Standard curve for methylglyoxal. D

Standard curve for methylglyoxal. Different concentrations (10, 25, 50,
and 100 lM) of pure MG (Sigma) were derivatized with 1,2-diaminobenzene
and the absorbance of the resulting derivative was read by Cary
50 Bio UV-Visible spectrophotometer (Varian). One milliliter of total
reaction mixture contained: 250 lL of 7.2 mM 1,2-diaminobenzene,
100 lL of 5M perchloric acid, and double-distilled water. In the control,
MG was not added to the reaction mixture.
Sample preparation for MG estimation in plants. About 0.3 g tissue was
extracted in 3 mL of 0.5M perchloric acid. After incubating for 15 min on
ice, the mixture was centrifuged at 4 C at 11,000g for 10 min. A colored
supernatant was obtained in some plant extracts that was decolorized by
adding charcoal (10 mg/mL), kept for 15 min at room temperature, and
centrifuged at 11,000g for 10 min. Before using this supernatant for MG
assay, it was neutralized by keeping for 15 min with saturated solution of
potassium carbonate at room temperature and centrifuged again at
11,000g for 10 min. Neutralized supernatant was used for MG estimation.
Methylglyoxal assay. In a total volume of 1 mL, 250 lL of 7.2 mM 1,2-
diaminobenzene, 100 lL of 5M perchloric acid, and 650 lL of the neutralized
supernatant were added in that order. The absorbance of the
derivatized MG was read starting immediately at a broad spectrum range
(200–500 nm) for 15 cycles of 1 min interval each.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กราฟมาตรฐานสำหรับ methylglyoxal ความเข้มข้นแตกต่างกัน (10, 25, 50และ 100 lM) บริสุทธิ์มก. (Sigma) มี derivatized กับ diaminobenzene 1, 2และค่าของอนุพันธ์ผลถูกอ่าน โดยแครีแกรนต์สเปค bio UV มองเห็น 50 (แล้วแต่กำหนด) หนึ่งมิลลิเมตรของทั้งหมดประกอบด้วยส่วนผสมของปฏิกิริยา: 250 lL ของ 7.2 มม. 1, 2-diaminobenzene100 lL ดไป็น 5 เมตร น้ำกลั่นสองครั้ง ในการควบคุมมก.ไม่ถูกผสมปฏิกิริยาการเตรียมตัวอย่างสำหรับการประมาณ MG ในพืช คือเนื้อเยื่อประมาณ 0.3 กรัมสกัดใน 3 มิลลิลิตร 0.5M ดไป็น หลังจาก incubating สำหรับ 15 นาทีในน้ำแข็ง ส่วนผสมเป็นผลิตภัณฑ์ที่ 4 C ที่ 11,000g 10 นาที สีsupernatant ได้รับสารสกัดจากพืชบางอย่างที่ถูก decolorized โดยเพิ่มถ่าน (10 mg/mL), เก็บ 15 นาทีที่อุณหภูมิห้อง และจากที่ 11,000g 10 นาที ก่อนที่จะใช้นี้ supernatant สำหรับ MGทดสอบ มันเป็นกลาง โดยรักษา 15 นาทีด้วยสารละลายอิ่มตัวโพแทสเซียมคาร์บอเนตที่อุณหภูมิห้อง และจากอีกที่11,000g 10 นาที Neutralized supernatant ถูกใช้สำหรับการประเมินมิลลิกรัมทดสอบ Methylglyoxal มีปริมาณรวมของ 1 มล. 250 lL 7.2 มม. 1, 2 -diaminobenzene, 100 lL ของดไป็น 5 เมตร และ 650 lL ของที่เก็บsupernatant ถูกเพิ่มในใบสั่ง ค่าของการderivatized MG ถูกอ่านเริ่มต้นทันทีที่ช่วงสเปกตรัม(200-500 nm) รอบ 15 ของช่วง 1 นาที

