- ข้อความ
- ประวัติศาสตร์
Water samples were collected from a
Water samples were collected from a pond in Durban region,
KwaZulu-Natal, South Africa. These samples were used for isolating
the pure strain of C. sorokiniana (genbank accession number:
AB731602.1) by subsequent subculturing using the streak plate
method (Ramanna et al., 2014). Stock culture was maintained in
BG11 media with 16:8 h of light–dark cycle with Gro-Lux lamps at
80 lmol m 2
s1
. An orbital shaker with 80 rpm (OrbiShakeShaker,
Labotec, South Africa) was used to maintain culture in turbulent
conditions at 22 ± 2 C. Culture was maintained under axenic
conditions by routine subculturing and microscopic observation
under Nikon eclipse 80i microscope (Nikon, USA)
The growth and nutrient uptake potential of C. sorokiniana at
different nitrogen and phosphorus levels was observed for 10 days
using nutrient starved cells. Starved cells were used to avoid the
effects of internally stored nutrients on growth and uptake that
would result in erroneous conclusions. To obtain nutrient starved
cells, 20 mL of the stock culture was centrifuged at 2000 g for
15 min (Heraeus multifuge 4KR, USA). The supernatant was dis-carded and 20 mL of the ultrapure water (Aqua MAX Ultra 370,
Younglin, Korea) was added to the algal cell pellet in the same tube
and cells were agitated using a vortex mixer (VM-300, Gemmy,
Taiwan) for 2 min. Culture was again centrifuged and the superna-tant was discarded. Similar washing with ultrapure water was
repeated two more times, after which cells were re-suspended in
20 mL of ultrapure water. Algal cells from stock were again with-drawn and washed in similar manner, all these washed cells were
pooled. The pooled cells were kept under constant illumination of
80 l mol m 2
s 1
for 3 days on an orbital shaker. These conditions
resulted in nutrient starved cells which were then used for inocu-lation in the experiments (Kaya and Picard, 1995).
The growth and nutrient uptake experiments were conducted
at five different nutrient levels as presented in Table 2. Rationale
behind these nutrient levels was to analyze the effects of variation
in one nutrient (either N or P) while keeping other nutrient in
sufficient concentrations so as to not be rate limiting. Since BG11
media is a high strength media, it was diluted with ultrapure water
(1/200 BG11) to lower the inherent nitrate and phosphate levels.
This diluted BG11 media was spiked with different concentrations
of nitrate (as NaNO3) and phosphate (as K2 HPO4 ) to achieve
required nutrient (N and P) levels in each experiment for
C. sorokiniana (Table 2). Availability of other micronutrients in
the diluted media to support the algal growth for the experimental
duration in the present study was established independently so
that the growth of C. sorokiniana was controlled by N or P only in
the experiments conducted. These modified BG11 media for each
of the five sets of experiments were prepared, their pH adjusted
to 7 with 0.1 M HCl/KOH, and then autoclaved.
In each set of experiments, 1.48 L of corresponding autoclaved
media was used in a 2 L flask (henceforth referred as reactor).
These reactors were inoculated with 20 mL of nutrient starved
C. sorokiniana cells. The total working volume in the reactors at
the start of experiments was 1.5 L and initial dry weight biomass
was 20 mg L1
. Reactors were cotton plugged and continuously
aerated using portable air pumps to maintain sufficient CO2 supply
as well as mixing of the culture. All reactors were sampled before
the start of the experiments for initial values of parameters, and
then placed under constant illumination of 80 l mol m 2
s 1
. These
illumination conditions were maintained continuously for 6 days,
so that the effects of variability in nutrient levels and any detri-mental effect on the culture physiology could be observed in
growth favouring conditions without intermittent dark phase.
After 6 days of continuous light, reactors were further maintained
in dark condition for next 4 days to analyze the culture behavior
and the recovery potential from any stress experienced. Tempera-ture in reactors was maintained at 22 ± 2 C. 70 mL aliquots were
withdrawn from each reactor daily and analyzed for various
parameters
KwaZulu-Natal, South Africa. These samples were used for isolating
the pure strain of C. sorokiniana (genbank accession number:
AB731602.1) by subsequent subculturing using the streak plate
method (Ramanna et al., 2014). Stock culture was maintained in
BG11 media with 16:8 h of light–dark cycle with Gro-Lux lamps at
80 lmol m 2
s1
. An orbital shaker with 80 rpm (OrbiShakeShaker,
Labotec, South Africa) was used to maintain culture in turbulent
conditions at 22 ± 2 C. Culture was maintained under axenic
conditions by routine subculturing and microscopic observation
under Nikon eclipse 80i microscope (Nikon, USA)
The growth and nutrient uptake potential of C. sorokiniana at
different nitrogen and phosphorus levels was observed for 10 days
using nutrient starved cells. Starved cells were used to avoid the
effects of internally stored nutrients on growth and uptake that
would result in erroneous conclusions. To obtain nutrient starved
cells, 20 mL of the stock culture was centrifuged at 2000 g for
15 min (Heraeus multifuge 4KR, USA). The supernatant was dis-carded and 20 mL of the ultrapure water (Aqua MAX Ultra 370,
Younglin, Korea) was added to the algal cell pellet in the same tube
and cells were agitated using a vortex mixer (VM-300, Gemmy,
Taiwan) for 2 min. Culture was again centrifuged and the superna-tant was discarded. Similar washing with ultrapure water was
repeated two more times, after which cells were re-suspended in
20 mL of ultrapure water. Algal cells from stock were again with-drawn and washed in similar manner, all these washed cells were
pooled. The pooled cells were kept under constant illumination of
80 l mol m 2
s 1
for 3 days on an orbital shaker. These conditions
resulted in nutrient starved cells which were then used for inocu-lation in the experiments (Kaya and Picard, 1995).
The growth and nutrient uptake experiments were conducted
at five different nutrient levels as presented in Table 2. Rationale
behind these nutrient levels was to analyze the effects of variation
in one nutrient (either N or P) while keeping other nutrient in
sufficient concentrations so as to not be rate limiting. Since BG11
media is a high strength media, it was diluted with ultrapure water
(1/200 BG11) to lower the inherent nitrate and phosphate levels.
