closely related enzymes is required

closely related enzymes is required. Amylosucrase, sucrose hydrolase
and sucrose phosphorylase are all members of the GH13 family,
for instance. The phosphorylase structure shows a slight
deviation in one active site loop and there are notably His234
and Leu341 in the active site, not Ile and Phe, as in the hydrolase
and trans-glycosylase structures (Fig. 18).137
As there is no phosphate bound in the phosphorylase structure,
it is not possible to say with confidence what the impact of these
alterations is, but it is likely that the histidine is important for
the coordination of the phosphate in the active site. Further crystallographic
analysis is required to understand phosphate localisation
and exclusion of H2O. In principle, mutagenesis and chimera
generation studies could be used to effect the interconversion of
hydrolases and phosphorylases. There are a-1,6-hydrolases in the
family GH13 and it might be possible to convert these enzymes
into phosphorylases, based on the strategies alluded to above.
There are, however, currently no characterised enzymes in this
family that act on substrates other than glucosides.
Trehalose phosphorylase and trehalose hydrolase are both
members of the GH65 family. The structure of the hydrolase is
not yet known; its comparison to the hydrolase structure may
highlight important structural features in this family. There are
no other reported hydrolases in this family, however, and so there
is only limited application of the principles elucidated for the
development of phosphorylases in this family.
Beyond GH13 and GH65, there are currently no other hydrolase
families that also contain phosphorylases, so the rules developed
from families GH13 and 65 would need to then be tested more
widely. It is likely that the exclusion of water is the most important
aspect when engineering these enzymes and the development of
glycosynthases provides useful insight and direction for this
work.138
In addition to comparison of glycoside hydrolases and phosphorylases,
one needs to take into account that the polymerising
a-1,4-glucan phosphorylases are actually found in a glycosyltransferase
family (GT35). As GT35 contains exclusively phosphorylases,
there is no clear framework for the development of novel activities

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

จำเป็นต้องใช้เอนไซม์ที่เกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิด Amylosucrase ซูโครส hydrolasephosphorylase ซูโครสมี สมาชิกทั้งหมดของครอบครัว GH13ตัวอย่างการ โครงสร้างของ phosphorylase แสดงเล็กน้อยความแตกต่างในการใช้งานไซต์หนึ่งวนรอบ และมียวด His234และ Leu341 ในการใช้งานเว็บไซต์ ไม่เมาและเพ ใน hydrolaseและทรานส์-glycosylase โครงสร้าง (Fig. 18) .137ที่มีฟอสเฟตไม่ถูกผูกไว้ในโครงสร้างของ phosphorylaseไม่สามารถพูด ด้วยความมั่นใจว่าผลกระทบเหล่านี้เปลี่ยนแปลงเป็น แต่ก็มีแนวโน้มว่า histidine สำคัญสำหรับประสานงานของฟอสเฟตในใช้ เพิ่มเติม crystallographicการวิเคราะห์จะต้องเข้าใจสังคมธุรกิจฟอสเฟตและแยกของ H2O ในหลัก mutagenesis และชิเมร่าศึกษาการสร้างสามารถใช้ลักษณะพิเศษ interconversion ของhydrolases และ phosphorylases มีการ-1,6-hydrolases ในการครอบครัว GH13 และอาจจะสามารถแปลงเอนไซม์เหล่านี้ใน phosphorylases ตามกลยุทธ์ที่ alluded ข้างบนมีอยู่ แต่ เอนไซม์ไม่ characterised นี้ครอบครัวที่กระทำบนพื้นผิวอื่น ๆ glucosidesTrehalose phosphorylase และ trehalose hydrolase มีทั้งสมาชิกในครอบครัว GH65 โครงสร้างของการ hydrolaseยังไม่ รู้จัก การเปรียบเทียบโครงสร้าง hydrolase อาจเน้นคุณลักษณะโครงสร้างที่สำคัญในตระกูลนี้ มีไม่อื่น ๆ รายงาน hydrolases ในครอบครัวนี้ อย่างไรก็ตาม และเพื่อให้มีเป็นเฉพาะจำกัดหลัก elucidated สำหรับการการพัฒนาของ phosphorylases ในตระกูลนี้นอกเหนือจาก GH13 และ GH65 มีกำลังไม่ hydrolaseครอบครัวที่ประกอบด้วย phosphorylases เพื่อพัฒนากฎจากครอบครัว GH13 และ 65 ต้องแล้ว ได้รับการทดสอบเพิ่มเติมแพร่หลาย เป็นไปได้ว่าแยกน้ำสำคัญสุดกว้างยาวเมื่อวิศวกรรมเอนไซม์เหล่านี้และการพัฒนาglycosynthases มีความเข้าใจถึงทิศทางนี้work.138นอกจากเปรียบเทียบ glycoside hydrolases และ phosphorylasesหนึ่งต้องเป็นบัญชีที่ที่ polymerisingphosphorylases a-1,4-glucan จะพบได้ใน glycosyltransferase ตัวจริงครอบครัว (GT35) เป็น GT35 ประกอบด้วยเฉพาะ phosphorylasesมีกรอบไม่ชัดเจนสำหรับการพัฒนาของนวนิยาย

