2. Materials and methods2.1. MeatLo

2. Materials and methods
2.1. Meat
Loins (M. longissimus lumborum) and topsides (M. semimembranosus)
were obtained from 12 steers (six steers with average weight 279.3 ±28.3 kg, prime beef grade and six steers with average weight 177.9 ±
10.1 kg, manufacturing beef grade loin and topsides, respectively) raised
on pasture and were slaughtered by the Alliance Group (Pukeuri plant,
Oamaru, New Zealand). The carcasses were electrically stimulated
[square mono wave, 80 V, 25 s, pulse width of 68 ms and at a pulse rate
per second of 15 pps]. Muscles were removed from carcasses at 4 h
post-mortem and processed within 2 h.
2.2. Antibodies
The cardiac troponin T antibody developed by Jim Jung-Ching Lin
was obtained from the Developmental Studies Hybridoma Bank
developed under the auspices of the NICHD and maintained by The
University of Iowa, Department of Biology, Iowa City, IA 52242. The
secondary antibody used was Pierce antibody (goat anti-mouse)
(product no. 31430), Thermo Scientific, Auckland, New Zealand.
2.3. PEF treatments and subsequent meat ageing
The PEF system (Elcrack-HPV5, DIL, Quakenbruck, Germany) was
used in batch mode, and the meat fibre direction was parallel to the
electrodes. An oscilloscope (Model UT2025C, Uni-Trend Group Ltd.,
Hong Kong, China) was used to monitor the pulse shape used (square
wave bipolar). The PEF system has the ability to deliver a wide range
of electrical inputs (voltage = 0–25 kV, frequency = 0–1000 Hz and
pulse width =4–32 μs). The samples had an average temperature of
24.8 ± 1.4 °C and 24.5 ± 1.0 °C for loins and topsides, respectively at
the time of treatment. Both muscles were cut into seven blocks of
13 × 8 × 5 cm (average weight of 354 ± 31 g and 369 ± 17 g for loins
and topsides, respectively). The blocks were randomly allocated to 3
levels of PEF treatment, at 10 kV and 90 Hz, repeats of 1×, 2× and 3×
and a non-treated control. PEF treatments were applied in batch mode
and the treatment time was 30 s. After treatment, the blocks were
then cut into 4 equal pieces that were weighed, vacuum packed (VP)
and randomly assigned to 4 different ageing storage times (3, 7, 14, or
21 days). Each sample was stored at 4 °C until the designated ageing
time was reached. Weight, temperature, pH and electrical conductivity
of each block were measured directly before and after treatment. The
blocks were sampled for biochemical analyses and for tenderness measurements.
The samples were frozen and maintained at −40 °C.
2.4. Measurements
2.4.1. Electrical input
The treatment electrical parameters (pulsed electric field strength,
pulse peak energy, pulse peak current, pulse peak power, pulse count,
resistance, energy, calculated field strength and calculated specific
energy) were obtained and recorded from the PEF instrument for each
treatment. The energy density was calculated as described by Zhang,
Barbosa-Canovas, and Swanson (1995) and O'Dowd, Arimi, Noci,
Cronin, and Lyng (2013) using the following equation;
Q ¼ V2t
Rv
Here Q is the energy density (kJ/kg), V is the voltage (Volts), t is the
treatment time (t = number of pulses × pulse duration in μS), R is the
resistance (Ohms), and v is the weight of the sample (g).
2.4.2. pH
The pH was measured using a puncture pH electrode InLab 427
(Mettler-Toledo Process Analytical Inc., Wilmington, MA) attached to
a Hanna HI 9025 (Hanna Instruments, Woonsocket, RI). The pH of
each block was measured directly before and after PEF treatment and
after storage at 4 °C for 3, 7, 14, and 21 days of treatment. The pHdifference fromthe initial pH before treatmentwas calculated at various
measurement points.
2.4.3. Temperature
The temperature of the centre of themeat blockwasmeasured using
a puncture pH electrode directly before and after PEF treatment.
Additionally the temperature was recorded at several locations (8
locations/block) using a hand held infrared thermometer, as a temperature
gradient was detected in some of the treatment combinations.
The average of the 8 measurements was used for further
analysis.
2.4.4. Electrical conductivity σ
The electrical conductivity (mS cm−1) of each block was measured
directly before and after PEF treatment and after VP storage at 4 °C
using a hand held electrical conductivity metre. Electrical conductivity
of the block differed between locations and was dependent on the
fibre direction in the meat block. Four fixed locations per block were
measured and averaged.
2.4.5. Purge loss percentage
Purge was measured after 3, 7, 14, and 21 days of VP storage at 4 °C.
On the designated storage time, sampleswere blotted dry using a paper
towel and weighed. Purge loss percentage was calculated using the following
formula:
Purge loss (%)=100 × (1−weight after storage / initialweight before
storage).
2.4.6. Cooking loss
The samples were thawed overnight at 4 °C, weighed and cooked
individually in plastic bags immersed in a water bath at 80 °C until
the internal temperature reached 75 °C as measured individually
using a temperature probe. Each sample was cooled immediately in
an ice bath, blotted dry with paper towels and weighed. The difference
in weight before and after cooking was used to calculate the cooking
loss using the formula below:
Cooking loss (%)=100 × (1−weight after cooking / weight before
cooking).
2.4.7. Shear force
Shear force was determined as described by Chrystall and Devine
(1991). The cooked meat sample was sliced along the muscle fibre
axis to produce 8 subsamples with a 1 × 1 cm cross section. Each subsamplewas
sheared using aMIRINZ tenderometerwith awedge shaped
tooth and the peak shear force value was obtained.