This diluted BG11 media was spiked with different concentrations
of nitrate (as NaNO3) and phosphate (as K2 HPO4 ) to achieve
required nutrient (N and P) levels in each experiment for
C. sorokiniana (Table 2). Availability of other micronutrients in
the diluted media to support the algal growth for the experimental
duration in the present study was established independently so
that the growth of C. sorokiniana was controlled by N or P only in
the experiments conducted. These modified BG11 media for each
of the five sets of experiments were prepared, their pH adjusted
to 7 with 0.1 M HCl/KOH, and then autoclaved.
In each set of experiments, 1.48 L of corresponding autoclaved
media was used in a 2 L flask (henceforth referred as reactor).
These reactors were inoculated with 20 mL of nutrient starved
C. sorokiniana cells. The total working volume in the reactors at
the start of experiments was 1.5 L and initial dry weight biomass
was 20 mg L1
. Reactors were cotton plugged and continuously
aerated using portable air pumps to maintain sufficient CO2 supply
as well as mixing of the culture. All reactors were sampled before
the start of the experiments for initial values of parameters, and
then placed under constant illumination of 80 l mol m 2
s 1
. These
illumination conditions were maintained continuously for 6 days,
so that the effects of variability in nutrient levels and any detri-mental effect on the culture physiology could be observed in
growth favouring conditions without intermittent dark phase.
After 6 days of continuous light, reactors were further maintained
in dark condition for next 4 days to analyze the culture behavior
and the recovery potential from any stress experienced. Tempera-ture in reactors was maintained at 22 ± 2 C. 70 mL aliquots were
withdrawn from each reactor daily and analyzed for various
parameters
0/5000
มีการรวบรวมตัวอย่างน้ำจากบ่อในเดอร์บานKwaZulu-Natal แอฟริกาใต้ ตัวอย่างเหล่านี้ใช้สำหรับแยกสายพันธุ์บริสุทธิ์ของ C. sorokiniana (เลขทะเบียน genbank:AB731602.1) โดยใช้แผ่นริ้ว subculturing ต่อมาวิธี (Ramanna et al., 2014) วัฒนธรรมสินค้าคงคลังถูกจัดเก็บอยู่ใน16:8 h ของวงจรไฟ – มืดกับโกรลักซ์โคมไฟที่สื่อ BG1180 lmol ม. 2s 1. เชคเกอร์การโคจรกับ 80 รอบต่อนาที (OrbiShakeShakerLabotec แอฟริกาใต้) ใช้ในการรักษาวัฒนธรรมในปั่นป่วนเงื่อนไขที่ 2 C. วัฒนธรรมถูกเก็บรักษาภายใต้ axenic ± 22เงื่อนไข โดย subculturing ประจำและการสังเกตด้วยกล้องจุลทรรศน์ภายใต้กล้องจุลทรรศน์คราส 80i Nikon (นิ สหรัฐอเมริกา)เจริญเติบโตและศักยภาพในการดูดซับธาตุอาหารของ C. sorokiniana ที่ระดับไนโตรเจนและฟอสฟอรัสเป็นสังเกตสำหรับ 10 วันโดยใช้สาร starved เซลล์ Starved เซลล์ถูกใช้เพื่อหลีกเลี่ยงการผลของสารอาหารภายในเจริญเติบโตและดูดธาตุอาหารที่จะส่งผลในข้อผิดพลาด การได้รับสาร starvedเซลล์ 20 mL ของวัฒนธรรมหุ้นถูก centrifuged ที่ g 2000 สำหรับ15 นาที (Heraeus multifuge 4KR สหรัฐอเมริกา) Supernatant ถูก dis-ใบ และ 20 mL น้ำ ultrapure (ควาสูง Ultra 370Younglin เกาหลี) ได้เพิ่มเม็ด algal เซลล์ในหลอดเดียวกันและเซลล์ถูกนั้นกระตุ้นทำโดยใช้เครื่องผสม vortex (วีเอ็ม-300, Gemmyไต้หวัน) สำหรับ 2 นาที วัฒนธรรมถูกอีก centrifuged และ superna tant ถูกยกเลิก ซักผ้าคล้ายน้ำ ultrapure ถูกซ้ำสองครั้ง หลังจากที่เซลล์ถูกเลื่อนออกไปอีกในปริมาณ 20 mL น้ำ ultrapure เซลล์ algal จากหุ้นได้อีก ออกด้วย และหินในลักษณะคล้ายกัน ทุกคนเหล่านี้ล้างเซลล์รวม รวมเซลล์ที่ถูกเก็บไว้ภายใต้แสงสว่างคงที่ของ80 l m โมล 2s 1สำหรับ 3 วันในการเชคเกอร์ของวงโคจร เงื่อนไขเหล่านี้ส่งผลให้เซลล์ starved ธาตุอาหารที่ใช้แล้วสำหรับ inocu-เครื่องดูดในการทดลอง (Kaya และแตลปีการ์ 1995)เจริญเติบโตและดูดซับธาตุอาหารทดลองได้ดำเนินการใน five ธาตุอาหารระดับต่าง ๆ เป็นการนำเสนอในตารางที่ 2 