2. Materials andmethods2.1. Ethical

2. Materials andmethods
2.1. Ethical note
This study was conducted following the animal ethics guidelines of
the Research Policy of Universiti Putra Malaysia.
2.2. Experimental animals, stunning and slaughter
A total of 80 male New Zealand white rabbits weighing between
1800 g and 2000 g were obtained from a commercial farm (East Asia
Rabbit Corporation) located in Semenyih, West Malaysia. The rabbits
were divided into two groups of 40 animals each and subjected to either
gas stunning (GS) or halal slaughter (HS). The slaughter procedure was
conducted at the Department of Animal Science abattoir, Faculty of
Agriculture, Universiti Putra Malaysia. In the halal method (HS), the
40 animals were humanely slaughtered according to the halal slaughter
procedure as outlined in the Malaysian Standard MS1500:2009
(Department of Standards Malaysia, 2009). The animals were
slaughtered by a licensed slaughter man by severing the carotid artery,
jugular vein, trachea and esophagus. The vagus nerve was also severed.
In order to carry out gas stunning (GS), groups of ten rabbits were
placed in a gas chamber containing 61.4% CO2, 20.3% O2 and 18.29% N2
for 5 min. All the 40 animals were subsequently bled to drain excess
blood from the carcass.
2.3. Blood sampling
To determine the basal values of the analyzed parameters, bloodwas
collected from the ear vein of ten randomly chosen animals assigned as
the control group. The animals were comfortably restrained in a commercial
rabbit restrainer and 5 ml of blood was collected from the ear
vein using 21 gauge needles. At exsanguination, 5 ml of the sticking
blood was obtained from the jugular venipuncture of ten randomly
chosen animals per treatment from both HS and GS. Ten representative
blood samples per treatment for hematological parameters were collected
in lithium heparin tubes, pre-chilled and transported to the
Hematology Laboratory, Faculty of Veterinary Medicine, Universiti
Putra Malaysia within less than 2 h. Samples for hormone analysis
were collected in EDTA tubes, pre-chilled before centrifuged at 800 g
for 15 min at 4 °C. The resultant plasma were divided into aliquots
and stored at −80 °C until subsequent analysis.
2.4. Carcass sampling
After evisceration and carcass dressing, approximately 20 g of the
Biceps femoris (BF) muscle from the left hind limbs was collected, properly
labeled, vacuum packaged and stored in a 4 °C chiller for drip loss
determination (Honikel, 1998). The left Longissimus lumborum (LL)
between the 6th and 8th lumbar vertebrae was removed and divided
into two, and snap frozen in liquid nitrogen before being stored at
−80 °C for subsequent determination of pH (pre-rigor) and glycogen
content, and myofibrillar fragmentation index (MFI) at d 0. The carcasses
were then hung in the 4 °C chiller and after trimming off any
visible connective tissue, the right LL muscle was dissected (6th to
8th, 9th to 10th and 11th–12th lumbar vertebrae) at 3 specific periods,
that is, 1, 7 and 14 d post-mortem, respectively, vacuum packed and
stored in a −80 °C freezer until subsequent analyses of pH, color,
shear force and cooking loss. The left LL muscle from the 9th to 12th
lumbar vertebra was dissected into three portions at specific periods
of 1, 7 and 14 d post-mortem for subsequent analysis of MFI.