2.5. Myofibrillar protein extraction
Myofibrillar protein fractions were prepared according to the
procedure described by (Han, Morton, Bekhit, & Sedcole, 2009). A
1.00 ± 0.01 g sample was cut from each meat subsample and then cut
into small pieces. A 5 μl aliquot of a phenylmethanesulfonylfluoride
(PMSF) solution (17.42 mg of PMSF dissolved in 50 μl of ethanol and
then the volume was made to 1 ml with Milli-Q water) and 5 ml homogenisation
buffer (100 mM KCl, 2 mM MgCl2, 2 mM EGTA, 1 mM
NaN3, 20 mM Na2HPO4, 20 mM NaH2PO4, pH 6.8) were added to the
meat sample. The mixture was homogenised for 1 min to achieve fine
particles. The mixture was centrifuged (CPR centrifuge, Beckman
Coulter, Inc., California, USA) at 2800 × g at 4 °C for 10 min. A 5 μl aliquot
of a PMSF solution, 5 μl 1% Triton X-100, and 5 ml washing buffer
(100 mM NaCl, 5 mM NaN3) were centrifuged 3200 × g for 10 min at
4 °C. The resultant supernatant was discarded and 5 ml of an SDS sample
buffer composed of 8.2 ml Milli-Q water and 1.25 ml stacking Tris
buffer (0.5 M Tris–HCl, pH 6.8, containing 0.3 g SDS, and 0.5 ml
β-mercaptoethanol) was added. The sample was homogenised for
30 s, heated at 90 °C for 5 min, centrifuged at 3200 × g at 25 °C for

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการ2.1. เนื้อLoins (ม. longissimus lumborum) และ topsides (semimembranosus เมตร)ได้รับมาจากสำเร็จ 12 (สำเร็จ 6 มีค่าเฉลี่ยน้ำหนัก 279.3 ±28.3 กก. เนื้อเฉพาะเกรด และสำเร็จหก มีน้ำหนักเฉลี่ย 177.9 ±10.1 กก. ผลิตเนื้อเกรดหยิบและ topsides ตามลำดับ) ยกบนพาสเจอร์ และถูกฆ่า โดย กลุ่มพันธมิตร (โรงงาน Pukeuriโออามารุ นิวซีแลนด์) ซากที่ถูกกระตุ้นด้วยระบบไฟฟ้า[โมโนสแควร์เวฟ 80 V, s 25 ความกว้างของพัลส์ ของ 68 ms และอัตราชีพจรต่อวินาทีของ 15 pps] กล้ามเนื้อออกจากซากที่ 4 hลงพ้น และประมวลผลภายใน 2 h2.2 การแอนตี้แอนติบอดีหัวใจ troponin T โดยจิมหลินจุงชิงได้รับจาก ธนาคาร Hybridoma ศึกษาพัฒนาพัฒนาอุปถัมภ์การ NICHD และรักษาโดยการมหาวิทยาลัยไอโอวา ภาควิชาชีววิทยา รัฐไอโอวาซิตี้ IA 52242 ที่แอนติบอดีที่ใช้รองเป็นแอนติบอดีเพียร์ซ (แพะป้องกันเมาส์)สินค้าหมายเลข 31430), วิทยาศาสตร์เทอร์โม โอ๊คแลนด์ นิวซีแลนด์2.3. PEF รักษาและสูงอายุเนื้อตามมาระบบ PEF (Elcrack HPV5, DIL, Quakenbruck เยอรมนี)ใช้ในโหมดชุด และทิศทางของเส้นใยเนื้อถูกขนานไปหุงต มี oscilloscope (รุ่น UT2025C, Uni-แนวโน้มกลุ่ม จำกัดHong Kong จีน) ถูกใช้เพื่อตรวจสอบชีพจรร่างใช้ (สแควร์คลื่นไฟที่ไบโพลาร์) ระบบ PEF มีความสามารถในการนำเสนอหลากหลายของปัจจัยการผลิตไฟฟ้า (แรงดันไฟฟ้า = 0 – 25 kV ความถี่ = 0-1000 Hz และชีพจรความกว้าง = μs 4 – 32) ตัวอย่างที่มีอุณหภูมิเฉลี่ยของ24.8 ± 1.4 ° C และ 24.5 ± 1.0 ° C loins และ topsides ตามลำดับที่เวลาของการรักษา กล้ามเนื้อทั้งสองถูกตัดในช่วงเจ็ด13 × 8 × 5 ซม. (น้ำหนักเฉลี่ยของ± 354 31 g และ 369 ± 17 กรัมสำหรับ loinsและ topsides ตามลำดับ) บล็อกถูกจัดสรรให้ 3 แบบสุ่มระดับของการรักษา