2. Materials and methods2.1. Produc

2. Materials and methods
2.1. Production of yogurt
Batches of yogurt were prepared in sterilized glass bottles,
containing 500 ml of either homogenized cows' milk (Bio Lait
Biologique, Liberté Co., Candiac, QC, Canada) containing 3.3%
protein, and 2% milk fat, or a soy beverage (So Nice Organic
Original, SoyWorld Inc., Vancouver, BC, Canada) containing
2.4% protein, 1.2% fat, evaporated cane juice, and 14 vitamins
and minerals. Control yogurts were prepared by inoculating
cows' milk and soy beverage with about 3×105 cfu/ml of each
of S. thermophilus and L. delbrueckii subsp. bulgaricus cultures,
both of which were obtained from Abiasa Co., Saint Hyacinthe,
QC, Canada. All fermentations were carried out for 12 h at 41±
1 °C, in a waterbath, without agitation.
2.2. Yogurt containing probiotic bacteria
The list of probiotic bacteria tested for their ability to grow
during fermentation of either cows'milk or soy beverage is shown
in Table 1. Before inoculation, the probiotic bacteria were replicated
twice for 16 h at 37 °C under an atmosphere of (85%
nitrogen, 10%oxygen, and 5% carbon dioxide in deMan Rogosa
Sharp (MRS) broth (Difco, Sparks, MD, USA) supplemented
with cysteine, 0.5 g/l. Cultures were centrifuged to pellet the cells
which were then resuspended in cows' milk or soy beverage.
Probiotic bacteria were added at numbers of 1×105 cfu/500 ml of
milk or soy beverage at the same time that the yogurt starter
bacteria were added. Each fermentation was repeated three times.
2.3. Enumeration of bacteria
Each 2 h, a 1 ml sample was taken fromeach yogurt. Serial tenfold
dilutions were prepared in a solution of 0.9% NaCl (w/v) and
0.1% (w/v) bacto peptone (Difco) and suitable dilutions were
plated on appropriate media. L. delbrueckii subsp. bulgaricus
were enumerated on lactobacilli MRS broth (Difco) supplemented
with agar, 15 g/l (Difco); S. thermophilus were enumerated on
M17 broth (Difco) supplementedwith lactose, 5 g/l (Mallinckrodt,
St. Louis, MO, USA) and agar, 15 g/l (Difco); Bifidobacterium
sp. RBL 00064, RBL 00066, RBL 00079, RBL 00080 and RBL
00084 were enumerated on Columbia agar base medium (CAB;
Becton Dickinson, Cockeysville, MD, USA) supplemented with
cysteineHCl, 0.5 g/l; raffinose, 0.5 g/l; lithiumchloride, 2 g/l; and
sodium propionate, 3 g/l. L. johnsonii La-1, L. rhamnosus GG,
and L. acidophilus were enumerated on a modified MRS agar
containing proteose peptone, 10 g/l (Becton Dickinson); beef
extract, 10 g/l (Becton Dickinson); yeast extract, 5 g/l (Becton
Dickinson); maltose, 20 g/l; polysorbate 80, 1 g/l; ammonium
citrate 2 g/l; sodium acetate, 5 g/l; magnesium sulphate, 0.1 g/l;
manganese sulphate, 0.05 g/l; dipotassium phosphate, 2 g/l;
and agar, 15 g/l. The medium was supplemented with maltose,
20 g/l for enumeration of L. johnsonii La-1, ormannitol, 20 g/l for
enumeration of L. rhamnosus GG. Enumeration of the target
organisms could be performed using these media since