ผลหลังระดับธาตุอาหารเหล่านี้คือการ วิเคราะห์ผลกระทบของการเปลี่ยนแปลงในหนึ่งธาตุอาหาร (N หรือ P) ขณะที่รักษาธาตุอาหารอื่น ๆ ในความเข้มข้นของ sufficient ไม่ถูกต้องอัตราจำกัด ตั้งแต่ BG11สื่อเป็นสื่อที่มีความแข็งแรงสูง ถูกทำให้เจือจาง ด้วยน้ำ ultrapure(1/200 BG11) เพื่อลดระดับไนเตรตและฟอสเฟตโดยธรรมชาติสื่อนี้ BG11 แตกออกมี spiked กับความเข้มข้นแตกต่างกันไนเตรต (เป็น NaNO3) และฟอสเฟต (เป็น K2 HPO4) เพื่อให้บรรลุต้องการธาตุอาหาร (N และ P) ระดับในการทดลองแต่ละC. sorokiniana (ตารางที่ 2) ความพร้อมขององค์ประกอบตามโรคอื่น ๆ ในแตกออกสื่อสนับสนุนที่สาหร่ายสำหรับการทดลองระยะเวลาในการศึกษาปัจจุบันก่อตั้งขึ้นอย่างเป็นอิสระดังนั้นที่เจริญเติบโตของ C. sorokiniana ถูกควบคุม โดย N หรือ P เท่านั้นในดำเนินการทดลอง สื่อ modified BG11 เหล่านี้สำหรับแต่ละของ five ชุดการทดลองที่เตรียม การปรับ pHกับ 7 ด้วย 0.1 M HCl/เกาะ และ autoclaved แล้วในแต่ละชุดการทดลอง 1.48 L ตรง autoclavedสื่อที่ใช้ในการ flask 2 ลิตร (ต่อไปเรียกว่าเครื่องปฏิกรณ์)เตาปฏิกรณ์เหล่านี้ถูก inoculated กับ 20 mL ของสาร starvedเซลซี sorokiniana ปริมาณงานรวมในเตาปฏิกรณ์ที่เริ่มต้นทดลองได้ 1.5 L และชีวมวลน้ำหนักแห้งเริ่มต้นถูก 20 มิลลิกรัม L 1. เตาปฏิกรณ์ได้ฝ้ายที่ต่อเนื่องและอากาศโดยใช้ปั๊มอากาศแบบพกพาเพื่อรักษาอุปทาน sufficient CO2และการผสมของวัฒนธรรม เตาปฏิกรณ์ทั้งหมดได้ความก่อนเริ่มต้นการทดลองสำหรับการเริ่มต้นค่าของพารามิเตอร์ และอยู่ภายใต้รัศมีคงที่ 80 l โมลเมตร 2s 1. เหล่านี้สภาพแสงสว่างถูกรักษาไว้อย่างต่อเนื่อง 6 วันเพื่อให้สามารถสังเกตลักษณะพิเศษของความแปรผันในระดับธาตุอาหารและผลใด ๆ เดตรีจิตสรีรวิทยาวัฒนธรรมในเจริญเติบโต favouring เงื่อนไข โดยเข้มเฟสไม่ต่อเนื่องหลังจาก 6 วันของแสงต่อเนื่อง เตาปฏิกรณ์ได้เพิ่มเติมรักษาในสภาพมืดวันถัดไป 4 เพื่อวิเคราะห์พฤติกรรมวัฒนธรรมและกู้คืนอาจเกิดจากความเครียดใด ๆ มีประสบการณ์ มีรักษาอุณหภูมิ-ture ในเตาปฏิกรณ์ที่ 22 aliquots ± 2 C. 70 mL ได้ถอนตัวออกจากเครื่องปฏิกรณ์แต่ละวัน และวิเคราะห์สำหรับต่าง ๆพารามิเตอร์
การแปล กรุณารอสักครู่..
เก็บตัวอย่างน้ำจากบ่อในภูมิภาคเดอร์บัน,
KwaZulu-Natal, แอฟริกาใต้ ตัวอย่างเหล่านี้ถูกนำมาใช้สำหรับการแยก
สายพันธุ์บริสุทธิ์ซี sorokiniana (หมายเลขภาคยานุวัติ GenBank:
AB731602.1) โดยภายหลังการถ่ายเชื้อโดยใช้แผ่นแนว
วิธีการ (. Ramanna et al, 2014) วัฒนธรรม Stock ได้รับการเก็บรักษาไว้ใน
สื่อ BG11 กับ 16: 8 ชั่วโมงของวงจรแสงเข้มกับ Gro-Lux โคมไฟที่
80 lmol ม. 2?
s
1? เครื่องปั่นวงโคจร 80 รอบต่อนาที (OrbiShakeShaker,
Labotec, แอฟริกาใต้) ถูกนำมาใช้ในการรักษาวัฒนธรรมในการป่วน
เงื่อนไขที่ 22 ± 2 องศาเซลเซียส วัฒนธรรมก็ยังคงอยู่ภายใต้การ axenic
เงื่อนไขโดยประจำถ่ายเชื้อและกล้องจุลทรรศน์
ภายใต้กล้องจุลทรรศน์ Nikon คราส 80i (Nikon, สหรัฐอเมริกา)
การเจริญเติบโตและการดูดซึมสารอาหารที่มีศักยภาพของซี sorokiniana ที่
ไนโตรเจนที่แตกต่างกันและระดับฟอสฟอรัสพบว่าเป็นเวลา 10 วัน
โดยใช้เซลล์ขาดแคลนสารอาหาร เซลล์หิวโหยถูกนำมาใช้เพื่อหลีกเลี่ยง
ผลกระทบของสารอาหารที่เก็บไว้ภายในการเจริญเติบโตและการดูดซึมที่
จะส่งผลให้ข้อสรุปที่ผิดพลาด ที่จะได้รับสารอาหารที่หิวโหย
เซลล์ 20 มลของวัฒนธรรมหุ้นถูกหมุนเหวี่ยงที่ 2,000 กรัมสำหรับ
15 นาที (Heraeus multifuge 4KR สหรัฐอเมริกา) ใสเป็นโรคปลิวว่อนและ 20 มิลลิลิตรของน้ำบริสุทธิ์ (อควาอัลตร้า MAX 370
Younglin เกาหลี) ถูกบันทึกอยู่ในตะกอนเซลล์สาหร่ายในหลอดเดียวกัน
และเซลล์ถูกตื่นเต้นใช้ผสมน้ำวน (VM-300, Gemmy,
ไต้หวัน ) เป็นเวลา 2 นาที วัฒนธรรมได้รับการหมุนเหวี่ยงอีกครั้งและ superna-สําทิ้ง ซักผ้าที่คล้ายกันกับน้ำบริสุทธิ์ที่ถูก
ทำซ้ำสองครั้งหลังจากที่เซลล์เป็นอีกครั้งที่ลอยอยู่ใน
20 มิลลิลิตรของน้ำบริสุทธิ์ เซลล์สาหร่ายจากสต็อกเป็นอีกครั้งกับวาดและล้างในลักษณะที่คล้ายกันทั้งหมดล้างเซลล์เหล่านี้ถูก
รวบรวม เซลล์ pooled ถูกเก็บไว้ภายใต้การส่องสว่างคงที่ของ
ม. 80 ลิตร mol 2
s? 1
เป็นเวลา 3 วันในการโคจรปั่น เงื่อนไขเหล่านี้
ส่งผลให้เซลล์ขาดแคลนสารอาหารที่ใช้แล้วสำหรับ inocu-lation ในการทดลอง (Kaya และปิ, 1995).