PEF, 10 kV และ 90 Hz ซ้ำ ของ 1 × 2 × 3 ×และตัวควบคุมที่ไม่ได้ถือว่า ใช้รักษา PEF ในโหมดชุดงานและเวลารักษา 30 s หลังการรักษา บล็อกได้แล้ว ตัดเป็น 4 ชิ้นเท่าที่ได้ชั่งน้ำหนัก เครื่องดูดฝุ่นบรรจุ (VP)ได้มอบหมายให้ 4 ครั้งเก็บริ้วรอยต่าง ๆ และ (3, 7, 14 หรือ21 วัน) แต่ละตัวอย่างถูกเก็บที่ 4 ° C จนถึงสูงอายุกำหนดถึงเวลา น้ำหนัก อุณหภูมิ pH และค่าการนำไฟฟ้าของแต่ละบล็อคที่วัดโดยตรงก่อน และ หลังการรักษา ที่บล็อกมีตัวอย่าง สำหรับวิเคราะห์เชิงชีวเคมี และ การวัดเจ็บตัวอย่างถูกแช่แข็ง และรักษาที่ −40 องศาเซลเซียส2.4 การวัด2.4.1 การไฟฟ้าเข้ารักษาพารามิเตอร์ไฟฟ้า (สนามไฟฟ้าพัลแรงพลังงานสูงสุดชีพจร ชีพจรสูงสุดปัจจุบัน พลังงานสูงสุดชีพจร การตรวจ นับชีพจรพลังงาน แรงฟิลด์คำนวณ และคำนวณเฉพาะพลังงาน) ได้รับ และบันทึกจากเครื่อง PEF สำหรับแต่ละรักษา คำนวณความหนาแน่นของพลังงานตามที่อธิบายไว้ โดยเตียวSwanson (1995) และ Barbosa-Canovas และ O'Dowd, Arimi, Nociครอเนิน และ Lyng (2013) โดยใช้สมการต่อไปนี้Q ¼ V2tRvนี่ Q คือ พลังงานความหนาแน่น (kJ/kg), V คือ แรงดันไฟฟ้า (โวลต์) t คือการรักษาเวลา (t =จำนวนพัลส์ในชีพจรระยะเวลา μS), R คือการความต้านทาน (โอห์ม), และ v คือ น้ำหนักของตัวอย่าง (กรัม)2.4.2. pHมีวัด pH ใช้การเจาะ pH อิเล็กโทรด InLab 427(กระบวนการ Inc. วิเคราะห์ของ mettler Toledo วิลมิ MA) กับฮันนาที่เป็น HI 9025 (Hanna เครื่อง Woonsocket, RI) PH ของแต่ละบล็อคที่ถูกวัดโดยตรงก่อน และ หลังการรักษา PEF และหลังจากเก็บที่ 4 ° C 3, 7, 14 และ 21 วันของการรักษา PHdifference จาก pH เริ่มต้นก่อน treatmentwas คำนวณต่าง ๆคะแนนประเมิน2.4.3. อุณหภูมิอุณหภูมิของของใช้ blockwasmeasured themeatการเจาะ pH อิเล็กโทรดโดยตรงก่อน และ หลังการรักษา PEFนอกจากนี้อุณหภูมิถูกบันทึกไว้ในหลายสถาน (8สถาน / บล็อก) ใช้มือถือเครื่องวัดอุณหภูมิอินฟราเรด เป็นไข้ตรวจพบการไล่ระดับสีในบางชุดการรักษาค่าเฉลี่ยของการประเมิน 8 ใช้สำหรับเพิ่มเติมวิเคราะห์2.4.4 การไฟฟ้านำσมีวัดค่าการนำไฟฟ้า (mS cm−1) ของแต่ละบล็อคโดยตรงก่อน และ หลังการรักษา PEF และ หลัง VP เก็บที่ 4 ° Cใช้มือถือเมตรค่าการนำไฟฟ้า ค่าการนำไฟฟ้าของบล็อกที่แตกต่างระหว่างตำแหน่ง และก็ขึ้นอยู่กับการทิศทางของเส้นใยในเนื้อ มีที่ตั้งถาวรที่ 4 ต่อบล็อกวัด และ averaged2.4.5. กำจัดสูญเสียเปอร์เซ็นต์การล้างข้อมูลที่วัดได้หลังจากวันที่ 3, 7, 14 และ 21 ของ VP เก็บที่ 4 องศาเซลเซียสเวลาเก็บต้อง sampleswere blotted แห้งโดยใช้กระดาษผ้าขนหนู และชั่งน้ำหนัก ล้างขาดทุนมีคำนวณเปอร์เซ็นต์ใช้ต่อไปนี้สูตร:ล้างขาดทุน (%) = 100 × (1−weight หลังจากที่จัดเก็บ / initialweight ก่อนเก็บ)2.4.6 การสูญเสียอาหารตัวอย่าง thawed ค้างคืนที่ 4 ° C น้ำหนัก และสุกในถุงพลาสติกที่แช่อยู่ในอ่างน้ำที่ 80 ° C จนถึงแยกอุณหภูมิภายในถึง 75 ° C วัดแต่ละใช้โพรบอุณหภูมิ แต่ละตัวอย่างระบายความร้อนด้วยทันทีในน้ำเป็นน้ำแข็ง blotted แห้ง ด้วยผ้าขนหนูกระดาษ และชั่งน้ำหนัก ความแตกต่างน้ำหนักก่อน และ หลังทำอาหารถูกใช้เพื่อคำนวณการปรุงอาหารขาดทุนโดยใช้สูตรต่อไปนี้:อาหารสูญเสีย (%) = 100 × (1−weight หลังจากทำอาหาร / น้ำหนักก่อนการปรุงอาหาร)2.4.7 การบังคับแรงเฉือนกำหนดแรงเฉือนตามที่อธิบายไว้ โดย Chrystall และ Devine(1991) ตัวอย่างเนื้อสัตว์สุกถูกหั่นตามเส้นใยกล้ามเนื้อแกนในการผลิต subsamples 8 กับ 1 × 1 ซ.