chromatographic สำหรับลักษณะการทำงานคง
ribonucleosides และ 2′-deoxynucleosides TiO2 วัสดุถูก
สอบสวนใช้ TiO2 แยกคอลัมน์ ระบุผลการ
กลไกการโต้ตอบเฉพาะความสัมพันธ์ระหว่าง TiO2 และ cis diolcontaining
ribonucleosides และการโต้ตอบถูกพิสูจน์
มีประสิทธิภาพภายใต้เงื่อนไขค่า pH และเกลือหลากหลายแม้
ความเข้มข้น เกียรติยศจากคุณลักษณะเหล่านี้ ของแข็งใช้ TiO2
วิธีขั้นตอนการสกัด (SPE) ถูกพัฒนาขึ้นเพื่อประสิทธิภาพ
ตัดของอาร์เอ็นเอปนเปื้อนจาก genomic DNA
เปรียบเทียบกับวิธีการย่อยอาหารเอนไซม์ในระบบที่ใช้กันอย่างแพร่หลาย การ
เสนอวิธีใช้ TiO2 SPE พบมากประสิทธิภาพในการกำจัดของอาร์เอ็นเอ ตลอดจนให้ recoveries สูงสำหรับ
2′-deoxynucleosides เวลาการประมวลผลตัวอย่างจะลดลงอย่างมากโดยใช้การ
(∼5 min) วิธีใช้ TiO2 SPE เปรียบเทียบวิธีการย่อยอาหารเอนไซม์ในระบบดั้งเดิม (∼12 h) สุดท้าย ทำให้บริสุทธิ์ของ 2′-O-methylated
ribonucleosides จากอาร์เอ็นเอสำเร็จสำเร็จในเซลล์ HeLa โดยวิธี SPE ที่ใช้ TiO2 ซึ่งให้หลักฐาน-ofconcept
สำหรับฟอกของ ribonucleosides ที่เกี่ยวข้องปรับเปลี่ยนจาก ribonucleosides ปกติขนาดใหญ่ ปวง นี้
กลยุทธ์พัฒนาในการศึกษาปัจจุบันมีตัวสัญญาต้องทำ ribonucleosides 2′ deoxynucleosides/2′-O-แก้ไข
สำหรับการกำหนดความสำคัญ และถูกต้องโดยการขจัด ribonucleosides ปกติในตัวอย่างชีวภาพ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

บทคัดย่อ : กลยุทธ์ใหม่โดยใช้สาร TiO2 ได้พัฒนาการปกติก่อน มวลสาร ribonucleosides

( MS ) การวิเคราะห์ 2 - 2 - deoxynucleosides ’และ’ o-modified ribonucleosides .
การวิจัยโครมาโทกราฟีสำหรับพฤติกรรมการดูแลของ ribonucleosides
2 - deoxynucleosides วัสดุ TiO2 คือ
ศึกษาโดยใช้คอลัมน์แยก ) . การศึกษา
เฉพาะความสัมพันธ์ระหว่างปฏิสัมพันธ์กลไก TiO2 และ CIS diolcontaining
ribonucleosides และการโต้ตอบที่ถูกพิสูจน์
มีประสิทธิภาพแม้ภายใต้หลากหลายของเงื่อนไข pH และความเข้มข้นของเกลือ

ได้รับประโยชน์จากคุณสมบัติเหล่านี้ , TiO2 โดยการสกัดแยกด้วยเฟสของแข็ง
( SPE ) ถูกพัฒนาขึ้นเพื่อขจัดวิธีที่มีประสิทธิภาพสูง ซึ่งการปนเปื้อนของ

genomic DNAเปรียบเทียบกับการใช้เอนไซม์ย่อยอาหาร วิธีที่เสนอโดยวิธีทดสอบสาร TiO2
มากขึ้นประสิทธิภาพการกำจัด RNA รวมทั้งให้สูงขั้นที่ 2 นั้น
- deoxynucleosides . นอกจากนี้ ตัวอย่างการประมวลผลเวลาสั้นลงอย่างมากโดยใช้ TiO2 เอสพีวิธี
ตาม ( ∼ 5 นาที ) เมื่อเทียบกับวิธีการแบบดั้งเดิม การย่อยด้วยเอนไซม์ ( ∼ 12 ชั่วโมง ) ในที่สุดฟอก - 2 นั้น o-methylated
ribonucleosides จาก RNA คือ ประสบความสําเร็จใน Hela เซลล์โดยวิธี SPE โดยใช้ TiO2 ซึ่งให้การ ofconcept หลักฐานสำหรับการแก้ไขที่เกี่ยวข้อง ribonucleosides จาก ribonucleosides ขนาดใหญ่ปกติ ถ่ายด้วยกันนี้
ยุทธศาสตร์การพัฒนาในกระแสการศึกษาเสนอสัญญาตัวเลือกการชำระ 2 - deoxynucleosides / 2 ’’ - o-modified ribonucleosides
ไวและถูกต้องของการกำหนดโดยการขจัดปกติ ribonucleosides ในตัวอย่างชีวภาพ