The reverse phase chromatographic analyses of the extracts
were performed under gradient conditions using a
Phenomenex C18 column (4.6 mm 250 mm) packed with
5 mm diameter particles. The mobile phase was water containing
1% phosphoric acid (A) and acetonitrile (B), and the
composition gradient was 13% of B for 10 min and changed
to 20%, 30%, 50%, 60%, 70%, 20% and 10% B at 20, 30,
40, 50, 60, 70 and 80 min, respectively, using the method
described by Silva et al.,13 with slight modifications. The
blanched and unblanched extracts were analysed at a
concentration of 15 mg/mL. The flow rate was 0.6 mL/min,
the injection volume was 40 mL and the wavelengths were
271 nm for gallic and ellagic acids; 280 nm for catechin;
325 nm for chlorogenic and caffeic acids; and 366 nm for
quercetin and rutin. The samples and mobile phase were
filtered through a 0.45 mm membrane filter (Millipore) and
then degassed in an ultrasonic bath prior to use. Stock
solutions of the reference standards were prepared in the
HPLC mobile phase at a concentration range of 0.030e
0.250 mg/mL. The chromatography peaks were confirmed
by comparing their retention times with those of the
reference standards and the DAD spectra (200 to 600 nm).
All chromatography operations were performed at ambient
temperature and in triplicate.
Determination of the LOD and LOQ
The
วิเคราะห์ chromatographic ย้อนขั้นตอนของการแยกได้ดำเนินการภายใต้เงื่อนไขไล่โทนสีที่ใช้เป็นคอลัมน์ Phenomenex C18 (4.6 มม. 250 มม.) ด้วย5 มม.เส้นผ่านศูนย์กลางอนุภาค เฟสเคลื่อนที่น้ำไม่ประกอบด้วย1% กรดฟอสฟอริก (A) และ acetonitrile (B), และการไล่ระดับสีองค์ประกอบ 13% ของ B ใน 10 นาที และเปลี่ยนแปลงถึง 20%, 30%, 50%, 60%, 70%, 20% และ 10% บีที่ 20, 3040, 50, 60, 70 และ 80 นาที ตามลำดับ ใช้วิธีการอธิบายโดย Silva et al., 13 มีปรับเปลี่ยนเล็กน้อย ที่blanched และสารสกัดจาก unblanched ได้ analysed ที่มีความเข้มข้น 15 mg/mL อัตราการไหลได้ 0.6 mL/minปริมาณฉีดได้ 40 mL และความยาวคลื่นได้271 nm สำหรับ gallic และ กรด ellagic 280 nm สำหรับสารสกัดจาก325 nm chlorogenic และกรด caffeic และ 366 nm สำหรับquercetin และ rutin ตัวอย่างและขั้นตอนการเคลื่อนกรองผ่านตัวกรองเมมเบรน 0.45 mm (มาก) และแล้ว degassed ในอ่างอัลตราโซนิกก่อนการใช้ ตลาดหลักทรัพย์โซลูชั่นมาตรฐานอ้างอิงได้เตรียมพร้อมในการHPLC ระยะเคลื่อนที่ช่วงความเข้มข้นของ 0.030e0.250 มก./มล. มียืนยันยอด chromatographyโดยการเปรียบเทียบเวลาเก็บรักษาของพวกเขากับการอ้างอิงมาตรฐานและแรมสเป็คตราพ่อ (200-600 nm)ทั้งหมด chromatography ได้ดำเนินที่แวดล้อมอุณหภูมิ และ triplicateกำหนดลอดและ LOQที่
การแปล กรุณารอสักครู่..