ม.ข้ามส่วน Subsamplewas แต่ละตัดใช้ awedge tenderometerwith aMIRINZ รูปฟันและค่าแรงเฉือนสูงสุดที่รับ2.5. myofibrillar โปรตีนสกัดเศษโปรตีน myofibrillar ถูกจัดเตรียมตามขั้นตอนที่อธิบายไว้ โดย (ฮั่น มอร์ตัน Bekhit, & Sedcole, 2009) Aตัดจาก subsample แต่ละเนื้อแล้ว ตัดตัวอย่าง 1.00 ± 0.01 gเป็นชิ้นเล็ก ๆ ส่วนลงตัว 5 μl ของ phenylmethanesulfonylfluorideโซลูชัน (PMSF) (PMSF 17.42 มก.ละลายใน 50 μl ของเอทานอล และแล้วเสียงจะ ml 1 Q ที่น้ำ) และ 5 ml homogenisationบัฟเฟอร์ (100 mM KCl, MgCl2, EGTA, 2 มม. 2 มม.มม. 1NaN3, Na2HPO4, NaH2PO4, 20 มม. 20 มม. pH 6.8) ถูกเพิ่มไปเนื้อตัวอย่าง ส่วนผสมคือ homogenised ใน 1 นาทีให้ปรับอนุภาค ส่วนผสมถูก centrifuged (CPR เครื่องหมุนเหวี่ยง BeckmanCoulter, Inc. แคลิฟอร์เนีย สหรัฐอเมริกา) ที่ 2800 × g ที่ 4 ° C สำหรับ 10 นาที ส่วนลงตัว 5 μlของโซลูชัน PMSF, 5 μl 1% ไตรตั้น X 100 และ 5 ml ล้างบัฟเฟอร์(100 mM NaCl, 5 mM NaN3) ถูก centrifuged 3200 × g สำหรับ 10 นาทีที่4 องศาเซลเซียส Supernatant ผลแก่ได้ถูกละทิ้ง และ 5 ml ขององค์กรอย่างมีบัฟเฟอร์ประกอบด้วยน้ำ 8.2 ml Q และ 1.25 ml ซ้อนทริสเรทติ้งบัฟเฟอร์ (0.5 M ตรี – HCl, pH 6.8, SDS 0.3 g และ 0.5 mlมีเพิ่มβ-mercaptoethanol) ตัวอย่างที่ homogenised สำหรับ30 s ความร้อนที่ 90 ° C สำหรับ 5 นาที centrifuged ที่ 3200 × g ที่ 25 ° C สำหรับ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ
2.1 เนื้อสัตว์
Loins (เอ็ม longissimus lumborum) และอุดรอยรั่ว (เอ็ม semimembranosus)
ที่ได้รับจาก 12 นำพา (หกนำพาที่มีน้ำหนักเฉลี่ย 279.3 ± 28.3 กก. เกรดเนื้อนายกรัฐมนตรีและหกนำพาที่มีน้ำหนักเฉลี่ย 177.9 ±
10.1 กิโลกรัมการผลิตเนื้อซี่โครงเนื้อวัวและเกรด อุดรอยรั่วตามลำดับ)
ยกขึ้นบนทุ่งหญ้าและถูกฆ่าโดยกลุ่มพันธมิตร(Pukeuri พืช
Oamaru, นิวซีแลนด์) ซากที่ถูกกระตุ้นด้วยไฟฟ้า
[ตารางคลื่นโมโน 80 V, 25 วินาที, ความกว้างของคลื่น 68 ms
และในอัตราชีพจรต่อวินาที15 PPS] กล้ามเนื้อออกจากซากที่ 4
ชั่วโมงชันสูตรศพและประมวลผลภายใน2 ชม.
2.2 แอนติบอดีนิหัวใจแอนติบอดี T พัฒนาโดยจิมจุงชิงหลินที่ได้รับจากการศึกษาพัฒนาการไฮบริธนาคารพัฒนาภายใต้การอุปถัมภ์ของNICHD และการบำรุงรักษาโดยมหาวิทยาลัยไอโอวา, ภาควิชาชีววิทยาไอโอวาซิตี, ไอโอวา 52242. รองแอนติบอดีที่ใช้ เป็นแอนติบอดี้เพียร์ซ (แพะต่อต้านเมาส์) (ไม่มีสินค้า. 31430) เทอร์โมวิทยาศาสตร์โอ๊คแลนด์นิวซีแลนด์. 2.3 การรักษา PEF และเนื้อสัตว์ที่ตามมาริ้วรอยระบบPEF (Elcrack-HPV5, DIL, Quakenbruck, เยอรมนี) ถูกนำมาใช้ในโหมดแบทช์, และทิศทางเส้นใยเนื้อสัตว์ที่ถูกขนานไปกับขั้วไฟฟ้า สโคป (รุ่น UT2025C, Uni-Trend กรุ๊ป จำกัด , ฮ่องกง, จีน) ถูกนำมาใช้ในการตรวจสอบรูปร่างพัลส์ที่ใช้ (ตารางคลื่นสองขั้ว) ระบบ PEF มีความสามารถในการส่งมอบความหลากหลายของปัจจัยการผลิตไฟฟ้า(แรงดัน = 0-25 กิโลโวลต์ความถี่ = 0-1000 เฮิร์ตซ์และความกว้างของคลื่น= 4-32 ไมโครวินาที) กลุ่มตัวอย่างที่มีอุณหภูมิเฉลี่ย24.8 ± 1.4 องศาเซลเซียสและ 24.5 ± 1.0 ° C