The yeast strain M8 was cultured in

The yeast strain M8 was cultured in modified Lilly–Barnett minimal
salt medium (Lilly and Barnett, 1951) containing 2 mg ml1
CWP as sole carbon source. A 30 ml of culture media in 100-ml
flask (PYREX, England) was incubated at 25 C on a rotary shaker
at 150 rpm for 0, 24, 72, 96 and 120 h. Culture filtrates from each
individual flask were collected by centrifuging at 7000g for
8 min, and the supernatant was used for enzyme assays. b-1,3-Glucanase
activity assay were carried out by measuring the amount of
reducing sugars released from laminarin (L9634, Sigma, USA),
using glucose as a standard (Masih and Paul, 2002). A reaction mixture
was prepared by adding 250 ll of 50 mM potassium acetate
buffer (pH 5.0) containing 2.5 mg of laminarin per ml into 250 ll
of culture filtrate (Chan and Tian, 2005). The enzyme-substrate
mixture was incubated for 2 h at 40 C in water bath (D-3508 Melsungen,
Germany). Then 0.5 ml of dinitrosalicylic acid reagent was
added, boiling at 100 C for 5 min. After cooling, 2 ml of deionised
water was added directly and measured spectrophotometrically at
595 nm. Background levels of reducing sugars were determined
with a time zero supernatant substrate just prior to boiling at
100 C for 5 min. The protein concentration of the enzyme solution
was determined according to Bradford (1976) by using bovine serum
albumin (A1933, Sigma, USA) as a standard. The specific activity
was expressed as micromoles of glucose per milligram protein
per hour (Fan and Tian, 2000). Each treatment had three replications
and the experiments were performed three times.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สายพันธุ์ยีสต์ M8 มีอ่างในปรับเปลี่ยนลิลลี่ – น้อยบาร์เนต
เกลือปานกลาง (ลิลลี่และบาร์เนต 1951) ประกอบด้วย 2 mg ml 1
CWP เป็นแหล่งคาร์บอนแต่เพียงผู้เดียว Ml 30 สื่อวัฒนธรรมใน 100 ml
หนาว (PYREX อังกฤษ) เป็น incubated ที่ 25 C ในเชคเกอร์โรตารี่
ที่ 150 rpm สำหรับ 0, 24, 72, 96 และ 120 h. วัฒนธรรม filtrates จาก
หนาวละถูกรวบรวม โดย centrifuging ที่ 7000g สำหรับ
8 นาที และใช้สำหรับเอนไซม์ assays supernatant b 1,3 คัด
วิเคราะห์กิจกรรมที่ดำเนินการ โดยวัดจำนวน
ลดน้ำตาลออกจาก laminarin (L9634 ซิก สหรัฐอเมริกา),
ใช้กลูโคสเป็นมาตรฐาน (Masih และพอล 2002) ส่วนผสมปฏิกิริยา
ถูกเตรียม โดยการเพิ่ม 250 จะ 50 มม.โพแทสเซียม acetate
บัฟเฟอร์ (pH 5.0) ประกอบด้วย 2.5 มก.ต่อมล. laminarin เป็น 250 จะ
วัฒนธรรมสารกรอง (จันทร์และ Tian, 2005) พื้นผิวเอนไซม์
ผสมถูก incubated สำหรับ h 2 ที่ 40 C ในห้องน้ำ (Melsungen D-3508,
เยอรมนี) แล้วถูก 0.5 ml ของรีเอเจนต์กรด dinitrosalicylic
เพิ่ม เดือดที่ 100 C สำหรับ 5 นาที หลังจากทำความเย็น 2 ml ของ deionised
น้ำถูกเพิ่มโดยตรง และวัด spectrophotometrically
595 nm มีกำหนดระดับพื้นหลังลดน้ำตาล
กับพื้นผิว supernatant เวลาศูนย์ก่อนเดือดที่
C 100 สำหรับ 5 นาที ความเข้มข้นของโปรตีนเอนไซม์โซลูชัน
กำหนดตามแบรดฟอร์ด (1976) โดยใช้ซีรั่มวัว
albumin (A1933 ซิก สหรัฐอเมริกา) เป็นมาตรฐาน กิจกรรม
ถูกแสดงเป็น micromoles ของกลูโคสต่อโปรตีน milligram
ต่อชั่วโมง (พัดลมและเทียน 2000) ทรีตเมนท์มีระยะ 3
และการทดลองได้ทำสามครั้ง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สายพันธุ์ยีสต์ M8 ถูกเพาะเลี้ยงในการแก้ไขลิลลี่-บาร์เน็ตต์น้อยที่สุด
กลางเกลือ (ลิลลี่และบาร์เน็ตต์ 1951) ที่มี 2 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร? 1
CWP เป็นแหล่งคาร์บอน แต่เพียงผู้เดียว 30 ml ของสื่อวัฒนธรรมใน 100 มล.