L. delbrueckii subsp. bulgaricus formed pin point colonies on
them, and such colonies were disregarded.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ
2.1 การผลิตโยเกิร์ตชุดของโยเกิร์ตได้จัดทำในขวดแก้วฆ่าเชื้อที่มี500 มลนมทั้งวัวปั่น '(ไบโอ Lait Biologique, Liberté จำกัด Candiac, QC, แคนาดา) ที่มี 3.3% โปรตีนและไขมันนม 2% หรือ เครื่องดื่มถั่วเหลือง (ดังนั้นดีอินทรีย์Original, SoyWorld อิงค์แวนคูเวอร์แคนาดา) ที่มีโปรตีน2.4% ไขมัน 1.2% น้ำอ้อยระเหยและ 14 วิตามินและแร่ธาตุ โยเกิร์ตควบคุมถูกจัดทำขึ้นโดยการฉีดวัคซีนวัวนมถั่วเหลืองและเครื่องดื่มที่มีประมาณ 3 × 105 cfu / ml ของแต่ละของ thermophilus และเอสแอล delbrueckii subsp วัฒนธรรม bulgaricus, ซึ่งทั้งสองที่ได้รับจาก Abiasa จำกัด , Saint Hyacinthe, QC, Canada หมักแหนมทั้งหมดได้รับการดำเนินการเป็นเวลา 12 ชั่วโมงที่ 41 ± 1 ° C ใน Waterbath โดยไม่ต้องกวน. 2.2 โยเกิร์ตที่มีแบคทีเรียโปรไบโอติกรายการของเชื้อแบคทีเรียโปรไบโอติกทดสอบความสามารถของพวกเขาที่จะเติบโตระหว่างการหมักทั้งcows'milk หรือเครื่องดื่มถั่วเหลืองจะแสดงในตารางที่1 ก่อนที่จะฉีดวัคซีนแบคทีเรียโปรไบโอติกที่ถูกจำลองแบบสองครั้งเป็นเวลา16 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสภายใต้บรรยากาศ ของ (85% ไนโตรเจนออกซิเจน 10% และ 5% ก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์ใน Deman Rogosa ชาร์ป (MRS) น้ำซุป (Difco ประกาย, MD, USA) เสริมด้วยcysteine, 0.5 g / l. วัฒนธรรมได้รับการหมุนเหวี่ยงไปเม็ดเซลล์ซึ่งเป็นresuspended แล้วในวัวนมหรือเครื่องดื่มถั่วเหลือง. แบคทีเรียโปรไบโอติกที่มีการเพิ่มจำนวน 1 × 105 cfu / 500 มล. ของนมหรือเครื่องดื่มถั่วเหลืองในเวลาเดียวกับที่เริ่มต้นโยเกิร์ตแบคทีเรียที่ถูกเพิ่ม. แต่ละหมักซ้ำสามครั้ง. 2.3 การแจงนับของเชื้อแบคทีเรียแต่ละ2 ชั่วโมงตัวอย่างมล. 1 ถูกนำโยเกิร์ต fromeach. สิบเท่าอนุกรมเจือจางได้จัดทำในการแก้ปัญหาของ0.9% โซเดียมคลอไรด์ (w / v) และ0.1% (w / v) bacto เปปโตน (Difco) และเจือจางที่เหมาะสมได้ชุบในสื่อที่เหมาะสมลิตร delbrueckii subsp bulgaricus.. ถูกระบุในน้ำซุปนางแลคโต (Difco) เสริมด้วยอาหารเลี้ยงเชื้อ15 กรัม / ลิตร (Difco); S. thermophilus ถูกระบุในน้ำซุปM17 (Difco) แลคโตส supplementedwith 5 g / l (Mallinckrodt, เซนต์หลุยส์สหรัฐอเมริกา) และวุ้น 15 กรัม / ลิตร (Difco); Bifidobacterium SP RBL 00064, 00066 RBL, RBL 00,079, 00,080 และ RBL RBL 00084 ถูกระบุในสื่อฐานวุ้นโคลัมเบีย (CAB; Becton ดิกคินสันค็อก, MD, USA) เสริมด้วยcysteineHCl, 0.5 g / l; raffinose, 0.5 g / l; lithiumchloride 2 g / l; และpropionate โซเดียม 3 กรัม / ลิตร ลิตร johnsonii La-1, L. rhamnosus GG, และ L. acidophilus ถูกระบุในอาหารเลี้ยงเชื้อ MRS การแก้ไขที่มีproteose เปปโตน 10 g / l (Becton ดิกคินสัน); เนื้อสารสกัดจาก 10 g / l (Becton ดิกคินสัน); สารสกัดจากยีสต์, 5 g / l (Becton ดิกคินสัน); มอลโตส 20 g / l; polysorbate 80, 1 g / l; แอมโมเนียมซิเตรต 2 กรัม / l; acetate โซเดียม 5 g / l; แมกนีเซียมซัลเฟต 0.1 g / l; ซัลเฟตแมงกานีส 0.05 g / l; ฟอสเฟต dipotassium 2 g / l; และวุ้น 15 กรัม / ลิตร ขนาดกลางที่ได้รับการเสริมด้วยมอลโตส, 20 กรัม / ลิตรสำหรับการนับของแอล johnsonii La-1, ormannitol 20 กรัม / ลิตรสำหรับการนับของL. rhamnosus GG การแจงนับเป้าหมายของชีวิตที่จะได้รับการดำเนินการโดยใช้สื่อเหล่านี้ตั้งแต่ลิตร delbrueckii subsp bulgaricus เกิดอาณานิคมจุดขาบนพวกเขาและอาณานิคมดังกล่าวถูกมองข้าม