การเจริญเติบโตและการดูดซึมสารอาหารที่ทดลองได้ดำเนินการ
ที่ไฟได้ระดับสารอาหารที่แตกต่างกันที่แสดงในตารางที่ 2 เหตุผล
ที่อยู่เบื้องหลังระดับสารอาหารเหล่านี้ เพื่อวิเคราะห์ผลกระทบของการเปลี่ยนแปลง
ในสารอาหาร (ทั้ง N หรือ P) ขณะที่การรักษาสารอาหารอื่น ๆ ใน
สายความเข้มข้นพอเพียงเพียงพอเพื่อให้เป็นไปไม่ จำกัด อัตรา ตั้งแต่ BG11
สื่อเป็นสื่อที่มีความแข็งแรงสูงมันก็เจือจางด้วยน้ำบริสุทธิ์
(1/200 BG11) เพื่อลดไนเตรตโดยธรรมชาติและระดับฟอสเฟต.
นี้สื่อ BG11 เจือจางถูกแทงที่มีความเข้มข้นแตกต่างกัน
ของไนเตรต (ตาม NaNO3) และฟอสเฟต (ตาม K2 HPO4) เพื่อให้บรรลุ
สารอาหารที่จำเป็น (ไนโตรเจนและฟอสฟอรัส) ระดับในการทดสอบสำหรับแต่ละ
ซี sorokiniana (ตารางที่ 2) ความพร้อมของธาตุอาหารใน
สื่อเจือจางเพื่อรองรับการเติบโตของสาหร่ายสำหรับการทดลอง
ระยะเวลาในการศึกษาในปัจจุบันเป็นที่ยอมรับอย่างเป็นอิสระเพื่อ
ที่การเจริญเติบโตของซี sorokiniana ถูกควบคุมโดย N หรือ P เพียง แต่ใน
การทดลองดำเนินการ ไฟ Modi เหล่านี้เอ็ดสื่อ BG11 สำหรับแต่ละ
ของไฟได้ชุดทดลองเตรียมค่า pH ของพวกเขาปรับ
7 0.1 M HCl / เกาะและเบาแล้ว.
ในแต่ละชุดการทดลอง 1.48 ลิตรที่สอดคล้องกันเบา
สื่อที่ใช้ใน 2 ลิตรชั้นถาม (ต่อจากนี้ไปเรียกว่าเป็นเครื่องปฏิกรณ์).
เครื่องปฏิกรณ์เหล่านี้ถูกเชื้อด้วย 20 มลสารอาหารหิวโหย
ซี เซลล์ sorokiniana ปริมาณการทำงานทั้งหมดในเครื่องปฏิกรณ์นิวเคลียร์ที่
จุดเริ่มต้นของการทดลองคือ 1.5 ลิตรและเริ่มต้นชีวมวลน้ำหนักแห้ง
เป็น 20 มิลลิกรัม L?
1 เครื่องปฏิกรณ์ถูกเสียบผ้าฝ้ายและต่อเนื่อง
มวลเบาโดยใช้ปั๊มลมแบบพกพาที่จะรักษา SUF สายอุปทาน CO2 เพียงพอ
เช่นเดียวกับการผสมของวัฒนธรรม เครื่องปฏิกรณ์นิวเคลียร์ทั้งหมดถูกเก็บตัวอย่างก่อนที่จะ
เริ่มต้นของการทดลองสำหรับค่าเริ่มต้นของพารามิเตอร์และ
วางไว้แล้วภายใต้การส่องสว่างคงที่ของม. 80 ลิตร mol 2
s?
1 เหล่านี้
เงื่อนไขการส่องสว่างได้รับการดูแลอย่างต่อเนื่องเป็นเวลา 6 วัน
เพื่อให้ผลกระทบของความแปรปรวนในระดับสารอาหารและผลกระทบใด ๆ detri จิตสรีรวิทยาวัฒนธรรมอาจจะตั้งข้อสังเกตใน
การเจริญเติบโตความนิยมเงื่อนไขโดยมิต้องเฟสเข้มสม่ำเสมอ.
หลังจาก 6 วันของแสงอย่างต่อเนื่องเป็นเครื่องปฏิกรณ์ การบำรุงรักษาต่อไป
ในสภาพที่มืดต่อไป 4 วันในการวิเคราะห์พฤติกรรมวัฒนธรรม
และศักยภาพในการกู้คืนจากความเครียดที่มีประสบการณ์ใด ๆ อุณหภูมิ-ture ในเครื่องปฏิกรณ์ถูกเก็บรักษาไว้ที่ 22 ± 2 องศาเซลเซียส 70 มิลลิลิตร aliquots ถูก
ถอนออกจากเครื่องปฏิกรณ์แต่ละวันและวิเคราะห์ต่างๆ
พารามิเตอร์
KwaZulu-Natal, แอฟริกาใต้ ตัวอย่างเหล่านี้ถูกนำมาใช้สำหรับการแยก
สายพันธุ์บริสุทธิ์ซี sorokiniana (หมายเลขภาคยานุวัติ GenBank:
AB731602.1) โดยภายหลังการถ่ายเชื้อโดยใช้แผ่นแนว
วิธีการ (. Ramanna et al, 2014) วัฒนธรรม Stock ได้รับการเก็บรักษาไว้ใน
สื่อ BG11 กับ 16: 8 ชั่วโมงของวงจรแสงเข้มกับ Gro-Lux โคมไฟที่
80 lmol ม. 2?