2.5. Determination of physiological stress responses
Physiological stress responses (animal welfare indicators) were
determined through plasma catecholamines (adrenaline and noradrenaline)
as well as biochemical and hematological parameters. Biochemical
and hematological parameters were determined using the method
of Nakyinsige, Sazili, et al. (2013). Biochemical parameters (alanine
aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST), lactate dehydrogenase
(LDH), creatine kinase (CK), glucose, lactate, urea, total
protein and calcium) were determined using an automatic analyzer
(Automatic analyzer 902 Hitachi, Germany). All reagents used were
from Roche (Hitachi). Total hemogram (packed cell volume (PCV),
hematocrit, hemoglobin, red blood cells (RBCs), white blood cells
(WBCs), and lymphocytes) was determined using an automatic hematology
analyzer (CELL DYN® 3700, Abbot, USA) using Veterinary Package
software. The quantitative analysis of adrenaline (epinephrine)
content in blood was carried out using Adrenaline Plasma Enzyme-
Linked ImmunoSorbent Assay (ELISA) High Sensitive kit # BA E-4100
(LDN®, Germany)while noradrenaline (norepinephrine) quantification
was carried out using Noradrenaline Plasma ELISA High Sensitive kit #
BA E-4200 (LDN®, Germany). The competitive ELISA kits used the
micro-titer plate format where the hormone is extracted froma plasma
sample using a cis-diol-specific affinity gel, acylated and then modified
enzymatically. The antigen is bound to the solid phase of themicro-titer
plate and the derivatized standards, controls, samples as well as the
solid phase bound analytes compete for a fixed number of anti serum
binding sites.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุ andmethods2.1. หมายเหตุจริยธรรมการศึกษานี้ได้ดำเนินการตามแนวทางจริยธรรมสัตว์ของนโยบายการวิจัยของมาเลเซียตรายูนิเวอซิตี้2.2 การทดลองสัตว์ สวยงามและฆ่าจำนวน 80 ชายนิวซีแลนด์ไวท์กระต่ายน้ำหนักระหว่าง1800 g และ 2000 g ได้รับมาจากฟาร์มเพื่อการค้า (เอเชียตะวันออกบริษัทแรบบิท) อยู่ใน Semenyih มาเลเซียตะวันตก กระต่ายถูกแบ่งออกเป็น 2 กลุ่ม 40 สัตว์ และการอย่างใดอย่างหนึ่งก๊าซ (GS) ที่สวยงามหรือฆ่าฮาลาล (HS) มีขั้นตอนการฆ่าดำเนินการในโรงฆ่าสัตว์กรมวิทยาศาสตร์สัตว์ คณะเกษตร มาเลเซียตรายูนิเวอซิตี้ ในวิธีการฮาลาล (HS), การสัตว์ 40 humanely ถูกฆ่าตามฆ่าฮาลาลขั้นตอนที่ระบุไว้ใน MS1500:2009 มาตรฐานมาเลเซีย(แผนกมาตรฐานมาเลเซีย 2009) สัตว์ได้โดยได้รับใบอนุญาตฆ่าคนฆ่า โดย severing หลอดเลือด carotidหลอดเลือดดำ jugular หลอดลม และหลอดอาหาร นอกจากนี้ยังมี severed เส้นประสาท vagusการดำเนินการก๊าซธรรมชาติที่สวยงาม (GS), กลุ่มกระต่ายสิบได้วางท่อก๊าซที่ประกอบด้วย 61.4% CO2, 20.3% O2 และ 18.29% N2ใน 5 นาที สัตว์ 40 ทั้งหมดได้ในเวลาต่อมาคราวที่แล้วระบายน้ำส่วนเกินเลือดจากซาก2.3 สุ่มตัวอย่างเลือดการกำหนดค่าของพารามิเตอร์ที่วิเคราะห์ bloodwas โรครวบรวมจากหลอดเลือดดำหู 10 สัตว์ที่ท่านได้กำหนดให้เป็นกลุ่มควบคุม สัตว์ถูกยับยั้งในการค้าสบายrestrainer กระต่ายและ 5 มล.