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ
2.1 . การผลิตโยเกิร์ตโยเกิร์ต
ชุดเตรียมในการฆ่าเชื้อขวดแก้วบรรจุ 500 มิลลิลิตร ทั้งโฮโม
วัวนม ( ไบเล
biologique ลิเบอร์ตี้ ) , จํา Candiac , QC , แคนาดา ) ประกอบด้วยโปรตีน 3.3 %
2 , % ไขมันนมหรือนมถั่วเหลืองเครื่องดื่ม ( ดีจัง
soyworld อินทรีย์ต้นฉบับ อิงค์ , Vancouver , BC , แคนาดา ) ประกอบด้วย
โปรตีนไขมันร้อยละ 1.2 , 2.4 %น้ำตาลน้ำอ้อยและ 14
วิตามินและแร่ธาตุ เตรียมโยเกิร์ตควบคุมณ
วัวน้ำนมถั่วเหลืองเครื่องดื่ม 3 × 105 CFU / ml ของแต่ละ
S . สีที่ได้จากธรรมชาติและ delbrueckii subsp . วัฒนธรรม bulgaricus
ทั้งสอง , ซึ่งได้จาก abiasa Co . , เซนต์ hyacinthe
, QC , แคนาดา ทั้งหมด fermentations ทดลองเป็นเวลา 12 ชั่วโมงใน 41 ±
1 ° C ใน waterbath โดยไม่ต้องเขย่า
2.2 .โยเกิร์ตที่มีแบคทีเรียโปรไบโอติก
รายชื่อของโพรไบโอติกแบคทีเรียทดสอบความสามารถของพวกเขาที่จะเติบโต
ระหว่างการหมักของ cows'milk หรือถั่วเหลืองเครื่องดื่มแสดง
ในตารางที่ 1 ก่อนที่เชื้อแบคทีเรียโพรไบโอติกเป็นแบบ
สองครั้ง 16 ชั่วโมง 37 ° C ในบรรยากาศ ( 85 %
ไนโตรเจน , ออกซิเจน , คาร์บอนไดออกไซด์ร้อยละ 10 และ 5 ในดีเมิน rogosa
คม ( นาง ) ซุป ( difco , ประกายไฟ , MD ,สหรัฐอเมริกา ) เสริมด้วยกรดอะมิโน
0.5 กรัมต่อลิตร เป็นระดับวัฒนธรรมกับเม็ดเซลล์
ซึ่งจากนั้น resuspended ในวัวนมหรือถั่วเหลืองเครื่องดื่ม .
แบคทีเรียโปรไบโอติกเพิ่มที่ตัวเลข 1 × 105 CFU / 500 มล.
นมหรือถั่วเหลืองเครื่องดื่ม ในเวลาเดียวกันที่โยเกิร์ตหัวเชื้อ
แบคทีเรียเพิ่ม . แต่ละแบบทำซ้ำสามครั้ง .
2.3 การแจงนับของแบคทีเรีย
ครั้งละ 2 ชั่วโมง1 มล. จำนวนเอาโยเกิร์ตของ . โตต่อเนื่องเตรียม
เจือจางในสารละลาย 0.9% NaCl ( w / v )
0.1% ( w / v ) Bacto เปปโตน ( difco ) และวิธีการที่เหมาะสมคือ
ชุบในสื่อที่เหมาะสม ฉัน delbrueckii subsp . bulgaricus
ถูกระบุใน Lactobacilli MRS broth ( difco ) เสริม
กับวุ้น 15 กรัม / ลิตร ( difco ) ; เอสเทอร์มอฟิลัสถูกระบุบน
m17 broth ( difco ) supplementedwith แลคโตส 5 กรัมต่อลิตร ( Mallinckrodt
, St . Louis , MO , USA ) และผง 15 กรัม / ลิตร ( difco ) ; ครองโลก
sp . 00064 RBL , 00066 RBL , 00079 RBL และ RBL , 00080 RBL
00084 เป็นบนอาหารวุ้น ระบุฐานโคลัมเบีย ( แท็กซี่ ;
เบ็กเติ้นดิกคินสัน Cockeysville , MD , USA ) เสริมด้วย
cysteinehcl 0.5 g / l ; แรฟฟิโนส , 0.5 g / l ; lithiumchloride 2 g / l ;
โซเดียม propionate , 3 g / L . Lla-1 johnsonii L rhamnosus GG , และ L . acidophilus ถูกระบุบน

โดยนางวุ้นที่มีโปรตีนโอสเปปโตน , 10 กรัม / ลิตร ( เบคตอน Dickinson ) ; สารสกัดจากเนื้อ
10 กรัม / ลิตร ( เบคตอน Dickinson ) ; สารสกัดจากยีสต์ , 5 กรัม / ลิตร ( เบคตอน
Dickinson ) ; น้ำตาล 20 กรัมต่อลิตร ; เบท 80 , 1 g / l ;
2 g / l แอมโมเนียมซิเตรท โซเดียมอะซิเตต , 5 กรัม / ลิตร แมกนีเซียมซัลเฟต 0.1 g / l ;
แมงกานีสซัลเฟต , 0.05 ก. / ล. ฟอสเฟต dipotassium ,2 g / l ;
และผง 15 กรัม / ลิตร ) เติมน้ำตาลมอลโตส ,
20 กรัมต่อลิตรสำหรับการ L . johnsonii la-1 ormannitol , 20 กรัมต่อลิตร
แจง . rhamnosus GG . แจงเป้าหมาย
สิ่งมีชีวิตสามารถแสดงการใช้สื่อเหล่านี้ตั้งแต่
L delbrueckii subsp . ก่อตั้งอาณานิคมบน
bulgaricus ขาจุดนั้น เช่นอาณานิคมได้ถูกละเลย