Fish were sampled after 2, 4, 8, 16 and 31 days of exposure. They
were anesthetized with 0.2% phenoxyethanol and the individual
weights and lengths measured. Blood (approx. 1 mL) was taken
from the caudal vein, transferred into heparinised tubes, centrifuged
(1000 g; 15 min), and the plasma separated and stored
at 80 C. Immediately after, fish were sacrificed by quickly
severing the spinal cord and the liver and the gonads were
dissected. A fragment of the central part of the left gonad from each
fish was separated and fixed in 4% PAF (buffered paraformaldehyde)
for further histological analysis. The rest of the gonads
and the liver were immediately frozen in liquid nitrogen and
stored at 80 C. All fish were treated in accordance with the
Spanish regulations (Royal Decree Act 53/2013) and the European
legislation (2010/63 EU) concerning the protection of vertebrates
used for experimental and other scientific purposes. All the steps
were taken to reduce suffering of the animals.
ปลา จำนวน 2 , 4 , 8 , 16 และ 32 วันของการเปิดรับ พวกเขาถูกวางยาสลบด้วย phenoxyethanol 0.2% และบุคคลน้ำหนักและความยาวที่วัดได้ เลือด ( ประมาณ 1 มล. ) ถ่ายจากเส้นเลือดที่หาง โอนเข้า heparinised ท่อ , ไฟฟ้า ,( 1 , 000 กรัม ; 15 นาที ) และพลาสมาแยกและจัดเก็บที่ 80 องศาเซลเซียส ทันทีหลังจาก ปลาถูกฆ่าโดยเร็วตัดไขสันหลังและตับและพัฒนาคือรายงาน ส่วนของภาคกลางของท้องน้อยซ้ายจากแต่ละปลาที่ถูกแยกออกจากกันและคงที่ 4% PAF ( กรดพาราฟอร์มาลดิไฮด์ )วิเคราะห์ผลต่อไป ส่วนที่เหลือของอยู่หมัดและตับแช่แข็งในไนโตรเจนเหลว และทันทีที่อุณหภูมิ 80 องศาเซลเซียส ปลาทั้งหมดได้รับการรักษาตามกฎหมายภาษาสเปนพระราชบัญญัติ พระราชกฤษฎีกา 53 / 2013 ) และยุโรปกฎหมาย ( 2010 / 63 EU ) กับการคุ้มครองของสัตว์มีกระดูกสันหลังใช้สำหรับทดลองและการวิจัยทางวิทยาศาสตร์อื่น ๆ ขั้นตอนทั้งหมดถ่ายเพื่อลดความทุกข์ทรมานของสัตว์
การแปล กรุณารอสักครู่..