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เอนไซม์ที่เกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิดจะต้อง Amylosucrase, hydrolase
ซูโครสและน้ำตาลซูโครสphosphorylase เป็นสมาชิกทุกคนในครอบครัว GH13,
ตัวอย่างเช่น โครงสร้าง phosphorylase
แสดงให้เห็นเล็กน้อยเบี่ยงเบนในวงใช้งานเว็บไซต์หนึ่งและมีสะดุดตาHis234
และ Leu341 ในการใช้งานเว็บไซต์ที่ไม่เพ Ile และเช่นเดียวกับใน hydrolase
และโครงสร้าง glycosylase ทรานส์ (รูปที่. 18) 0.137
ในขณะที่มีฟอสเฟตไม่มี ที่ถูกผูกไว้ในโครงสร้าง phosphorylase
ที่มันเป็นไปไม่ได้ที่จะพูดด้วยความมั่นใจว่าสิ่งที่ผลกระทบของเหล่านี้มีการปรับเปลี่ยนแต่ก็มีโอกาสที่ฮิสติดีนเป็นสิ่งที่สำคัญสำหรับการประสานงานของฟอสเฟตในเว็บไซต์ที่ใช้งานอยู่ crystallographic เพิ่มเติมการวิเคราะห์จะต้องเข้าใจการแปลฟอสเฟตและการยกเว้นของ H2O ในหลักการฉับและความฝันการศึกษารุ่นที่สามารถนำมาใช้เพื่อให้เกิดการ interconversion ของ hydrolases และ phosphorylases มี-1,6-hydrolases ในมีGH13 ครอบครัวและมันอาจจะเป็นไปได้ที่จะแปลงเอนไซม์เหล่านี้เข้าphosphorylases ขึ้นอยู่กับกลยุทธ์พาดพิงถึงข้างต้น. มี แต่ในปัจจุบันไม่มีเอนไซม์ที่โดดเด่นในครอบครัวที่ทำหน้าที่เกี่ยวกับพื้นผิวอื่นๆ กว่า glucosides. Trehalose phosphorylase และทรีฮาโล hydrolase มีทั้งสมาชิกในครอบครัวGH65 โครงสร้างของ hydrolase คือยังไม่ทราบ; เมื่อเทียบกับโครงสร้าง hydrolase อาจเน้นคุณสมบัติโครงสร้างที่สำคัญในครอบครัวนี้ มีไม่มี hydrolases รายงานอื่น ๆ ในครอบครัวนี้อย่างไรและเพื่อให้มีเพียงแอพลิเคชันที่จำกัด ของหลักการที่โฮล์มสำหรับการพัฒนาของphosphorylases ในครอบครัวนี้. นอกเหนือจาก GH13 และ GH65 ปัจจุบันมีไม่มี hydrolase อื่น ๆครอบครัวที่ยังมี phosphorylases ดังนั้น กฎระเบียบที่ได้รับการพัฒนามาจากครอบครัวGH13 และ 65 จะต้องได้รับการทดสอบแล้วมากขึ้นอย่างกว้างขวาง มันมีแนวโน้มว่าการยกเว้นของน้ำเป็นสิ่งสำคัญที่สุดด้านวิศวกรรมเมื่อเอนไซม์เหล่านี้และการพัฒนาของglycosynthases ให้ข้อมูลเชิงลึกที่มีประโยชน์และทิศทางนี้work.138 นอกจากการเปรียบเทียบ hydrolases glycoside และ phosphorylases, หนึ่งต้องคำนึงว่า polymerising phosphorylases A-1,4 กลูแคนที่พบจริงในการไกลโคซิครอบครัว(GT35) ในฐานะที่เป็น GT35 มีเฉพาะ phosphorylases, ไม่มีกรอบที่ชัดเจนสำหรับการพัฒนากิจกรรมนวนิยาย

