Amplified products after the tertia

Amplified products after the tertiary round of PCR in genomic walking and T-DNA flanking sequence cloning using FPNI-PCR. (a) Cloning of the FT-Like gene of Rosa rugosa using 3 gene-specific and 1-8 FP primers. (b) T-DNA flanking sequence cloning in three transgenic tobacco individual plants using forward primers corresponding to the known T-DNA border; various fragment sizes were obtained from the use of different FP primers (1-9) in the three tested tobacco plants. (c) T-DNA flanking sequence cloning using backward primers. Only target specific fragments were amplified by using an appropriate annealing temperature during the low stringency cycles of the first PCR step (similar T-DNA sequences were present in each of the tested transgenic tobacco plants). Note: M: molecular marker; number: 1-9 FP primers; -: control.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ผลิตภัณฑ์ขยายหลังจากที่รอบที่สามของ PCR ในการเดินจีโนมและเสื้อ dna ขนาบลำดับโคลนใช้ fpni-PCR (ก) การโคลนยีนฟุตเหมือนรูโกซา rosa ใช้ 3 ยีนที่เฉพาะเจาะจงและ 1-8 ไพรเมอร์ FP (ข) เสื้อ dna ขนาบลำดับโคลนในสามพันธุ์ยาสูบพืชแต่ละบุคคลโดยใช้ไพรเมอร์ไปข้างหน้าสอดคล้องกับชายแดนเสื้อ dna รู้จักขนาดส่วนต่างๆที่ได้รับจากการใช้ไพรเมอร์ที่แตกต่างกัน FP (1-9) ในพืชยาสูบสามการทดสอบ (c) เสื้อ dna ขนาบลำดับโคลนโดยใช้ไพรเมอร์หลังเพียง แต่กำหนดเป้​​าหมายที่เฉพาะเจาะจงเศษถูกขยายโดยใช้อุณหภูมิการหลอมที่เหมาะสมในช่วงรอบต่ำของความเข้มงวดขั้นตอน pcr แรก (ลำดับเสื้อ dna ที่คล้ายกันอยู่ในปัจจุบันในแต่ละพืชยาสูบพันธุ์ที่ผ่านการทดสอบ) หมายเหตุ: ม. เครื่องหมายโมเลกุลจำนวน: 1-9 ไพรเมอร์ FP; -: การควบคุม

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ผลิตภัณฑ์เอาต์หลังรอบต่อของ PCR ในเดิน genomic T DNA flanking ลำดับโคลนโดยใช้ FPNI PCR (ก) โคลนของยีน FT เหมือนงูเหนือโรใช้ 3 ยีนเฉพาะและไพรเมอร์ FP 1-8 ขลำดับ flanking T-ดีเอ็นเอโคลนในสามยาสูบถั่วเหลืองพืชแต่ละโดยใช้ไพรเมอร์ไปข้างหน้าตรงกับดีเอ็นเอ T รู้จักเส้นขอบ ขนาดส่วนต่าง ๆ ได้รับจากการใช้ไพรเมอร์ FP ต่าง ๆ (1-9) ในพืชยาสูบทดสอบสาม (ค) T-DNA flanking ลำดับโคลนโดยใช้ไพรเมอร์ย้อนหลัง บางส่วนเฉพาะเป้าหมายเฉพาะของถูกขยาย โดยใช้อุณหภูมิการหลอมตัวที่เหมาะสมระหว่างรอบต่ำสุดที่ stringency PCR ขั้นตอนแรก (ลำดับดีเอ็นเอ T คล้ายถูกนำเสนอในแต่ละพืชยาสูบถั่วเหลืองที่ผ่านการทดสอบ) หมายเหตุ: m:โมเลกุลเครื่อง หมายเลข: ไพรเมอร์ FP 1-9 -: ควบคุม

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

แอมพลิฟายสินค้าหลังจากรอบขั้นของ pcr ในลำดับขนาบข้าง T - ดีเอ็นเอและเดินไปถึงยัง genomic การลอกแบบการใช้ fpni - pcr. (ก)การลอกแบบของยีนฟุตที่ของ rugosa Rosa โดยใช้ 1-8 1-8 1-8 primers FP และ 3 ยีนเฉพาะ (ข)ตามลำดับขนาบข้าง T - ดีเอ็นเอการโคลนมนุษย์ในสามยาสูบพันธุ์ไม้ต่างๆกันโดยใช้ส่งต่อ primers ที่เกี่ยวข้องกับชายแดนที่มีชื่อเสียง T - ดีเอ็นเอขนาดต่างๆส่วนท้ายได้จากการใช้ของ primers FP แตกต่างกันไป( 1-9 1-9 1-9 )ในสามยาสูบได้รับการทดสอบแล้ว ( c )ขนาบข้าง T - ดีเอ็นเอการลอกแบบการใช้ primers ย้อนกลับเท่านั้นเองเฉพาะกลุ่มเป้าหมายมีแอมพลิฟายโดยการใช้ อุณหภูมิ annealing ที่เหมาะสมในแต่ละรอบ(กฎต่ำของขั้นตอน pcr ครั้งแรก(ลำดับของ T - ดีเอ็นเอเหมือนอยู่ในโรงงานยาสูบก็เพราะได้รับการทดสอบแล้วแต่ละตัว) หมายเหตุ:ม.:ระดับโมเลกุลเครื่องหมาย;หมายเลข: 1-9 1-9 1-9 FP primers ; - :การควบคุม.