ของเลือดถูกรวบรวมจากหูเส้นเลือดโดยใช้เข็มวัด 21 ที่ exsanguination, ml 5 ของการเลือดที่ได้จากการเจาะหลอดเลือดดำ jugular สิบแบบสุ่มเลือกสัตว์ต่อรักษา HS และ GS สิบแทนมีการเก็บรวบรวมตัวอย่างเลือดต่อรักษาพารามิเตอร์ hematologicalในแบตเตอรี่ลิเธียมเฮพารินหลอด เตรียมอาหาร และขนส่งไปห้องปฏิบัติการโลหิต คณะสัตวแพทยศาสตร์ ยูนิเวอร์ซิตี้ปุตรามาเลเซียภายในน้อยกว่า 2 h. ตัวอย่างสำหรับการวิเคราะห์ฮอร์โมนถูกรวบรวมไว้ในหลอด EDTA ก่อนแช่ก่อน centrifuged ที่ 800 gใน 15 นาทีที่ 4 องศาเซลเซียส พลาสม่าผลแก่ถูกแบ่ง aliquotsและเก็บไว้ที่ −80 ° C จนกระทั่งต่อมาวิเคราะห์2.4 การสุ่มตัวอย่างซากหลังจาก evisceration และการแต่งตัว ประมาณ 20 g ของซากกล้ามเนื้อ biceps ชั้นลึก (เอฟ) จากเดนไฮนด์แขนขาซ้ายรวบรวม อย่างถูกต้องป้าย สุญญากาศบรรจุ และเก็บในที่เย็น 4 ° C สำหรับหยดร่วงกำหนด (Honikel, 1998) Lumborum Longissimus ซ้าย (LL)ระหว่าง 6 และ 8 vertebrae ช่องไขถูกเอาออก และแบ่งเป็นสอง และสแนปแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวก่อนที่จะมีการเก็บที่−80 ° C สำหรับการกำหนดค่า pH (rigor ก่อน) และยังตามมาเนื้อหา และดัชนีการกระจายตัวของ myofibrillar (MFI) ที่ d 0 ซากมีแล้วแขวน ในที่เย็น 4 ° C และหลัง จากตัดแต่งใด ๆเนื้อเยื่อเกี่ยวพัน เห็นกล้ามเนื้อจะถูกถูกราคา dissected (6 การ8, 9-10 และ 11 12 ช่องไข vertebrae) ใน 3 รอบระยะเวลานั่นคือ 1, 7 และ 14 d ลงพ้น ตามลำดับ สุญญากาศบรรจุ และเก็บไว้ในตู้แช่ −80 ° C จนต่อมาวิเคราะห์ของ สีแรงเฉือนและการสูญเสียอาหาร กล้ามเนื้อจะซ้ายจาก 9 ถึง 12ช่องไข vertebra ถูก dissected ในส่วนที่สามในรอบระยะเวลาของ 1, 7 และ 14 d ลงพ้นสำหรับการวิเคราะห์ที่ตามมาของ MFI2.5 การกำหนดของการตอบสนองความเครียดสรีรวิทยามีการตอบสนองความเครียดสรีรวิทยา (สวัสดิการสัตว์ตัวบ่งชี้)กำหนดผ่าน catecholamines พลาสมา (ตื่นเต้นและ noradrenaline)และชีวเคมี และ hematological พารามิเตอร์ ชีวเคมีและ hematological พารามิเตอร์ถูกกำหนดโดยใช้วิธีของ Nakyinsige, Sazili และ al. (2013) พารามิเตอร์ชีวเคมี (อะลานีนaminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST), lactate dehydrogenase(LDH), นื้คือ kinase (CK), กลูโคส lactate ยู เรีย รวมโปรตีนและแคลเซียม) ถูกกำหนดโดยใช้การวิเคราะห์โดยอัตโนมัติ(อัตโนมัติวิเคราะห์ 902 ฮิตาชิ เยอรมนี) Reagents ทั้งหมดที่ใช้ได้จากโรช (ฮิตาชิ) Hemogram รวม (บรรจุปริมาตรเซลล์ (PCV),hematocrit ฮีโมโกลบิน เซลล์เม็ดเลือดแดงเซลล์เม็ดเลือด (RBCs), สีขาว(WBCs), และ lymphocytes) กำหนดใช้การโลหิตอัตโนมัติวิเคราะห์ (DYN เซลล์® 3700 เจ้าอาวาส สหรัฐอเมริกา) โดยใช้แพคเกจสัตวแพทย์ซอฟต์แวร์ การวิเคราะห์เชิงปริมาณของความตื่นเต้น (อะดรีนาลิน)เนื้อหาในเลือดถูกดำเนินการโดยใช้เอนไซม์พลาสมาตื่นเต้น-เชื่อมโยง ImmunoSorbent Assay (ELISA) สูงถึง kit # BA E-4100(LDN ® เยอรมนี) ขณะนับ noradrenaline (norepinephrine)ทำออกใช้ Noradrenaline พลาสม่า ELISA สูงสำคัญ kit #BA E-4200 (LDN ® เยอรมนี) ชุด ELISA การแข่งขันใช้การรูปแบบแผ่นไมโคร titer ซึ่งเป็นฮอร์โมนที่สกัดพลาสม่า fromaตัวอย่างที่ใช้เป็นความสัมพันธ์เฉพาะ cis diol เจล acylated และแก้ไขแล้วenzymatically การตรวจหากับเฟสของแข็งของ themicro titerจาน และการ derivatized มาตรฐาน การควบคุม ตัวอย่างรวมทั้งระยะแข็งผูก analytes แย่งจำนวนการต่อต้านเซรั่มรวมไซต์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุ andmethods
2.1 บันทึกจริยธรรม
การศึกษาครั้งนี้ได้ดำเนินการดังต่อไปนี้แนวทางจริยธรรมสัตว์ของ
การวิจัยนโยบายของ Universiti Putra Malaysia.