s
1? เครื่องปั่นวงโคจร 80 รอบต่อนาที (OrbiShakeShaker,
Labotec, แอฟริกาใต้) ถูกนำมาใช้ในการรักษาวัฒนธรรมในการป่วน
เงื่อนไขที่ 22 ± 2 องศาเซลเซียส วัฒนธรรมก็ยังคงอยู่ภายใต้การ axenic
เงื่อนไขโดยประจำถ่ายเชื้อและกล้องจุลทรรศน์
ภายใต้กล้องจุลทรรศน์ Nikon คราส 80i (Nikon, สหรัฐอเมริกา)
การเจริญเติบโตและการดูดซึมสารอาหารที่มีศักยภาพของซี sorokiniana ที่
ไนโตรเจนที่แตกต่างกันและระดับฟอสฟอรัสพบว่าเป็นเวลา 10 วัน
โดยใช้เซลล์ขาดแคลนสารอาหาร เซลล์หิวโหยถูกนำมาใช้เพื่อหลีกเลี่ยง
ผลกระทบของสารอาหารที่เก็บไว้ภายในการเจริญเติบโตและการดูดซึมที่
จะส่งผลให้ข้อสรุปที่ผิดพลาด ที่จะได้รับสารอาหารที่หิวโหย
เซลล์ 20 มลของวัฒนธรรมหุ้นถูกหมุนเหวี่ยงที่ 2,000 กรัมสำหรับ
15 นาที (Heraeus multifuge 4KR สหรัฐอเมริกา) ใสเป็นโรคปลิวว่อนและ 20 มิลลิลิตรของน้ำบริสุทธิ์ (อควาอัลตร้า MAX 370
Younglin เกาหลี) ถูกบันทึกอยู่ในตะกอนเซลล์สาหร่ายในหลอดเดียวกัน
และเซลล์ถูกตื่นเต้นใช้ผสมน้ำวน (VM-300, Gemmy,
ไต้หวัน ) เป็นเวลา 2 นาที วัฒนธรรมได้รับการหมุนเหวี่ยงอีกครั้งและ superna-สําทิ้ง ซักผ้าที่คล้ายกันกับน้ำบริสุทธิ์ที่ถูก
ทำซ้ำสองครั้งหลังจากที่เซลล์เป็นอีกครั้งที่ลอยอยู่ใน
20 มิลลิลิตรของน้ำบริสุทธิ์ เซลล์สาหร่ายจากสต็อกเป็นอีกครั้งกับวาดและล้างในลักษณะที่คล้ายกันทั้งหมดล้างเซลล์เหล่านี้ถูก
รวบรวม เซลล์ pooled ถูกเก็บไว้ภายใต้การส่องสว่างคงที่ของ
ม. 80 ลิตร mol 2
s? 1
เป็นเวลา 3 วันในการโคจรปั่น เงื่อนไขเหล่านี้
ส่งผลให้เซลล์ขาดแคลนสารอาหารที่ใช้แล้วสำหรับ inocu-lation ในการทดลอง (Kaya และปิ, 1995).
การเจริญเติบโตและการดูดซึมสารอาหารที่ทดลองได้ดำเนินการ
ที่ไฟได้ระดับสารอาหารที่แตกต่างกันที่แสดงในตารางที่ 2 เหตุผล
ที่อยู่เบื้องหลังระดับสารอาหารเหล่านี้ เพื่อวิเคราะห์ผลกระทบของการเปลี่ยนแปลง
ในสารอาหาร (ทั้ง N หรือ P) ขณะที่การรักษาสารอาหารอื่น ๆ ใน
สายความเข้มข้นพอเพียงเพียงพอเพื่อให้เป็นไปไม่ จำกัด อัตรา ตั้งแต่ BG11
สื่อเป็นสื่อที่มีความแข็งแรงสูงมันก็เจือจางด้วยน้ำบริสุทธิ์
(1/200 BG11) เพื่อลดไนเตรตโดยธรรมชาติและระดับฟอสเฟต.
นี้สื่อ BG11 เจือจางถูกแทงที่มีความเข้มข้นแตกต่างกัน
ของไนเตรต (ตาม NaNO3) และฟอสเฟต (ตาม K2 HPO4) เพื่อให้บรรลุ
สารอาหารที่จำเป็น (ไนโตรเจนและฟอสฟอรัส) ระดับในการทดสอบสำหรับแต่ละ
ซี sorokiniana (ตารางที่ 2) ความพร้อมของธาตุอาหารใน
สื่อเจือจางเพื่อรองรับการเติบโตของสาหร่ายสำหรับการทดลอง
ระยะเวลาในการศึกษาในปัจจุบันเป็นที่ยอมรับอย่างเป็นอิสระเพื่อ
ที่การเจริญเติบโตของซี sorokiniana ถูกควบคุมโดย N หรือ P เพียง แต่ใน
การทดลองดำเนินการ ไฟ Modi เหล่านี้เอ็ดสื่อ BG11 สำหรับแต่ละ
ของไฟได้ชุดทดลองเตรียมค่า pH ของพวกเขาปรับ
7 0.1 M HCl / เกาะและเบาแล้ว.
ในแต่ละชุดการทดลอง 1.48 ลิตรที่สอดคล้องกันเบา
สื่อที่ใช้ใน 2 ลิตรชั้นถาม (ต่อจากนี้ไปเรียกว่าเป็นเครื่องปฏิกรณ์).
เครื่องปฏิกรณ์เหล่านี้ถูกเชื้อด้วย 20 มลสารอาหารหิวโหย
ซี เซลล์ sorokiniana ปริมาณการทำงานทั้งหมดในเครื่องปฏิกรณ์นิวเคลียร์ที่
จุดเริ่มต้นของการทดลองคือ 1.5 ลิตรและเริ่มต้นชีวมวลน้ำหนักแห้ง
เป็น 20 มิลลิกรัม L?
1 เครื่องปฏิกรณ์ถูกเสียบผ้าฝ้ายและต่อเนื่อง
มวลเบาโดยใช้ปั๊มลมแบบพกพาที่จะรักษา SUF สายอุปทาน CO2 เพียงพอ
เช่นเดียวกับการผสมของวัฒนธรรม เครื่องปฏิกรณ์นิวเคลียร์ทั้งหมดถูกเก็บตัวอย่างก่อนที่จะ
เริ่มต้นของการทดลองสำหรับค่าเริ่มต้นของพารามิเตอร์และ
วางไว้แล้วภายใต้การส่องสว่างคงที่ของม. 80 ลิตร mol 2
s?
1 เหล่านี้
เงื่อนไขการส่องสว่างได้รับการดูแลอย่างต่อเนื่องเป็นเวลา 6 วัน
เพื่อให้ผลกระทบของความแปรปรวนในระดับสารอาหารและผลกระทบใด ๆ detri จิตสรีรวิทยาวัฒนธรรมอาจจะตั้งข้อสังเกตใน
การเจริญเติบโตความนิยมเงื่อนไขโดยมิต้องเฟสเข้มสม่ำเสมอ.