เป็นเวลาเอวและอุดรอยรั่วตามลำดับในช่วงเวลาของการรักษา กล้ามเนื้อทั้งสองถูกตัดออกเป็นเจ็ดกลุ่มของ13 × 8 × 5 ซม. (น้ำหนักเฉลี่ย 354 ± 31 กรัมและ 369 ± 17 กรัมสำหรับเอวและอุดรอยรั่วตามลำดับ) บล็อกถูกจัดสรรโดยการสุ่ม 3 ระดับของการรักษา PEF ที่ 10 กิโลโวลต์ 90 เฮิร์ตซ์, ซ้ำ 1 × 2 × 3 ×และและการควบคุมที่ไม่ได้รับการรักษา การรักษา PEF ถูกนำไปใช้ในโหมดแบทช์และเวลาในการรักษาเป็นเวลา30 วินาที หลังจากการรักษาที่ถูกบล็อกแล้วตัดเป็น 4 ชิ้นเท่ากับที่ได้รับการชั่งน้ำหนักบรรจุสูญญากาศ (ประธาน) และสุ่มให้ได้ 4 ครั้งการเก็บรักษาริ้วรอยที่แตกต่างกัน (3, 7, 14, หรือ21 วัน) ตัวอย่างแต่ละคนได้รับการจัดเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียสจนกระทั่งอายุกำหนดเวลาก็มาถึง น้ำหนักอุณหภูมิความเป็นกรดด่างและการนำไฟฟ้าของแต่ละบล็อกวัดโดยตรงก่อนและหลังการรักษา บล็อกเก็บตัวอย่างสำหรับการวิเคราะห์ทางชีวเคมีและสำหรับการตรวจวัดความอ่อนโยน. กลุ่มตัวอย่างที่ถูกแช่แข็งและการบำรุงรักษาที่ -40 ° C. 2.4 วัด2.4.1 การป้อนไฟฟ้าการรักษาค่าไฟฟ้า (ความแรงของสนามไฟฟ้าชีพจร, พลังงานสูงสุดชีพจรสูงสุดชีพจรปัจจุบันอำนาจสูงสุดชีพจรนับชีพจรต้านทานพลังงานความแรงของสนามการคำนวณและคำนวณเฉพาะพลังงาน) ที่ได้รับและบันทึกเสียงจากเครื่องดนตรี PEF สำหรับแต่ละการรักษา. ความหนาแน่นของพลังงานที่คำนวณได้ตามที่อธิบายไว้โดยจางBarbosa-Canovas และสเวนสัน (1995) และ O'Dowd, Arimi, Noci, โครนินและ Lyng (2013) โดยใช้สมการดังต่อไปนี้Q ¼ V2t Rv นี่ Q คือความหนาแน่นพลังงาน (กิโลจูล / กิโลกรัม) V คือแรงดันไฟฟ้า (โวลต์), เสื้อเป็นเวลาในการรักษา(t = จำนวนของพัลส์×ระยะเวลาชีพจรในไมโครวินาที) R คือความต้านทาน(โอห์ม) และโวลต์เป็นน้ำหนักของตัวอย่าง (ช ). 2.4.2 ค่า pH ค่า pH ได้รับการวัดโดยใช้อิเล็กโทรด pH เจาะ InLab 427 (Mettler-Toledo กระบวนการวิเคราะห์อิงค์วิลมิง MA) ที่แนบมากับฮันนาHI 9025 (ฮันนาเครื่องดนตรี, Woonsocket, RI) พีเอชของแต่ละบล็อกวัดโดยตรงก่อนและหลังการรักษา PEF และหลังการเก็บรักษาที่อุณหภูมิ4 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 3, 7, 14, และ 21 วันของการรักษา pHdifference fromthe pH เริ่มต้นก่อนที่จะ treatmentwas คำนวณต่างๆที่จุดตรวจวัด. 2.4.3 อุณหภูมิอุณหภูมิของศูนย์กลางของ themeat blockwasmeasured ใช้ไฟฟ้าค่าpH เจาะโดยตรงก่อนและหลังการรักษา PEF. นอกจากนี้อุณหภูมิที่ถูกบันทึกไว้ในหลายสถานที่ (8 สถานที่ / บล็อก) โดยใช้มือถือเครื่องวัดอุณหภูมิอินฟราเรดเป็นอุณหภูมิลาดถูกตรวจพบในบางส่วนการรวมกันของการรักษา. ค่าเฉลี่ยของ 8 การวัดที่ใช้สำหรับการต่อไปการวิเคราะห์. 2.4.4 การนำไฟฟ้าσการนำไฟฟ้า (MS-1 ซม.) ของแต่ละบล็อกวัดโดยตรงก่อนและหลังการรักษาPEF และหลังการจัดเก็บ VP ที่ 4 องศาเซลเซียสโดยใช้มือจัดเมตรการนำไฟฟ้า การนำไฟฟ้าของบล็อกแตกต่างกันระหว่างสถานที่และก็ขึ้นอยู่กับทิศทางในการป้องกันเส้นใยเนื้อ สี่สถานที่คงที่ต่อบล็อกถูกวัดและเฉลี่ย. 2.4.5 ล้างเปอร์เซ็นต์การสูญเสียล้างวัดหลังจากที่ 3, 7, 14, และ 21 วันของการจัดเก็บ VP ที่ 4 ° C. ในเวลาการเก็บรักษาที่กำหนด sampleswere เปื้อนแห้งโดยใช้กระดาษผ้าขนหนูและชั่งน้ำหนัก