2.2 สัตว์ทดลองที่สวยงามและฆ่า
ทั้งหมด 80 ชายนิวซีแลนด์กระต่ายสีขาวชั่งน้ำหนักระหว่าง
1,800 กรัมและ 2,000 กรัมที่ได้รับจากฟาร์มเชิงพาณิชย์ (เอเชียตะวันออกเฉียง
กระต่ายคอร์ปอเรชั่น) ตั้งอยู่ใน Semenyih, มาเลเซียตะวันตก กระต่าย
ถูกแบ่งออกเป็นสองกลุ่มของ 40 สัตว์แต่ละคนและยัดเยียดให้ทั้ง
ก๊าซที่สวยงาม (GS) หรือโรงฆ่าสัตว์ฮาลาล (HS) ขั้นตอนการฆ่าที่ได้รับการ
ดำเนินการที่กรมโรงฆ่าสัตว์สัตวศาสตร์คณะ
เกษตร Universiti Putra Malaysia ในวิธีการฮาลาล (HS)
40 สัตว์ที่ถูกฆ่ามนุษย์ตามโรงฆ่าสัตว์ฮาลาล
ตามขั้นตอนตามที่ระบุในมาเลเซียมาตรฐาน MS1500: 2009
(กรมมาตรฐานมาเลเซีย, 2009) สัตว์ที่ถูก
ฆ่าโดยคนที่ฆ่าได้รับใบอนุญาตโดยการตัดหลอดเลือด,
เส้นเลือดหลอดลมและหลอดอาหาร เส้นประสาทเวกัถูกตัดยัง.
เพื่อที่จะดำเนินการก๊าซที่สวยงาม (GS) กลุ่มของสิบกระต่ายถูก
วางไว้ในห้องแก๊สที่มี CO2 61.4%, 20.3% O2 และ 18.29% N2
เป็นเวลา 5 นาที ทั้งหมด 40 สัตว์ที่ถูกเลือดต่อมาเพื่อระบายน้ำส่วนเกิน
เลือดจากซาก.