หลังจาก 6 วันของแสงอย่างต่อเนื่องเป็นเครื่องปฏิกรณ์ การบำรุงรักษาต่อไป
ในสภาพที่มืดต่อไป 4 วันในการวิเคราะห์พฤติกรรมวัฒนธรรม
และศักยภาพในการกู้คืนจากความเครียดที่มีประสบการณ์ใด ๆ อุณหภูมิ-ture ในเครื่องปฏิกรณ์ถูกเก็บรักษาไว้ที่ 22 ± 2 องศาเซลเซียส 70 มิลลิลิตร aliquots ถูก
ถอนออกจากเครื่องปฏิกรณ์แต่ละวันและวิเคราะห์ต่างๆ
พารามิเตอร์
การแปล กรุณารอสักครู่..
การเก็บรวบรวมตัวอย่างน้ำจากบ่อในเดอร์บัน )
kwazulu Natal , แอฟริกาใต้ ตัวอย่างเหล่านี้ถูกใช้สำหรับการแยกเชื้อ C .
sorokiniana ( ขนาดหนังสือเลขที่ :
ab731602.1 ) โดยการใช้วิธีการตามมาแนวจาน
( ramanna et al . , 2010 ) วัฒนธรรมที่สต็อกไว้
bg11 สื่อกับ 16 : 8 H แสง– Gro Lux มืดรอบกับโคมไฟที่ lmol 2
80 M S 1
เป็นเครื่องปั่นแบบ 80 รอบต่อนาที ( orbishakeshaker
labotec , แอฟริกาใต้ ) ถูกใช้เพื่อรักษาวัฒนธรรมในเงื่อนไขป่วน
ที่ 22 ± 2 C . วัฒนธรรมการรักษาภายใต้เงื่อนไขโดยเลี้ยงตามปกติ และ axenic
ภายใต้การสังเกตกล้องจุลทรรศน์ Nikon คราส 80i กล้องจุลทรรศน์ ( Nikon , USA )
การเจริญเติบโต และศักยภาพในการดูดใช้ธาตุอาหารของ sorokiniana C ที่
ไนโตรเจนที่แตกต่างกันและระดับฟอสฟอรัสพบ 10 วัน
ใช้สารอาหารที่เซลล์อด . อดอาหารเซลล์ถูกใช้เพื่อหลีกเลี่ยงผลของการเจริญเติบโตและการดูดใช้ธาตุอาหารภายในที่เก็บไว้ที่
จะส่งผลที่ผิดพลาดบทสรุป เพื่อให้ได้สารอาหารหิว
เซลล์ 20 ml ของหุ้นวัฒนธรรมคือระดับที่ 2000 g
15 นาที ( Heraeus multifuge 4kr , USA )และน่านเป็น DIS ปลิวว่อนและ 20 มิลลิลิตรของน้ำ ( น้ำบริสุทธิ์มาก Max Ultra 370
younglin เกาหลี ) คือการเพิ่มเม็ดเซลล์ของสาหร่ายในหลอดเดียวกัน และเซลล์ก็ตื่นเต้น
ใช้ Vortex Mixer ( vm-300 gemmy
, , ไต้หวัน ) 2 นาทีเป็นอีกครั้งที่ระดับวัฒนธรรมและ superna จึงถูกยกเลิก . คล้ายคลึงกับเครื่องซักผ้าน้ำบริสุทธิ์มาก
ซ้ำครั้งที่สองอีกหลังจากนั้นเซลล์ก็จะถูกระงับใน
20 ml ของน้ำบริสุทธิ์มาก . การใช้เซลล์จากหุ้นอีกครั้งกับการวาดและล้างในลักษณะที่คล้ายกัน ทั้งหมดเหล่านี้ล้างเซลล์มี
พู . รวมเซลล์ถูกเก็บไว้ภายใต้แสงคงที่ของ
80 L mol m 2
s 1
3 วันในการเขย่า โคจร เงื่อนไขเหล่านี้
ให้สารอาหารที่เซลล์อดซึ่งใช้สำหรับ inocu lation ในการทดลอง ( ดังนั้น และ Picard , 1995 ) .
การเจริญเติบโตและการดูดใช้ธาตุอาหารได้ดำเนินการทดลองที่แตกต่างกันระดับธาตุอาหาร
จึงได้ตามที่แสดงในตารางที่ 2 เหตุผลที่อยู่เบื้องหลังนี้คือระดับธาตุอาหาร
เพื่อวิเคราะห์ผลกระทบของการเปลี่ยนแปลงในอาหารทั้ง
n หรือ p ) ขณะที่การรักษาใน
ธาตุอาหารอื่น ๆซุฟจึง cient ความเข้มข้นเพื่อไม่อัตราจำกัด ตั้งแต่ bg11
สื่อเป็นพลังสื่อสูง มันเจือจางด้วยน้ำบริสุทธิ์มาก
( 1 / 200 bg11 ) การลดไนเตรตและฟอสเฟตในระดับนี้ .
bg11 สื่อถูกเจือจางความเข้มข้นต่างๆ
ไนเตรท ( NaNO3 ) และฟอสเฟต ( K2 hpo4 ) เพื่อให้บรรลุ
ต้องการสารอาหาร ( และ P ) ระดับในแต่ละการทดลอง
Csorokiniana ( ตารางที่ 2 ) โรงแรมอื่นๆใน micronutrients
เจือจางสื่อเพื่อรองรับการเจริญเติบโตของสาหร่ายสำหรับระยะเวลาทดลอง
ในการศึกษา ก่อตั้งขึ้นอย่างเป็นอิสระดังนั้น
ที่การเจริญเติบโตของ C . sorokiniana ถูกควบคุมโดย N หรือ P เท่านั้น
การทดลอง . เหล่านี้จึงเอ็ด bg11 Modi สื่อแต่ละ
ของจึงได้ชุดทดลองเตรียมปรับ pH
, ของพวกเขา0.1 M HCl / 7 เกาะ แล้วสังเคราะห์ .