เปอร์เซ็นต์การสูญเสียความสะอาดที่คำนวณได้ดังต่อไปนี้โดยใช้สูตรการสูญเสียความสะอาด(%) = 100 × (1 น้ำหนักหลังการเก็บรักษา / initialweight ก่อน. การเก็บรักษา) 2.4.6 การทำอาหารการสูญเสียตัวอย่างถูกละลายในชั่วข้ามคืนที่ 4 ° C ชั่งน้ำหนักและปรุงสุกเป็นรายบุคคลในถุงพลาสติกแช่ในอ่างน้ำที่80 องศาเซลเซียสจนกระทั่งอุณหภูมิภายในถึง75 ° C ที่วัดรายบุคคลโดยใช้หัววัดอุณหภูมิ ตัวอย่างแต่ละคนได้รับการระบายความร้อนได้ทันทีในห้องอาบน้ำน้ำแข็งเปื้อนให้แห้งด้วยผ้าขนหนูกระดาษและชั่งน้ำหนัก ความแตกต่างของน้ำหนักก่อนและหลังการทำอาหารถูกนำมาใช้ในการคำนวณการปรุงอาหารการสูญเสียโดยใช้สูตรต่อไปนี้การสูญเสียการทำอาหาร(%) = 100 × (1-น้ำหนักหลังจากทำอาหาร / น้ำหนักก่อน. การปรุงอาหาร) 2.4.7 แรงเฉือนแรงเฉือนถูกกำหนดตามที่อธิบาย Chrystall และเดไวน์ (1991) ตัวอย่างเนื้อสุกได้พร้อมหั่นเส้นใยกล้ามเนื้อแกนในการผลิต 8 subsamples กับ 1 × 1 ซมตัดขวาง subsamplewas แต่ละตัดใช้aMIRINZ tenderometerwith awedge รูปฟันและค่าแรงเฉือนสูงสุดที่ได้รับ. 2.5 การสกัดโปรตีนกล้ามเนื้อกล้ามเนื้อเศษโปรตีนที่ได้จัดทำตามขั้นตอนที่อธิบายมาจาก(ฮันมอร์ตัน Bekhit และ Sedcole 2009) 1.00 ± 0.01 กรัมตัวอย่างถูกตัดออกจาก subsample แต่ละเนื้อแล้วตัดเป็นชิ้นเล็กๆ หาร 5 ไมโครลิตรของ phenylmethanesulfonylfluoride (PMSF) วิธีการแก้ปัญหา (17.42 มิลลิกรัม PMSF ละลายใน 50 ไมโครลิตรของเอทานอลแล้วปริมาณที่ถูกสร้างขึ้นเป็น1 มล. ด้วยน้ำ Milli-Q) และ 5 homogenisation มลบัฟเฟอร์(100 มิลลิ KCl 2 มิลลิ MgCl2 2 มิลลิ EGTA 1 มิลลิNaN3 20 มิลลิ Na2HPO4 20 มิลลิ NaH2PO4 ค่า pH 6.8) ถูกเพิ่มเข้าไปในตัวอย่างเนื้อสัตว์ ส่วนผสมที่ถูก homogenised เวลา 1 นาทีเพื่อให้บรรลุปรับอนุภาค ส่วนผสมที่ถูกหมุนเหวี่ยง (centrifuge ทำ CPR Beckman Coulter, Inc, California, USA) ที่ 2800 ×กรัมที่ 4 ° C เป็นเวลา 10 นาที หาร 5 ไมโครลิตรของการแก้ปัญหาPMSF, 5 ไมโครลิตร 1% Triton X-100 และ 5 มล. บัฟเฟอร์ซักผ้า(100 มิลลิโซเดียมคลอไรด์ 5 มิลลิ NaN3) ได้รับการหมุนเหวี่ยง 3200 ×กรัมเป็นเวลา 10 นาทีที่4 ° C สารละลายผลลัพธ์ที่ถูกทิ้งและ 5 มิลลิลิตรตัวอย่าง SDS บัฟเฟอร์ประกอบด้วย 8.2 มล. น้ำ Milli-Q และ 1.25 มล. สุมทริบัฟเฟอร์(0.5 M Tris-HCl, pH 6.8 ที่มี 0.3 กรัม SDS และ 0.5 มล. β-mercaptoethanol) เป็น ที่เพิ่ม กลุ่มตัวอย่างที่ได้รับการ homogenised สำหรับ30 วินาที, ความร้อนที่ 90 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาที, หมุนเหวี่ยงที่ 3200 ×กรัมที่อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียสเป็นเวลา

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ
2.1 . เอวเนื้อ
( M . โค lumborum ) และ topsides ( ม. เซมิเมมเบรโนซัส )
ได้จาก 12 ชนิด ( 6 ชนิดที่มีน้ำหนักเฉลี่ย 279.3 ± 28.3 กก. เกรดเนื้อโคขุนกับนายกรัฐมนตรีและหกน้ำหนักเฉลี่ย 177.9 ±
10.1 กิโลกรัม และผลิตเนื้อสันเกรด topsides ตามลำดับ ) ขึ้น
บนทุ่งหญ้าและถูกฆ่าโดย กลุ่มพันธมิตร ( pukeuri โอ
, พืชนิวซีแลนด์ ) ซากถูกไฟฟ้ากระตุ้น
[ Square โมโนคลื่น 80 V , 25 , ชีพจรความกว้าง 68 MS และที่อัตราการเต้นของชีพจร
ต่อวินาที 15 PPS ] กล้ามเนื้อถูกถอดออกจากซากที่ 4 H
ชันสูตรศพและประมวลผลภายใน 2 H .
