Antioxidant Activity of Developed Mono
and Polyherbal Formulations
Ten tablets of individual and combination
formulations were taken and powdered
separately in pestle and mortar. The individual
powder was dissolved in small quantity of
methanol in 100 ml volumetric flask and made
up the volume. The sample was filtered through
one micron filter paper and the filtrate was
subjected for following antioxidant assays viz.
DPPH free radical scavenging, super oxide
radical scavenging, Nitric oxide radical
scavenging, ABTS radical scavenging assay.
DPPH radical scavenging assay
DPPH [1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl] is
a stable free radical with purple color, the
intensity of which is measured at 510 nm
spectrophotometrically. Antioxidants reduces
DPPH to 1,1-diphenyl-2-picryl hydrazine, a
colorless compound.
Reagents / chemicals used
DPPH (2,2-diphenyl-1-picryl hydrazyl)
[RM 2798, Himedia, India], Methanol (HPLC
grade) [43602, Qualigens], Positive control
(Gallic acid) [G7384, Sigma, USA].
Procedure
Various concentrations (200 μl) of test
solution and 50 μl of DPPH (0.659 mM)
solution are incubated at 25°C for 20 min.
Following which the absorbance is read at 510
nm. A control reaction was carried out without
the test sample. Linear graph of concentration
vs percentage inhibition was prepared and IC50 values were calculated. The % inhibition was
calculated according to the following equation
% Inhibition = (A0-At) / A0 x 100
Where A0 was the absorbance of the
control (blank, without extract) and At was the
absorbance in the presence of the extract.
Superoxide radical scavenging activity
(PMS-NADH System)
Superoxide anions were generated using
PMS / NADH system. The superoxide anions
are subsequently made to reduce nitroblue
tetrazolium which yields a chromogenic
product, which is measured at 560 nm.
Reagents/chemicals used
Reduced nicotinamide adenine
dinucleotide Sodium salt (NADH) [RM
393Himedia, India], Phenazine methosulphate
(PMS) [5165, Loba Chemie, India], Nitroblue
tetrazolium (NBT) [94060, S.d. fine Chemicals,
India], Positive control: Gallic acid G7384,
[Sigma, USA].
Procedure
Test solution (0.1 mL) in 0.1M phosphate
buffer pH 7.4, 62.5 μl of 468 μM NADH
solution, 62.5 μl of 150 μM NBT solution and
62.5 μl of 60 μM PMS solution were added to
a microwell plate and incubated at room
temperature for 5 min. The absorbance was
read at 560 nm. Linear graph of concentration
vs percentage inhibition was prepared and IC50 values were calculated.
Nitric oxide radical scavenging assay
Sodium nitroprusside in aqueous solution
at physiological pH spontaneously generates
nitric oxide which interacts with oxygen to produce
nitrite ions, which can be measured at
546 nm spectrophtometrically in the presence
of Griess reagent.
Reagents/chemicals used
Sodium nitroprusside [40190, S.d.fine
Chemicals, India], Sulphanilamide [3164, NR
Chem., India], Orthophosphoric acid [39416,
S.d.fine Chemicals, India], N-(1-naphthyl)
ethylenediamine [N5889, Sigma, USA],
Positive control: Curcuminoids ( 33533,
Synthite, Kochin, India).