ในแต่ละชุดการทดลอง 1.48 ล. สังเคราะห์ที่ใช้ในสื่อ
2 L flถาม ( ตอนนี้เรียกว่าเป็นเครื่องปฏิกรณ์ ) .
เครื่องปฏิกรณ์เหล่านี้ถูกใส่ 20 ml ของธาตุอาหารหิว
C sorokiniana เซลล์ รวมปริมาณงานในเครื่องปฏิกรณ์ที่
เริ่มต้นของการทดลอง 1.5 ลิตร และน้ำหนักแห้งมวลชีวภาพเริ่มต้นคือ 20 mg L
1
เครื่องปฏิกรณ์ถูกเสียบ และฝ้ายอย่างต่อเนื่อง
( ใช้แอร์ปั๊มแบบพกพาเพื่อรักษาซุฟจึง cient CO2 จัดหา
เช่นเดียวกับการผสมของวัฒนธรรม เครื่องปฏิกรณ์ทั้งหมดจำนวนก่อน
เริ่มต้นของการทดลอง ค่าเริ่มต้นของตัวแปรและ
แล้วอยู่ภายใต้รัศมีคงที่ 80 L mol m 2
1 s
สภาพแสงเหล่านี้ยังคงต่อเนื่องเป็นเวลา 6 วัน
,ดังนั้น ผลของความแปรปรวนในระดับธาตุอาหารและเดตรีจิตมีผลต่อวัฒนธรรมสรีรวิทยาสามารถสังเกตได้ในการใช้เงื่อนไขโดยไม่นิยม
หลังจากที่มืด เฟส 6 วันของไฟต่อเนื่องเครื่องปฏิกรณ์ได้รักษา
ในสภาพมืดไป 4 วัน เพื่อวิเคราะห์พฤติกรรม วัฒนธรรม
และการกู้คืนจากความเครียดใด ๆที่มีศักยภาพ ที่มีประสบการณ์อุณหภูมิจริงในเครื่องปฏิกรณ์ไว้ที่ 22 ± 2 C 70 ml เฉยๆถูก
ถอนตัวจากแต่ละถังทุกวัน และวิเคราะห์พารามิเตอร์ต่างๆ
kwazulu Natal , แอฟริกาใต้ ตัวอย่างเหล่านี้ถูกใช้สำหรับการแยกเชื้อ C .
sorokiniana ( ขนาดหนังสือเลขที่ :
ab731602.1 ) โดยการใช้วิธีการตามมาแนวจาน
( ramanna et al . , 2010 ) วัฒนธรรมที่สต็อกไว้
bg11 สื่อกับ 16 : 8 H แสง– Gro Lux มืดรอบกับโคมไฟที่ lmol 2
80 M S 1
เป็นเครื่องปั่นแบบ 80 รอบต่อนาที ( orbishakeshaker
labotec , แอฟริกาใต้ ) ถูกใช้เพื่อรักษาวัฒนธรรมในเงื่อนไขป่วน
ที่ 22 ± 2 C . วัฒนธรรมการรักษาภายใต้เงื่อนไขโดยเลี้ยงตามปกติ และ axenic
ภายใต้การสังเกตกล้องจุลทรรศน์ Nikon คราส 80i กล้องจุลทรรศน์ ( Nikon , USA )
การเจริญเติบโต และศักยภาพในการดูดใช้ธาตุอาหารของ sorokiniana C ที่
ไนโตรเจนที่แตกต่างกันและระดับฟอสฟอรัสพบ 10 วัน
ใช้สารอาหารที่เซลล์อด . อดอาหารเซลล์ถูกใช้เพื่อหลีกเลี่ยงผลของการเจริญเติบโตและการดูดใช้ธาตุอาหารภายในที่เก็บไว้ที่
จะส่งผลที่ผิดพลาดบทสรุป เพื่อให้ได้สารอาหารหิว
เซลล์ 20 ml ของหุ้นวัฒนธรรมคือระดับที่ 2000 g
15 นาที ( Heraeus multifuge 4kr , USA )และน่านเป็น DIS ปลิวว่อนและ 20 มิลลิลิตรของน้ำ ( น้ำบริสุทธิ์มาก Max Ultra 370
younglin เกาหลี ) คือการเพิ่มเม็ดเซลล์ของสาหร่ายในหลอดเดียวกัน และเซลล์ก็ตื่นเต้น
ใช้ Vortex Mixer ( vm-300 gemmy
, , ไต้หวัน ) 2 นาทีเป็นอีกครั้งที่ระดับวัฒนธรรมและ superna จึงถูกยกเลิก . คล้ายคลึงกับเครื่องซักผ้าน้ำบริสุทธิ์มาก
ซ้ำครั้งที่สองอีกหลังจากนั้นเซลล์ก็จะถูกระงับใน
20 ml ของน้ำบริสุทธิ์มาก . การใช้เซลล์จากหุ้นอีกครั้งกับการวาดและล้างในลักษณะที่คล้ายกัน ทั้งหมดเหล่านี้ล้างเซลล์มี
พู . รวมเซลล์ถูกเก็บไว้ภายใต้แสงคงที่ของ
80 L mol m 2
s 1
3 วันในการเขย่า โคจร เงื่อนไขเหล่านี้
ให้สารอาหารที่เซลล์อดซึ่งใช้สำหรับ inocu lation ในการทดลอง ( ดังนั้น และ Picard , 1995 ) .
การเจริญเติบโตและการดูดใช้ธาตุอาหารได้ดำเนินการทดลองที่แตกต่างกันระดับธาตุอาหาร
จึงได้ตามที่แสดงในตารางที่ 2 เหตุผลที่อยู่เบื้องหลังนี้คือระดับธาตุอาหาร
เพื่อวิเคราะห์ผลกระทบของการเปลี่ยนแปลงในอาหารทั้ง
n หรือ p ) ขณะที่การรักษาใน
ธาตุอาหารอื่น ๆซุฟจึง cient ความเข้มข้นเพื่อไม่อัตราจำกัด ตั้งแต่ bg11
สื่อเป็นพลังสื่อสูง มันเจือจางด้วยน้ำบริสุทธิ์มาก
( 1 / 200 bg11 ) การลดไนเตรตและฟอสเฟตในระดับนี้ .
bg11 สื่อถูกเจือจางความเข้มข้นต่างๆ
ไนเตรท ( NaNO3 ) และฟอสเฟต ( K2 hpo4 ) เพื่อให้บรรลุ
ต้องการสารอาหาร ( และ P ) ระดับในแต่ละการทดลอง
Csorokiniana ( ตารางที่ 2 ) โรงแรมอื่นๆใน micronutrients
เจือจางสื่อเพื่อรองรับการเจริญเติบโตของสาหร่ายสำหรับระยะเวลาทดลอง
ในการศึกษา ก่อตั้งขึ้นอย่างเป็นอิสระดังนั้น
ที่การเจริญเติบโตของ C . sorokiniana ถูกควบคุมโดย N หรือ P เท่านั้น
การทดลอง . เหล่านี้จึงเอ็ด bg11 Modi สื่อแต่ละ
ของจึงได้ชุดทดลองเตรียมปรับ pH
, ของพวกเขา0.1 M HCl / 7 เกาะ แล้วสังเคราะห์ .