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

โค้งมาตรฐานสำหรับการ methylglyoxal ความเข้มข้นแตกต่างกัน (10, 25, 50,
และ 100 LM) ของ MG บริสุทธิ์ (ซิกม่า) ได้รับการ derivatized กับ 1,2-diaminobenzene
และการดูดกลืนแสงของอนุพันธ์ที่เกิดได้อ่านโดย Cary
50 spectrophotometer Bio UV-Visible (Varian) หนึ่งมิลลิลิตรจากทั้งหมด
ผสมปฏิกิริยาที่มีอยู่: 250 LL 7.2 มิลลิ 1,2-diaminobenzene,
100 LL ของ 5M กรดเปอร์คลอริกและดับเบิลน้ำกลั่น ในการควบคุม,
MG ไม่ได้ถูกเพิ่มผสมปฏิกิริยา.
เตรียมตัวสำหรับการประมาณ MG ในพืช เนื้อเยื่อประมาณ 0.3 กรัมถูก
สกัดใน 3 มล 0.5M กรดเปอร์คลอริก หลังจากบ่มนาน 15 นาทีบน
น้ำแข็งส่วนผสมที่ถูกหมุนเหวี่ยงที่ 4? C ที่ 11,000g เป็นเวลา 10 นาที สี
ใสที่ได้รับในสารสกัดจากพืชบางอย่างที่ถูก decolorized โดย
การเพิ่มถ่าน (10 mg / ml) เก็บไว้เป็นเวลา 15 นาทีที่อุณหภูมิห้องและ
หมุนเหวี่ยงที่ 11,000g เป็นเวลา 10 นาที ก่อนที่จะใช้สารละลายนี้ MG
ทดสอบมันก็เป็นกลางโดยการเก็บรักษานาน 15 นาทีกับสารละลายอิ่มตัวของ
โพแทสเซียมคาร์บอเนตที่อุณหภูมิห้องและปั่นอีกครั้งที่
11,000g เป็นเวลา 10 นาที สารละลายเป็นกลางถูกใช้สำหรับการประมาณค่า MG.
ทดสอบ methylglyoxal ในปริมาณรวมของ 1 มิลลิลิตร 250 LL 7.2 มิลลิ 1,2-
diaminobenzene 100 LL ของ 5M กรดเปอร์คลอริกและ 650 LL ของเป็นกลาง
ใสถูกเพิ่มในลำดับที่ ค่าการดูดกลืนของ
derivatized MG อ่านเริ่มต้นได้ทันทีที่ช่วงคลื่นความถี่กว้าง
(200-500 นาโนเมตร) เป็นเวลา 15 รอบของช่วงเวลา 1 นาทีในแต่ละ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

มาตรฐานเส้นโค้งสำหรับเมทิล ไกลอ ซอล . ความเข้มข้นต่างกัน ( 10 , 25 , 50 ,และ 100 LM ) บริสุทธิ์มิลลิกรัม ( Sigma ) derivatized กับ 1,2-diaminobenzeneและค่าอนุพันธ์ซึ่งถูกอ่านโดย แครี่50 ความเห็น ไบโอ ยูวี ( เครื่อง ) หนึ่งมิลลิลิตรของทั้งหมดที่อยู่ : ปฏิกิริยาผสมของ 1,2-diaminobenzene 7.2 มม. 250 จะ100 จะ 5M เปอร์คลอริกแอซิด และ คู่ น้ำกลั่น ในการควบคุมมก. ไม่เพิ่มปฏิกิริยาผสมการเตรียมตัวอย่างสำหรับ mg ประมาณในพืช ประมาณ 0.3 กรัมเนื้อเยื่อสกัด 3 มล. ของ 0.5 เปอร์คลอริกแอซิด . หลังจากการแช่ 15 นาทีบนน้ำแข็ง ส่วนผสมที่ 11000g ระดับที่ 4 C นาน 10 นาที เป็นสีที่นำสารสกัดจากพืชที่ได้รับในที่ล้างสีโดยใส่ถ่าน ( 10 mg / ml ) เป็นเวลา 15 นาที ที่อุณหภูมิห้อง และระดับที่ 11000g เป็นเวลา 10 นาทีก่อนที่จะใช้นำนี้มก.ว่า มันเป็นธรรมชาติ โดยการรักษา 15 นาทีด้วยสารละลายอิ่มตัวของโพแทสเซียมคาร์บอเนตที่อุณหภูมิห้องและที่ระดับอีกครั้ง11000g นาน 10 นาที แล้วนำมาใช้สำหรับการประมาณค่ามิลลิกรัมเมทิล ไกลอ ซอล ตามลำดับ ในปริมาตร 1 มิลลิลิตร ราคา 1 , 2 จะ - 250 มม.diaminobenzene 100 จะเปอร์คลอริกแอซิดและ 5 , 650 จะของที่เป็นกลางนำที่ถูกเพิ่มในใบสั่งซื้อ มีการดูดกลืนแสงของderivatized มิลลิกรัมก็เริ่มอ่านทันทีในช่วงสเปกตรัม( 200 – 500 nm ) สำหรับ 15 รอบ 1 นาที ช่วงเวลาที่แต่ละ