ขวด (Pyrex อังกฤษ) ได้รับการบ่มที่ 25 องศาเซลเซียสในเครื่องปั่นหมุน
ที่ 150 รอบต่อนาที 0, 24, 72, 96 และ 120 ชั่วโมง เชื้อราจากแต่ละ
ขวดบุคคลที่ถูกเก็บรวบรวมโดยการปั่นแยกที่ 7000g เป็น
8 นาทีและสารละลายที่ใช้สำหรับการตรวจการทำงานของเอนไซม์ b-1 ,3-glucanase
ทดสอบกิจกรรมที่ได้ดำเนินการโดยการวัดปริมาณของ
การลดน้ำตาลปล่อยออกมาจาก Laminarin (L9634, Sigma, USA)
โดยใช้น้ำตาลเป็นมาตรฐาน (Masih และพอล, 2002) ผสมปฏิกิริยา
ถูกจัดทำขึ้นโดยการเพิ่ม 250 LL 50 มิลลิโพแทสเซียมอะซิเตท
บัฟเฟอร์ (pH 5.0) ที่มี 2.5 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร Laminarin เป็น 250? จะ
กรองของวัฒนธรรม (จันและ Tian, ​​2005) เอนไซม์สารตั้งต้น
ส่วนผสมถูกบ่มเป็นเวลา 2 ชั่วโมงที่ 40 องศาเซลเซียสในอ่างน้ำ (D-3508 เมลซุงเกน,
เยอรมนี) แล้ว 0.5 มล. ของสารกรด dinitrosalicylic ถูก
เพิ่มเดือดที่ 100 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาที หลังจากที่ระบายความร้อน, 2 มิลลิลิตร deionised
น้ำถูกเพิ่มเข้ามาโดยตรงและวัด spectrophotometrically ที่
595 นาโนเมตร ระดับพื้นหลังของการลดน้ำตาลได้รับการพิจารณา
ด้วยศูนย์เวลาใสพื้นผิวก่อนที่จะเดือดที่
100 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาที โปรตีนเข้มข้นของสารละลายเอนไซม์
ถูกกำหนดตามที่แบรดฟอ (1976) โดยใช้วัวซีรั่ม
อัลบูมิ (A1933, Sigma, USA) เป็นมาตรฐาน กิจกรรมที่เฉพาะเจาะจง
ได้รับการแสดงเป็น micromoles ของกลูโคสต่อมิลลิกรัมโปรตีน
ต่อชั่วโมง (พัดลมและ Tian, ​​2000) การรักษาแต่ละคนมีสามซ้ำ
และการทดลองได้ดำเนินการสามครั้ง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ยีสต์สายพันธุ์ M8 เลี้ยงในแก้ไขลิลลี่– Barnett กลางเกลือน้อยที่สุด
( Lilly และ Barnett , 1951 ) ประกอบด้วย 2 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร  1
cwp เป็นแหล่งคาร์บอน 30 มิลลิลิตรอาหารเลี้ยงเชื้อ 100 มิลลิลิตร
ขวด ( Pyrex , อังกฤษ ) คืออุณหภูมิ 25 C บน 
เครื่องปั่นหมุนที่ความเร็ว 150 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 0 , 24 , 72 , 96 และ 120 ชั่วโมง แต่ละวัฒนธรรม สารละลายจากขวด
บุคคลครั้งนี้ วรรณนาที่ 7000g สำหรับ
8 มินและนำมาใช้สำหรับตรวจเอนไซม์ . b-1,3-glucanase
กิจกรรม การทดสอบ ทดลอง โดยการวัดปริมาณของ
ลดน้ำตาลออกจากลามินาริน ( l9634 , Sigma , USA ) ,
ใช้กลูโคสเป็นมาตรฐาน ( ยังคงและพอล , 2002 ) ปฏิกิริยาที่ผสม
เตรียมเพิ่ม 50 mm โพแทสเซียมอะซีเตทบัฟเฟอร์ 250 ll
( pH 5.0 ) ที่มี 2.5 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร เป็น 250 ll
ลามินารินวัฒนธรรมของกรอง ( จันเทียน , 2005 ) เอนไซม์สารอาหาร
ผสมบ่ม 2 ชั่วโมง 40  C ในอ่างน้ำ ( d-3508 เมลล์ซุนเก่น
, เยอรมนี ) แล้ว 0.5 ml ของ dinitrosalicylic กรดสารเคมีได้
เพิ่มให้เดือดที่ 100 C เป็นเวลา 5 นาที  หลังจากเย็น , 2 ml ของ deionised
น้ำเพิ่มโดยตรง และวัดนี้ที่
595 นาโนเมตร ระดับของพื้นหลังลดน้ำตาลตัดสินใจ
กับเวลาที่ศูนย์นำพื้นผิวก่อนที่จะเดือดที่ 100 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาที
 โปรตีนความเข้มข้นของสารละลายเอนไซม์
ถูกกำหนดตามแบรดฟอร์ด ( 1976 ) โดยการใช้ซีรั่มอัลบูมิน ( a1933 )
, Sigma , USA ) เป็นมาตรฐาน
กิจกรรมที่เฉพาะเจาะจงจะแสดงเป็นไมโครโมของกลูโคสต่อมิลลิกรัมโปรตีน
ต่อชั่วโมง ( ฟ่าน และ เถียน , 2000 ) การรักษาแต่ละครั้งมี 3 ซ้ำ
และทดลองสามครั้ง