Procedure
Test solution of various concentrations
(50 μl) and 50 μl of 10 mM sodium
nitroprusside are illuminated (using
fluorescence light/18W CDL 6500K) at room
temperature (25-30°C) for 15 min. Following
Antioxidant Activity of Developed Monoand Polyherbal FormulationsTen tablets of individual and combinationformulations were taken and powderedseparately in pestle and mortar. The individualpowder was dissolved in small quantity ofmethanol in 100 ml volumetric flask and madeup the volume. The sample was filtered throughone micron filter paper and the filtrate wassubjected for following antioxidant assays viz.DPPH free radical scavenging, super oxideradical scavenging, Nitric oxide radicalscavenging, ABTS radical scavenging assay.DPPH radical scavenging assayDPPH [1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl] isa stable free radical with purple color, theintensity of which is measured at 510 nmspectrophotometrically. Antioxidants reducesDPPH to 1,1-diphenyl-2-picryl hydrazine, acolorless compound.Reagents / chemicals usedDPPH (2,2-diphenyl-1-picryl hydrazyl)[RM 2798, Himedia, India], Methanol (HPLCgrade) [43602, Qualigens], Positive control(Gallic acid) [G7384, Sigma, USA].ProcedureVarious concentrations (200 μl) of testsolution and 50 μl of DPPH (0.659 mM)solution are incubated at 25°C for 20 min.Following which the absorbance is read at 510nm. A control reaction was carried out withoutthe test sample. Linear graph of concentrationvs percentage inhibition was prepared and IC50 values were calculated. The % inhibition wascalculated according to the following equation% Inhibition = (A0-At) / A0 x 100Where A0 was the absorbance of thecontrol (blank, without extract) and At was theabsorbance in the presence of the extract.Superoxide radical scavenging activity(PMS-NADH System)Superoxide anions were generated usingPMS / NADH system. The superoxide anionsare subsequently made to reduce nitrobluetetrazolium which yields a chromogenicproduct, which is measured at 560 nm.Reagents/chemicals usedReduced nicotinamide adeninedinucleotide Sodium salt (NADH) [RM393Himedia, India], Phenazine methosulphate(PMS) [5165, Loba Chemie, India], Nitrobluetetrazolium (NBT) [94060, S.d. fine Chemicals,India], Positive control: Gallic acid G7384,[Sigma, USA].ProcedureTest solution (0.1 mL) in 0.1M phosphatebuffer pH 7.4, 62.5 μl of 468 μM NADHsolution, 62.5 μl of 150 μM NBT solution and62.5 μl of 60 μM PMS solution were added toa microwell plate and incubated at roomtemperature for 5 min. The absorbance wasread at 560 nm. Linear graph of concentrationvs percentage inhibition was prepared and IC50 values were calculated.Nitric oxide radical scavenging assaySodium nitroprusside in aqueous solutionat physiological pH spontaneously generatesnitric oxide which interacts with oxygen to producenitrite ions, which can be measured at546 nm spectrophtometrically in the presenceof Griess reagent.Reagents/chemicals usedSodium nitroprusside [40190, S.d.fineChemicals, India], Sulphanilamide [3164, NRChem., India], Orthophosphoric acid [39416,S.d.fine Chemicals, India], N-(1-naphthyl)ethylenediamine [N5889, Sigma, USA],Positive control: Curcuminoids ( 33533,Synthite, Kochin, India).ProcedureTest solution of various concentrations(50 μl) and 50 μl of 10 mM sodiumnitroprusside are illuminated (usingfluorescence light/18W CDL 6500K) at roomtemperature (25-30°C) for 15 min. Following
การแปล กรุณารอสักครู่..

ฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของการพัฒนาโมโนและ Polyherbal สูตรสิบแท็บเล็ตของแต่ละบุคคลและการรวมกันสูตรถูกนำผงและแยกต่างหากในสากและปูน บุคคลผงถูกละลายในปริมาณขนาดเล็กของเมทานอลในขวด100 มล. ปริมาตรและเสียง ตัวอย่างที่ได้รับการกรองผ่านกระดาษกรองไมครอนหนึ่งและกรองถูกยัดเยียดดังต่อไปนี้การตรวจสารต้านอนุมูลอิสระได้แก่ . DPPH ฟรีต้านอนุมูลซูเปอร์ออกไซด์ต้านอนุมูลไนตริกออกไซด์ที่รุนแรงไล่ABTS ทดสอบต้านอนุมูล. DPPH ทดสอบต้านอนุมูลDPPH [1,1- diphenyl-2-picryl hydrazyl] เป็นมีเสถียรภาพอนุมูลอิสระที่มีสีม่วงที่เข้มซึ่งเป็นวัดที่510 นาโนเมตรspectrophotometrically สารต้านอนุมูลอิสระช่วยลดDPPH เพื่อ 1,1-diphenyl-2-picryl ไฮดราซีนเป็นสารไม่มีสี. รีเอเจนต์ / สารเคมีที่ใช้DPPH (2,2-diphenyl-1-picryl hydrazyl) [RM 2798, HIMEDIA อินเดีย], เมทานอล (HPLC เกรด) [43602, Qualigens] ควบคุมบวก(กรดฝรั่งเศส) [G7384, Sigma, สหรัฐอเมริกา]. ขั้นตอนความเข้มข้นต่างๆ (200 ไมโครลิตร) ของการทดสอบวิธีการแก้ปัญหาและ50 ไมโครลิตรของ DPPH (0.659 มิลลิ) โซลูชั่นที่ได้รับการบ่มที่อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 20 นาทีต่อไปนี้การดูดกลืนแสงที่ถูกอ่านที่ 510 นาโนเมตร ปฏิกิริยาการควบคุมได้ดำเนินการโดยไม่ต้องตัวอย่างทดสอบ กราฟเชิงเส้นของความเข้มข้นเทียบกับร้อยละยับยั้งการจัดทำและค่า IC50 ถูกคำนวณ ยับยั้ง% ที่ได้รับการคำนวณตามสมการต่อไปยับยั้ง% = (A0-ที่) / A0 x 100 ที่ไหน A0 คือการดูดกลืนแสงของการควบคุม(ว่างเปล่าโดยไม่ต้องสารสกัด) และที่เป็นการดูดกลืนแสงในการปรากฏตัวของสารสกัด. Superoxide รุนแรง ต้าน(PMS-NADH System) แอนไอออน Superoxide ถูกสร้างขึ้นโดยใช้PMS / ระบบ NADH แอนไอออน superoxide จะทำต่อมาเพื่อลด nitroblue tetrazolium ซึ่งมีผลเป็น chromogenic ผลิตภัณฑ์ซึ่งเป็นวัดที่ 560 นาโนเมตร. รีเอเจนต์ / สารเคมีที่ใช้ลดNicotinamide adenine dinucleotide เกลือโซเดียม (NADH) [RM 393Himedia อินเดีย] Phenazine methosulphate (PMS) [5165 , Loba Chemie อินเดีย] nitroblue tetrazolium (NBT) [94060, SD สารเคมีปรับอินเดีย] ควบคุมบวก: G7384 กรดฝรั่งเศส,. [Sigma, สหรัฐอเมริกา] ขั้นตอนการแก้ปัญหาการทดสอบ (0.1 มิลลิลิตร) ใน 0.1M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์pH 7.4 62.5 ไมโครลิตร 468 ไมครอน NADH โซลูชั่น 62.5 ไมโครลิตร 150 ไมครอนแก้ปัญหา NBT และ62.5 ไมโครลิตร 60 ไมครอนแก้ปัญหา PMS ถูกเพิ่มเข้าไปในแผ่นmicrowell และบ่มที่ห้องอุณหภูมิเป็นเวลา5 นาที การดูดกลืนแสงที่ถูกอ่านได้ที่ 560 นาโนเมตร กราฟเชิงเส้นของความเข้มข้นเทียบยับยั้งร้อยละจัดทำและค่า IC50 ถูกคำนวณ. ไนตริกทดสอบขับออกไซด์รุนแรงSodium nitroprusside ในสารละลายที่pH สรีรวิทยาธรรมชาติสร้างไนตริกออกไซด์ซึ่งติดต่อกับออกซิเจนในการผลิตไอออนไนไตรท์ซึ่งสามารถวัดได้ที่546 นาโนเมตร spectrophtometrically ใน การปรากฏตัวของสารGriess. รีเอเจนต์ / สารเคมีที่ใช้nitroprusside โซเดียม [40190, Sdfine สารเคมีอินเดีย] Sulphanilamide [3164, NR Chem. อินเดีย] กรด Orthophosphoric [39416, Sdfine สารเคมีอินเดีย] N- (1-naphthyl) ethylenediamine [N5889, Sigma, สหรัฐอเมริกา] ควบคุมบวก: เคอ (33533, Synthite, Kochin, อินเดีย). ขั้นตอนการแก้ปัญหาการทดสอบความเข้มข้นต่างๆ(50 ไมโครลิตร) และ 50 ไมโครลิตรของโซเดียม 10 มิลลิnitroprusside จะเรืองแสง (ใช้ไฟเรืองแสง/ 18W CDL 6500K) ณ ห้องอุณหภูมิ(25-30 ° C) เป็นเวลา 15 นาที ดังต่อไปนี้
การแปล กรุณารอสักครู่..

กิจกรรมของสารต้านอนุมูลอิสระและพัฒนาตำรับยาเม็ด polyherbal โมโน
สูตรสิบของบุคคลและการถ่ายและผง
แยกกันในสากและครก ผงละลายในแต่ละคน
ขนาดเล็กปริมาณของเมทานอลใน 100 ml ขวดปริมาตรา
ขึ้นปริมาณ ตัวอย่างที่ถูกกรองผ่านกระดาษกรอง
1 ไมครอนและกรองคือ
ถูกต้องตามสารต้านอนุมูลอิสระหรือ viz .
dpph อนุมูลอิสระซูเปอร์ออกไซด์เป็นตัวเร่งปฏิกิริยาการ
, ,
scavenging อนุมูลอิสระไนตริกออกไซด์ Abbr เป็นตัวเร่งปฏิกิริยา , ( . . . )
dpph เป็นตัวเร่งปฏิกิริยา dpph [ 1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl ]
หัวรุนแรงฟรีที่มั่นคงกับสีม่วง
เข้มซึ่งเป็นวัดที่ 510 nm
นี้ . สารต้านอนุมูลอิสระลด
dpph ต่อ 11-diphenyl-2-picryl ไฮดราซีน ,
สารประกอบไม่มีสี สารเคมี / สารเคมีที่ใช้ dpph
( 2,2-diphenyl-1-picryl hydrazyl )
[ RM ] 2798 himedia , อินเดีย , เมทานอล ( เกรด 4
) [ 43602 qualigens ] ,
, ควบคุมบวก ( เพิ่มขึ้น ) [ g7384 , Sigma , USA ] .
