Sample preparation procedure and LC-MS/MS quantification
were performed according to Kokkonen et al. (2005) with some
minor modifications. Twenty five mL of acetonitrile containing 0.1%
formic acid were added to 4 g of sample (i.e. blue-veined cheese,
blank matrix or spiked blank matrix). After vortexing for 2 min, the
suspension was mixed and homogenized using an Ultraturrax T25
Basic (IKA, Heidelberg, Germany) for 10 min before adding 20 mL
hexane. After solideliquid extraction for 5 min using a vortex
mixer, tubes were centrifuged for 10 min at 4000 rpm at 4 C in a
refrigerated centrifuge (ALC-Thermo, Rodano, Italy). The upper
hexane layer was discarded and 10 mL of the acetonitrile phase
were collected and filtered through a 0.45 mm Millex HV syringe
filter 13-mm unit (Millipore, Cork, Ireland). The extract was then
evaporated to dryness at 50 C in a vacuum concentrator (Thermo-
Savant, Rodano, Italy). The dried residues were dissolved in 500 mL
of methanol/water (50/50, v/v), vortexed and filtered through
0.20 mm Millex LG syringe filter 4-mm unit (Millipore, Vimodrone,
Italy) in an amber vial before LC-MS/MS analysis.
.
ขั้นตอนการเตรียมตัวอย่างและ LC-MS / MS ปริมาณ
ได้ดำเนินการตาม Kokkonen และคณะ (2005) กับบาง
การปรับเปลี่ยนเล็กน้อย ยี่สิบห้ามิลลิลิตร acetonitrile ที่มี 0.1%
กรดที่เพิ่มขึ้นถึง 4 กรัมของตัวอย่าง (เช่นชีสสีฟ้าเส้นเลือด,
เมทริกซ์เมทริกซ์หรือเปล่าว่างเปล่าแหลม) หลังจาก vortexing 2 นาที,
ระงับเป็นผสมและหดหายใช้ UltraTurrax T25
ขั้นพื้นฐาน (IKA, ไฮเดลเบิร์ก, เยอรมนี) เป็นเวลา 10 นาทีก่อนที่จะเพิ่ม 20 มล
เฮกเซน หลังจากการสกัด solideliquid เวลา 5 นาทีโดยใช้น้ำวน
ผสมหลอดถูกปั่นเป็นเวลา 10 นาทีที่ 4000 รอบต่อนาทีที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียสใน
centrifuge ตู้เย็น (ALC-เทอร์โม, Rodano, อิตาลี) บน
ชั้นเฮกเซนถูกทิ้งและ 10 มิลลิลิตรของเฟส acetonitrile
ถูกเก็บรวบรวมและกรองผ่าน 0.45 มม Millex HV เข็มฉีดยา
กรอง 13 มิลลิเมตรหน่วย (คคอร์ก, ไอร์แลนด์) สารสกัดจากนั้นก็
ระเหยจนแห้งที่ 50 องศาเซลเซียสในหัวสูญญากาศ (เทอร์โม
เมธี, Rodano, อิตาลี) ตกค้างแห้งถูกละลายใน 500 มล
เมทานอล / น้ำ (50/50, v / v), การ vortex และกรองผ่าน
0.20 มม Millex LG กรองเข็มฉีดยา 4 มมหน่วย (ค Vimodrone,
อิตาลี) ในขวดสีเหลืองอำพันก่อนที่สินค้า LC- MS / MS การวิเคราะห์
.
การแปล กรุณารอสักครู่..

ขั้นตอนการเตรียมตัวอย่าง และอินซูลินรักษาโรคปริมาณ
แสดงตาม kokkonen et al . ( 2005 ) กับบาง
การปรับเปลี่ยนเล็กน้อย ยี่สิบห้ามิลลิลิตรที่ประกอบด้วย 0.1% แอซิโตไนไตรล์
กรดเพิ่มถึง 4 กรัมของตัวอย่าง ( เช่นสีฟ้า veined ชีส
ว่างว่างหรือตะปูเมทริกซ์เมทริกซ์ ) หลังจาก vortexing 2 มิน
ระงับได้ผสมและบดที่ใช้ ultraturrax t25
( Ika พื้นฐาน ,ไฮเดลเบิร์ก , เยอรมนี ) เป็นเวลา 10 นาทีก่อนที่จะเพิ่ม 20 ml
เฮกเซน . หลังจากการสกัด solideliquid เป็นเวลา 5 นาทีใช้ Vortex
ผสมท่อ คือที่ระดับ 10 นาทีที่ 4000 รอบต่อนาทีที่อุณหภูมิ 4 C ใน
เหวี่ยงเย็น ( Thermo rodano ALC , อิตาลี ) ชั้นเฮกเซนบน
ถูกทิ้งและ 10 ml ของไนเฟส
ครั้งนี้ และกรองผ่าน 0.45 มม. millex HV เข็ม
หน่วยกรอง 13 มม. ( มิลลิ , คอร์ก , ไอร์แลนด์ สารสกัดแล้ว
ระเหยแห้งที่ 50 C ในสูญญากาศหัว ( Thermo -
เมธี rodano , อิตาลี ) ดินแห้งละลายในน้ำ 500 มล.
ของเมทานอล / น้ำ ( 50 / 50 V / V ) vortexed และกรองผ่าน
0.20 มม. millex LG เข็มตัวกรอง 4-mm หน่วย ( มิลลิวิโมโดรเน
, , อิตาลี ) ในขวดสีเหลืองก่อนการวิเคราะห์อินซูลิน MS .
การแปล กรุณารอสักครู่..