ในแต่ละชุดการทดลอง 1.48 ล. สังเคราะห์ที่ใช้ในสื่อ
2 L flถาม ( ตอนนี้เรียกว่าเป็นเครื่องปฏิกรณ์ ) .
เครื่องปฏิกรณ์เหล่านี้ถูกใส่ 20 ml ของธาตุอาหารหิว
C sorokiniana เซลล์ รวมปริมาณงานในเครื่องปฏิกรณ์ที่
เริ่มต้นของการทดลอง 1.5 ลิตร และน้ำหนักแห้งมวลชีวภาพเริ่มต้นคือ 20 mg L
1
เครื่องปฏิกรณ์ถูกเสียบ และฝ้ายอย่างต่อเนื่อง
( ใช้แอร์ปั๊มแบบพกพาเพื่อรักษาซุฟจึง cient CO2 จัดหา
เช่นเดียวกับการผสมของวัฒนธรรม เครื่องปฏิกรณ์ทั้งหมดจำนวนก่อน
เริ่มต้นของการทดลอง ค่าเริ่มต้นของตัวแปรและ
แล้วอยู่ภายใต้รัศมีคงที่ 80 L mol m 2
1 s
สภาพแสงเหล่านี้ยังคงต่อเนื่องเป็นเวลา 6 วัน
,ดังนั้น ผลของความแปรปรวนในระดับธาตุอาหารและเดตรีจิตมีผลต่อวัฒนธรรมสรีรวิทยาสามารถสังเกตได้ในการใช้เงื่อนไขโดยไม่นิยม
หลังจากที่มืด เฟส 6 วันของไฟต่อเนื่องเครื่องปฏิกรณ์ได้รักษา
ในสภาพมืดไป 4 วัน เพื่อวิเคราะห์พฤติกรรม วัฒนธรรม
และการกู้คืนจากความเครียดใด ๆที่มีศักยภาพ ที่มีประสบการณ์อุณหภูมิจริงในเครื่องปฏิกรณ์ไว้ที่ 22 ± 2 C 70 ml เฉยๆถูก
ถอนตัวจากแต่ละถังทุกวัน และวิเคราะห์พารามิเตอร์ต่างๆ
การแปล กรุณารอสักครู่..
ภาษาอื่น ๆ
การสนับสนุนเครื่องมือแปลภาษา: กรีก, กันนาดา, กาลิเชียน, คลิงออน, คอร์สิกา, คาซัค, คาตาลัน, คินยารวันดา, คีร์กิซ, คุชราต, จอร์เจีย, จีน, จีนดั้งเดิม, ชวา, ชิเชวา, ซามัว, ซีบัวโน, ซุนดา, ซูลู, ญี่ปุ่น, ดัตช์, ตรวจหาภาษา, ตุรกี, ทมิฬ, ทาจิก, ทาทาร์, นอร์เวย์, บอสเนีย, บัลแกเรีย, บาสก์, ปัญจาป, ฝรั่งเศส, พาชตู, ฟริเชียน, ฟินแลนด์, ฟิลิปปินส์, ภาษาอินโดนีเซี, มองโกเลีย, มัลทีส, มาซีโดเนีย, มาราฐี, มาลากาซี, มาลายาลัม, มาเลย์, ม้ง, ยิดดิช, ยูเครน, รัสเซีย, ละติน, ลักเซมเบิร์ก, ลัตเวีย, ลาว, ลิทัวเนีย, สวาฮิลี, สวีเดน, สิงหล, สินธี, สเปน, สโลวัก, สโลวีเนีย, อังกฤษ, อัมฮาริก, อาร์เซอร์ไบจัน, อาร์เมเนีย, อาหรับ, อิกโบ, อิตาลี, อุยกูร์, อุสเบกิสถาน, อูรดู, ฮังการี, ฮัวซา, ฮาวาย, ฮินดี, ฮีบรู, เกลิกสกอต, เกาหลี, เขมร, เคิร์ด, เช็ก, เซอร์เบียน, เซโซโท, เดนมาร์ก, เตลูกู, เติร์กเมน, เนปาล, เบงกอล, เบลารุส, เปอร์เซีย, เมารี, เมียนมา (พม่า), เยอรมัน, เวลส์, เวียดนาม, เอสเปอแรนโต, เอสโทเนีย, เฮติครีโอล, แอฟริกา, แอลเบเนีย, โคซา, โครเอเชีย, โชนา, โซมาลี, โปรตุเกส, โปแลนด์, โยรูบา, โรมาเนีย, โอเดีย (โอริยา), ไทย, ไอซ์แลนด์, ไอร์แลนด์, การแปลภาษา.
- ในหลวงทรงประสูติ
- I'm a fool for that shake in your thighs
- dedo lingua cube Boceta
- ฟังดูน่าสนุก
- ฉันอยู่บ้าน
- I'm a fool for that shake in your thighs
- What 'truce'?
- I haven't slept
- have people that house is dead
- can i ask you allowed to make offer for
- Feel character
- เพราะ อันหนึ่งถูกสร้างมาตั้งแต่สมัยก่อน
- สุขสันต์วันเกิดปีนี้ฉันอายุ18แล้วพ่อ
- I have thought the suspicious;
- สุขสันต์วันเกิดปีนี้ฉันอายุ18แล้วพ่อ
- Some of them work, some home rich.
- ใช้ชีวิตอย่างเต็มที่ในรอบปี
- I have to go to school.
- บ้านของเพื่อนฉัน
- คุณไม่รู้สึกรังเกียจฉัน
- เราเพิ่งรู้จักกันได้ไม่นาน
- What truce?
- สิ่งแรกที่ต้องเปลี่ยนคือตัวเรา
- แล้วเราจะพบกันได้อย่างไร
