2.3. Protein extraction and quantif

2.3. Protein extraction and quantification
The method was similar to that of Olley et al. (1996). Individual
petals and columns were separately ground in liquid nitrogen and
mixed with 5mL of buffer containing 50mmolL.1 Tris.HCl, pH 7.6,
2mmolL.1 disodium ethylenediamine tetraacetate, 2mmolL.1
dithiothreitol and 10mmolL.1 MgCl2, for 30 min at 25 .C. The
homogenates were centrifuged at 17,000~g for 20min at 4 .C. The
supernatant was retained and used as a source of soluble proteins.
Insoluble proteinswere extracted by resuspending the pellets
in 7mL of 0.1 mol L.1 NaOH and incubating at 80 .C overnight.
The protein contents were measured using the standard Bradford
method and bovine serum albumin.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.3. โปรตีนสกัดและนับวิธีของ Olley et al. (1996) ได้ แต่ละคนกลีบและคอลัมน์แยกต่างหากพื้นในไนโตรเจนเหลว และผสม ด้วย 5mL ของบัฟเฟอร์ที่ประกอบด้วย 50mmolL.1 Tris.HCl, pH 7.62mmolL.1 หัว ethylenediamine tetraacetate, 2mmolL.1dithiothreitol และ 10mmolL.1 MgCl2 ใน 30 นาทีที่ 25C. การhomogenates ถูก centrifuged ที่ 17,000 ~ g สำหรับ 20 นาทีที่ 4C. การsupernatant สะสม และใช้เป็นแหล่งของโปรตีนที่ละลายน้ำได้Proteinswere ละลายสกัด โดย resuspending อัดเม็ดใน 7mL ของ 0.1 โมล L.1 NaOH และ incubating ที่ 80C ค้างคืนเนื้อหาโปรตีนถูกวัดโดยใช้แบรดฟอร์ดมาตรฐานวิธีการและวัว albumin เซรั่ม

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3 การสกัดโปรตีนและปริมาณ
วิธีการก็คล้ายกับว่า Olley และคณะ (1996) บุคคล
กลีบและคอลัมน์ถูกแยกดินในไนโตรเจนเหลวและ
ผสมกับ 5 มลของบัฟเฟอร์ที่มี 50mmolL.1 Tris.HCl พีเอช 7.6,
2mmolL.1 disodium tetraacetate ethylenediamine, 2mmolL.1
dithiothreitol และ 10mmolL.1 MgCl2, 30 นาทีที่ 25 C.
homogenates ถูกหมุนเหวี่ยงที่ 17,000 ?? ~ กรัมสำหรับ 20 นาทีที่ 4 .C
ใสถูกเก็บรักษาไว้และใช้เป็นแหล่งของโปรตีนที่ละลายน้ำได้.
ละลาย proteinswere สกัดโดย resuspending เม็ด
ใน 7ml 0.1 mol L.1 NaOH และบ่มที่ 80 .C ค้างคืน.
โปรตีนถูกวัดโดยใช้ Bradford มาตรฐาน
วิธีการและซีรั่มวัว ธาตุโปรตีนชนิดหนึ่ง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3 การสกัดโปรตีน และปริมาณ
วิธีการคล้ายกับที่ของ olley et al . ( 1996 )
คอลัมน์แยกกลีบแต่ละและพื้นดินในไนโตรเจนเหลว และผสมกับ ก
กันชนที่มี 50mmoll 1 tris.hcl pH 7.6 ,
2mmoll 1 หรือ tetraacetate ลลีนไดแอม , และ 2mmoll 1
บัตรแข็ง 10mmoll . 1 ชุด สำหรับ 30 นาทีที่ 25 C .
homogenates เป็นระดับที่ 17000 ? ~ G สำหรับ 20 นาทีที่ 4 c .
ยังคงสูง และใช้เป็นแหล่งของโปรตีนที่ละลายน้ำที่สกัดจาก proteinswere .

ใน 7ml เจริญเม็ด NaOH 0.1 l.1 โดยการแช่อุณหภูมิ 80 C ค้างคืน
เนื้อหาโปรตีนถูกวัดโดยใช้มาตรฐานแบรดฟอร์ด
) และอัลบูมิน .