( 200 μความเข้มข้นต่าง ๆ ขั้นตอน 1 ) ทดสอบโซลูชั่นและ 50 μ
L
dpph ( 0.659 มม. ) อุณหภูมิ 25 ° C สารละลาย
20 นาทีต่อไปนี้ซึ่งนอ่านที่ 510
nm . การควบคุมปฏิกิริยาที่ดำเนินการโดยไม่
ทดสอบตัวอย่าง กราฟเชิงเส้นของความเข้มข้น
vs เปอร์เซ็นต์การยับยั้งและเตรียม ic50 ค่าได้ % การ ยับยั้ง
คำนวณตามสมการต่อไปนี้
% ยับยั้ง = ( A0 A0 x 100 ) / A0
ที่เป็นค่า
ควบคุม ( ว่าง โดยไม่แยก ) และที่เป็น
การดูดกลืนแสงในการแสดงตนของออกไซด์เป็นตัวเร่งปฏิกิริยา สารสกัด
( กิจกรรมระบบ pms-nadh )
ซุปเปอร์แอนขึ้น
PMS / การใช้ระบบ ออกไซด์แอนไอออน
ต่อมาทำเพื่อลด nitroblue
tetrazolium ซึ่งผลผลิตผลิตภัณฑ์การสนทนาผ่านข้อความโต้ตอบแบบทันที ซึ่งเป็นวัดที่ 560 nm .
ลดใช้สารเคมี / สารเคมีนิโคตินาไมด์อะดีนีน
ไดนิวคลีโอไทด์เกลือโซเดียม ( แอมโมเนีย ) [
393himedia RM ,อินเดีย ] , phenazine methosulphate
( PMS ) [ 5165 โลบะ , เคมี , อินเดีย ] , nitroblue
tetrazolium ( NBT ) [ 94060 , เคมี 1 ก็ได้
อินเดีย ] , ควบคุมบวกเพิ่มขึ้น g7384
[ , Sigma , สหรัฐอเมริกา ] .
( แก้ไขกระบวนการทดสอบ 0.1 มิลลิลิตร )
0.1m ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ 7.4 , 62.5 μ L จาก 468 μ M NADH
โซลูชั่น , 62.5 μลิตร 150 μ M NBT และโซลูชั่น
62.5 μลิตร 60 μ M มาเพิ่ม
โซลูชั่นจาน microwell บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 5 นาที
อ่านนอยู่ที่ 560 นาโนเมตร กราฟเชิงเส้นของความเข้มข้น
vs เปอร์เซ็นต์การยับยั้งและค่าเตรียม ic50 คำนวณ .
ไนตริกออกไซด์เป็นตัวเร่งปฏิกิริยาโซเดียมไนโตรปรัสไซด์ )
ที่ pH ในสารละลายทางสรีรวิทยาได้สร้างไนตริกออกไซด์ซึ่งมีปฏิกิริยากับออกซิเจน
ไนไตรท์ผลิตไอออนซึ่งสามารถวัดที่ 546 นาโนเมตรในสถานะ spectrophtometrically
ของ griess รีเอเจนต์ .
สารเคมี / สารเคมีที่ใช้โซเดียมไนโตรปรัสไซด์ [ 40190
,
s.d.fine เคมีภัณฑ์ อินเดีย ] , sulphanilamide [ 3164 , Chem (
. อินเดีย ] , ออร์โธฟอสฟอริกแอซิด [ 39416
s.d.fine , สารเคมี , อินเดีย ] , N - ( 1-naphthyl )
[ n5889 ลลีนไดแอม , Sigma , USA ] ,
ควบคุมบวก เคอร์คูมินอยด์ ( 33533
synthite โคชินอินเดีย , , ,
ขั้นตอน )ทดสอบโซลูชั่นต่างๆ (
( 50 μ L ) และ 50 μลิตรโซเดียมไนโตรปรัสไซด์ 10 มิล มีไฟ ( ใช้
เรืองแสง / 18w CDL 6500k ) ที่อุณหภูมิห้อง ( ไม่เกิน 30 ° C )
15 นาทีต่อไปนี้
การแปล กรุณารอสักครู่..