โครมาขั้นตอนการวิเคราะห์ย้อนกลับของสารสกัดได้ดำเนินการภายใต้เงื่อนไขการไล่ระดับสีโดยใช้คอลัมน์Phenomenex C18 (4.6 มม? 250 มิลลิเมตร) เต็มไปด้วย5 มมอนุภาคขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง ขั้นตอนถือเป็นน้ำที่มีส่วนผสมของกรดฟอสฟ% 1 (A) และ acetonitrile (B) และการไล่ระดับสีองค์ประกอบเป็น13% ของ B เป็นเวลา 10 นาทีและมีการเปลี่ยนแปลงถึง20%, 30%, 50%, 60%, 70%, 20 % และ 10% B ที่ 20, 30, 40, 50, 60, 70 และ 80 นาทีตามลำดับโดยใช้วิธีการอธิบายโดยซิลวาet al., 13 มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย สารสกัดลวกและ Unblanched วิเคราะห์ที่มีความเข้มข้น 15 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร อัตราการไหล 0.6 มิลลิลิตร / นาที, ปริมาณการฉีด 40 มิลลิลิตรและความยาวคลื่นเป็น271 นาโนเมตรสำหรับฝรั่งเศสและกรด ellagic; 280 นาโนเมตรสำหรับ catechin; 325 นาโนเมตรสำหรับ chlorogenic และกรด caffeic; และ 366 นาโนเมตรสำหรับquercetin และรูติน กลุ่มตัวอย่างและเฟสมือถือถูกกรองผ่าน 0.45 มมกรองเมมเบรน (ค) และ degassed แล้วในห้องอาบน้ำล้ำก่อนที่จะใช้ หุ้นโซลูชั่นมาตรฐานอ้างอิงที่ถูกจัดเตรียมไว้ในขั้นตอนการHPLC มือถือในช่วงความเข้มข้นของ 0.030e 0.250 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร ยอดเขาที่โคได้รับการยืนยันโดยการเปรียบเทียบเวลาการเก็บรักษาของพวกเขากับบรรดาของมาตรฐานอ้างอิงและสเปกตรัมพ่อ(200-600 นาโนเมตร). การดำเนินงานโคทั้งหมดได้รับการดำเนินการในรอบอุณหภูมิและเพิ่มขึ้นสามเท่า. การกำหนด LOD และ LOQ
การแปล กรุณารอสักครู่..

กลับเฟสโครมาโทกราฟี การวิเคราะห์สารสกัด
ได้ภายใต้เงื่อนไขการใช้
phenomenex คอลัมน์ C18 4.6 มม. 250 มม. ) บรรจุด้วย
5 อนุภาคเส้นผ่านศูนย์กลางมิลลิเมตร ระยะเคลื่อนที่ น้ำที่มีกรดฟอสฟอริค
1 % ( A ) และ ( B ) และไน
องค์ประกอบลาดเป็น 13% ของ B 10 นาทีเปลี่ยน
20% , 30% , 50% , 60% , 70% , 20 % และ 10 % B ที่ 20 , 30 ,
40 , 50 , 60 ,70 และ 80 นาที ตามลำดับ โดยใช้วิธี
อธิบายโดยซิลวา et al . , 13 กับการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย
ลวกและสารสกัดจาก unblanched วิเคราะห์ที่
ความเข้มข้น 15 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร อัตราการไหลเท่ากับ 0.6 มิลลิลิตร / นาที ปริมาณ 40 ml ฉีด
) และความยาวคลื่น 271 nm สำหรับกอลลาจิก และกรด ; 280 nm สำหรับ Catechin ;
325 nm สำหรับ Caffeic กรดคลอโรจีนิก และ และ 366 nm สำหรับ
quercetin และรูติน ตัวอย่างและเฟสเคลื่อนที่เป็น
กรองผ่านเยื่อกรอง 0.45 มม. ( มิลลิ ) และ
แล้ว degassed ในนํ้าเสียงก่อนที่จะใช้ หุ้น
โซลูชั่นของการอ้างอิงมาตรฐานที่ถูกเตรียมไว้ใน
4 เฟสเคลื่อนที่ที่ความเข้มข้นในช่วง 0.030e
0.250 มิลลิกรัม / มิลลิลิตรโครมาโทกราฟียอดได้รับการยืนยันโดยการเปรียบเทียบความคงทนของครั้ง
กับ ผู้มาตรฐานอ้างอิง และพ่อแสง ( 200 ถึง 600 nm ) .
ปฏิบัติการโครมมีการปฏิบัติที่อุณหภูมิห้องและ
ทั้งสามใบ และความมุ่งมั่นของ LOD loq
การแปล กรุณารอสักครู่..