2 . แอนติบอดี
Cardiac troponin T ) ที่พัฒนาโดยจิมจองชิงหลิน
ได้จากพัฒนาการศึกษา hybridoma ธนาคาร
การพัฒนาภายใต้การอุปถัมภ์ของ nichd และดูแลโดย
มหาวิทยาลัยไอโอวา , ภาควิชาชีววิทยา , ไอโอวาซิตี , ไอโอวา 52242 .
รองแอนติบอดีที่ใช้มีแทง แอนติบอดี ( แพะป้องกันเมาส์ )
( หมายเลขผลิตภัณฑ์ 31430 ) , เทอร์โมวิทยาศาสตร์ , โอ๊คแลนด์ นิวซีแลนด์
2.3 การรักษาริ้วรอย
PEF และต่อมาเนื้อระบบ PEF ( elcrack-hpv5 Dil เคนบรุ๊ค , เยอรมัน , ,
) ถูกใช้ในโหมดแบทช์ ,และเนื้อเส้นใยทิศทางขนานกับ
ขั้วไฟฟ้า ออสซิลโลสโคป ( แบบ ut2025c , ยูนิเทรนด์ กรุ๊ป จํากัด
ฮ่องกง จีน ) คือใช้ในการตรวจสอบรูปแบบพัลส์ที่ใช้ ( ตาราง
คลื่น Bipolar ) ระบบ PEF มีความสามารถในการส่งมอบที่หลากหลายของกระผม
ไฟฟ้า ( แรงดัน = 0 – 25 กิโลโวลต์ ความถี่ = 0 – 1000 Hz และชีพจรความกว้าง =
4 – 32 μ s ) ตัวอย่างมีอุณหภูมิเฉลี่ย
2 ± 14 ° C และมี± 1.0 องศา C และเอว topsides ตามลำดับที่
เวลาของการรักษา ทั้งกล้ามเนื้อที่ถูกตัดเป็นเจ็ดบล็อก
13 × 8 × 5 ซม. ( น้ำหนักเฉลี่ย 354 ± 31 กรัม และ นาย± 17 กรัมและเอว
topsides ตามลำดับ ) บล็อกสุ่ม 3
ระดับของ PEF รักษา 10 kV และ 90 Hz ซ้ำ 1 × 2 × 3 ×
และไม่ถือว่าควบคุมได้การใช้ PEF ในโหมดแบทช์และการรักษา
เวลา 30 วินาทีหลังจากการรักษาบล็อก
แล้วหั่นเป็น 4 ชิ้น เท่ากับ ที่ชั่งน้ำหนัก สุญญากาศ ( VP )
) และแบบสุ่มที่แตกต่างกัน 4 ริ้วรอยกระเป๋าครั้ง ( 3 , 7 , 14 , หรือ
21 วัน ) แต่ละตัวอย่างถูกเก็บรักษาที่อุณหภูมิ 4 องศา C จนถึงเขตผู้สูงอายุ
เวลาถึง น้ำหนัก อุณหภูมิ ความเป็นกรดเป็นด่าง ค่าการนำไฟฟ้า
ของแต่ละบล็อกจะถูกวัดโดยตรงก่อนและหลังการรักษา
บล็อก โดยการวิเคราะห์ทางชีวเคมีและการวัดความนุ่ม .
ตัวอย่างถูกแช่แข็งไว้ที่− 40 ° C และ
2.4 . เครื่องมือกำจัดเพื่อย้ายวัด
. ไฟฟ้านำเข้า
รักษาไฟฟ้าพารามิเตอร์ ( พัลส์สนามไฟฟ้าแรง
ชีพจรสูงสุดพลังงานชีพจรสูงสุดในปัจจุบัน ชีพจรสูงสุดพลังงานชีพจรนับ
ต้านทาน , พลังงาน ,การคำนวณสนามไฟฟ้าและคำนวณพลังงานที่เฉพาะเจาะจง
) ที่ได้รับและบันทึกจากอุปกรณ์ PEF เพื่อการรักษาแต่ละครั้ง

ความหนาแน่นพลังงานคำนวณตามที่อธิบายไว้โดย Zhang ,
บาโบซ่า canovas และ Swanson ( 1995 ) และ o'dowd ริมิโนซี
โครนิน , , , , และลิง ( 2013 ) โดยใช้สมการต่อไปนี้ ;
Q
Q
¼ v2t RV ที่นี่มีความหนาแน่นพลังงาน ( kJ / kg ) , V คือแรงดันไฟฟ้า ( โวลต์ )
T คือเวลาการรักษา ( t = จำนวนพัลส์×ชีพจร ระยะเวลาในμ s ) R
ความต้านทาน ( โอห์ม ) และ V คือน้ำหนักของตัวอย่าง ( G )
2.4.2 . พีเอช pH
การวัด pH electrode เจาะ inlab 427
( เมทเลอร์ โทเลโดการวิเคราะห์กระบวนการอิงค์ , Wilmington , MA ) แนบ : ฮันนาสวัสดี 9025 ( ฮันนาเครื่องมือ Woonsocket , รี ) pH ของ
แต่ละบล็อกจะถูกวัดโดยตรงก่อนและหลังการรักษา PEF และ
เมื่อเก็บที่ 4 ° C เป็นเวลา 3 , 7 , 14 และ 21 วันของการรักษา การ phdifference จาก pH เริ่มต้นก่อน treatmentwas คำนวณที่จุดวัดต่าง ๆ
.