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เอนไซม์ที่เกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิดเป็นสิ่งจำเป็น amylosucrase
ไฮโดรเลส , ซูโครสและซูโครสฟอ ฟรีเลสทั้งหมดเป็นสมาชิกของครอบครัว gh13
, สำหรับอินสแตนซ์ โครงสร้างฟอ ฟรีเลสแสดงให้เห็นส่วนเบี่ยงเบนเล็กน้อย
ในหนึ่งแอคทีฟไซต์วงและมีโดยและ his234
leu341 ในเว็บไซต์ใช้งานไม่ได้ด้วย และเพในไฮโดรเลส
และ trans ไกลโคไซเลสโครงสร้าง ( 18 รูป 137
)เนื่องจากไม่มีฟอสเฟตผูกพันในโครงสร้างฟอ ฟรีเลส
, มันเป็นไปไม่ได้ที่จะพูดด้วยความมั่นใจว่า ผลกระทบของการเปลี่ยนแปลงเหล่านี้
เป็น แต่มันเป็นโอกาสที่สำคัญสำหรับ
เมื่อการประสานงานของฟอสเฟตในไซต์งาน การวิเคราะห์ทาง

ต่อไปจะต้องเข้าใจท้องถิ่นฟอสเฟตและการยกเว้น h2o ในหลักการของคิเมร่า
และการศึกษารุ่นที่สามารถใช้เพื่อผลของไฮโดรเลส และ interconversion
phosphorylases . มี a-1,6-hydrolases ใน gh13
ครอบครัวและมันอาจเป็นไปได้ที่จะแปลงเหล่านี้เป็นเอนไซม์
phosphorylases ขึ้นอยู่กับกลยุทธ์ที่พูดถึงข้างต้น
มีอยู่ อย่างไรก็ตาม ในขณะนี้ไม่มีลักษณะเอนไซม์ในครอบครัว
ที่กระทำบนพื้นผิวอื่นนอกเหนือจากกลูโคไซด์ .
ฟอ ฟรีเลสและการการไฮโดรเลสทั้ง
สมาชิกของครอบครัว gh65 . โครงสร้างของไฮโดรเลสคือ
ไม่ทราบ การเปรียบเทียบกับโครงสร้างของไฮโดรเลสอาจ
เน้นมีโครงสร้างสำคัญในครอบครัว มีรายงานว่าในครอบครัว
ไม่มีไฮโดรเลสนี้ อย่างไรก็ตาม และดังนั้น นั่นเป็นเพียงการจำกัด

สำหรับหลักการนี้การพัฒนา phosphorylases ในครอบครัว gh13 gh65
เกินและมีขณะนี้ไม่มีไฮโดรเลส
ครอบครัวที่ยังมี phosphorylases ดังนั้นกฎการพัฒนา
จากครอบครัว gh13 65 จะต้องแล้วต้องทดสอบเพิ่มเติม
อย่างกว้างขวาง มันมีแนวโน้มว่า ยกเว้น น้ำเป็นสิ่งสำคัญที่สุดเมื่อเอนไซม์เหล่านี้
วิศวกรรมและการพัฒนา
glycosynthases ให้ลึกที่เป็นประโยชน์และทิศทางสำหรับงานนี้
. 138
นอกจากเปรียบเทียบไฮโดรเลส ไกลโคไซด์ และ phosphorylases
, หนึ่งต้องพิจารณาว่า polymerising
a-1,4-glucan phosphorylases จริงจะพบในครอบครัวเดกซ์
( gt35 ) เป็น gt35 มีเฉพาะ phosphorylases
, ไม่มีชัดเจน กรอบการพัฒนา
กิจกรรมใหม่