2.4.3 . อุณหภูมิ
อุณหภูมิของศูนย์ themeat blockwasmeasured โดยใช้ pH electrode
เจาะโดยตรงก่อนและหลังการรักษา
PEF .นอกจากนี้อุณหภูมิที่ถูกบันทึกไว้หลายตำแหน่ง ( 8
สถานที่ / บล็อก ) ใช้มือถือเครื่องวัดอุณหภูมิ , อุณหภูมิ
ไล่ระดับที่ตรวจพบในบางส่วนของการรักษารวม
เฉลี่ย 8 การวัดวิเคราะห์ต่อไป
.
2.4.4 . การนำไฟฟ้าσ
ค่าการนำไฟฟ้า ( MS cm − 1 ) ของแต่ละบล็อกวัด
โดยตรงก่อนและหลังการรักษา และหลังจากรับกระเป๋าที่ PEF 4 ° C
ใช้มือถือค่าการนำไฟฟ้าเมตร การนำไฟฟ้า
ของบล็อกที่แตกต่างกันระหว่างสถานที่และขึ้นอยู่กับ
เส้นใยทิศทางในเนื้อบล็อก สี่สถานที่ถาวรต่อบล็อกได้

และวัดเฉลี่ย 2.4.5 . กำจัดการสูญเสียร้อยละ
ล้างวัดหลังที่ 3 , 7 , 14 และ 21 วันของ VP เก็บที่ 4 องศา
ในเขตกระเป๋าเวลาคนเปื้อนแห้งใช้กระดาษ
ผ้าขนหนูและชั่งน้ำหนัก ชำระค่าการสูญเสียที่คำนวณโดยใช้สูตรดังต่อไปนี้
:
ล้างขาดทุน ( % ) = 100 × 1 −น้ำหนักหลังกระเป๋า / initialweight ก่อน

กระเป๋า ) 2.4.6 . อาหารการสูญเสีย
จำนวนละลายค้างคืนที่ 4 ° C , ชั่งน้ำหนักและสุก
แยกในถุงพลาสติกแช่ในอ่างน้ำที่ 80 ° C จนกระทั่ง
อุณหภูมิภายในถึง 75 องศา C ซึ่งเป็นอุณหภูมิที่ใช้โพรบแบบ
. แต่ละตัวอย่างถูกระบายความร้อนด้วยน้ำแข็งทันที
อาบเปื้อนแห้งด้วยผ้าขนหนูกระดาษและชั่งน้ำหนัก ความแตกต่างในน้ำหนัก
ก่อนและหลังการปรุงอาหารที่ใช้เพื่อคำนวณการปรุงอาหาร
การสูญเสียโดยใช้สูตรด้านล่าง :
การสูญเสียอาหาร ( % ) = 100 × 1 −น้ำหนักหลังจากการปรุงอาหาร / อาหารน้ำหนักก่อน
.
2.4.7 . แรงเฉือน
แรงเฉือนได้ถูกกำหนดและตามที่อธิบายไว้โดย chrystall Devine
( 1991 ) เนื้อสุกอย่างถูกหั่นบาง ๆตามแนวกล้ามเนื้อแกนเพื่อผลิตเส้นใย
8 subsamples กับ 1 × 1 ซม. ข้ามส่วน แต่ละ subsamplewas
ตัดใช้ amirinz tenderometerwith รูป
awedge ฟันและยอดค่าแรงเฉือนได้ .
2.5
การสกัดโปรตีนลดลงโดยโปรตีนเศษส่วนเตรียมตามขั้นตอนที่อธิบายโดย
( ฮัน มอร์ตัน bekhit & sedcole , 2009 ) a
1.00 ± 0.01 กรัมตัวอย่างตัดจากเนื้อแต่ละ subsample
แล้วตัดเป็นชิ้นเล็กๆ 5 μ L ส่วนลงตัวของ phenylmethanesulfonylfluoride
( PMSF ) สารละลาย ( 17.42 mg ของ PMSF ที่ละลายในเอทานอลและ
μ 50 ล.แล้วระดับเสียงได้ 1 มิลลิลิตร กับน้ำ ) และ 5 milli-q บัฟเฟอร์โฮโมจีไนเซชั่น
ml ( 100 mM KCl ชุด 2 มม. หน่วย , 2 มม. 1 mm
nan3 na2hpo4 nah2po4 20 มม. , 20 มม. พีเอช 6.8 ) ถูกเพิ่มไปยัง
อาหารตัวอย่าง ส่วนผสม homogenised 1 นาทีเพื่อให้ได้อนุภาค

ส่วนผสมคือระดับ ( CPR centrifuge , Beckman Coulter
, Inc , California , USA ) ที่ 2800 × g 4 ° C 10 นาที 5 μส่วนลงตัว
lของโซลูชั่น PMSF 5 μ L 1% Triton X-100 และ 5 ml ล้างบัฟเฟอร์
( NaCl 100 มม. 5 มม. nan3 ) ระดับ 3200 × G สำหรับ 10 นาทีที่ 4 ° C
สูงซึ่งถูกทิ้งและ 5 ml ของ SDS ตัวอย่าง
บัฟเฟอร์ที่ประกอบด้วยน้ำและ 1.25 มล. milli-q 8.2 กรัม ซ้อนโดย
บัฟเฟอร์ ( 0.5 m ทริส– HCl , พีเอช 6.8 ที่มี 0.3 กรัม SDS และ 0.5 ml
บีตา - mercaptoethanol ) ถูกเพิ่มเข้ามา จำนวน homogenised สำหรับ
30 วินาที , อุณหภูมิ 90 องศา C เป็นเวลา 5 นาที ระดับที่ 3 , 200 กรัม ที่อุณหภูมิ 25 ° C ×