2.3 การเก็บตัวอย่างเลือด
เพื่อตรวจสอบค่าพื้นฐานของพารามิเตอร์การวิเคราะห์ bloodwas
เก็บมาจากหลอดเลือดดำที่หูของสัตว์สิบสุ่มเลือกรับมอบหมายให้เป็น
กลุ่มควบคุม สัตว์ที่ถูกยับยั้งสบายในเชิงพาณิชย์
restrainer กระต่ายและ 5 มิลลิลิตรของเลือดถูกเก็บรวบรวมจากหู
หลอดเลือดดำโดยใช้ 21 เข็มวัด ในการเอา 5 มิลลิลิตรติด
เลือดที่ได้รับจากคอเจาะเลือดสิบสุ่ม
สัตว์ได้รับการแต่งตั้งต่อการรักษาจากทั้ง HS และ GS สิบตัวแทน
ตัวอย่างเลือดต่อการรักษาสำหรับพารามิเตอร์ทางโลหิตวิทยาที่ถูกเก็บ
ในหลอดเฮลิเธียมก่อนการแช่เย็นและเคลื่อนย้ายไปยัง
ห้องปฏิบัติการโลหิตวิทยาคณะสัตวแพทยศาสตร์ Universiti
Putra Malaysia ภายในน้อยกว่า 2 ชั่วโมง ตัวอย่างสำหรับการวิเคราะห์ฮอร์โมน
ถูกเก็บไว้ในหลอด EDTA ก่อนแช่เย็นก่อนที่จะหมุนเหวี่ยงที่ 800 กรัม
เป็นเวลา 15 นาทีที่ 4 ° C พลาสม่าผลลัพธ์ถูกแบ่งออกเป็นส่วนลงตัว
และเก็บไว้ที่ -80 ° C จนวิเคราะห์ที่ตามมา.
2.4 การเก็บตัวอย่างซาก
หลังจากชำแหละและตกแต่งซากประมาณ 20 กรัมของ
ลูกหนู femoris (BF) จากกล้ามเนื้อขาหลังซ้ายถูกเก็บอย่างถูกต้อง
ป้ายสูญญากาศบรรจุและเก็บไว้ในเครื่องทำความเย็น 4 ° C สำหรับการสูญเสียน้ำหยด
ความมุ่งมั่น (Honikel, 1998) เหลือ longissimus กลับกลับ (LL)
ระหว่าง 6 และกระดูกสันหลังส่วนเอวที่ 8 ถูกลบออกและแบ่งออก
เป็นสองและสแน็ปแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวก่อนที่จะถูกเก็บไว้ที่
-80 องศาเซลเซียสสำหรับความมุ่งมั่นที่ตามมาของความเป็นกรดด่าง (Pre-ความรุนแรง) และไกลโคเจน
เนื้อหาและ ดัชนีการกระจายตัวของกล้ามเนื้อ (MFI) ที่ง 0. ซาก
ถูกแขวนจากนั้นใน 4 ° C เครื่องทำความเย็นและหลังการตัดแต่งใด ๆ ออกจาก
เนื้อเยื่อเกี่ยวพันที่มองเห็นกล้ามเนื้อ LL ขวาถูกชำแหละ (6 ถึง
8, 9 ถึง 10 และกระดูกสันหลังส่วนเอวที่ 11 ที่ 12 ) ที่ 3 ระยะเวลาที่เฉพาะเจาะจง
ซึ่งก็คือ 1, 7 และ 14 D ชันสูตรศพตามลำดับสูญญากาศบรรจุและ
เก็บไว้ในช่องแช่แข็ง -80 ° C จนการวิเคราะห์ที่ตามมาของความเป็นกรดด่างสี
แรงเฉือนและการสูญเสียการปรุงอาหาร กล้ามเนื้อซ้าย LL จาก 9 ถึงวันที่ 12
กระดูกเอวถูกชำแหละออกเป็นสามส่วนในช่วงเวลาที่เฉพาะเจาะจง
1, 7 และ 14 D ชันสูตรศพสำหรับการวิเคราะห์ที่ตามมาของ MFI.
2.5 ความมุ่งมั่นของการตอบสนองความเครียดทางสรีรวิทยา
การตอบสนองความเครียดทางสรีรวิทยา (ตัวชี้วัดสวัสดิภาพสัตว์) ได้รับ
การพิจารณาผ่าน catecholamines พลาสม่า (ตื่นเต้นและ noradrenaline)
เช่นเดียวกับพารามิเตอร์ทางชีวเคมีและโลหิตวิทยา ชีวเคมี
พารามิเตอร์และโลหิตวิทยาได้รับการพิจารณาโดยใช้วิธีการ
ของ Nakyinsige, Sazili, et al (2013) พารามิเตอร์ทางชีวเคมี (alanine
aminotransferase (ALT) aminotransferase aspartate (AST), นม dehydrogenase
(LDH), ไคเนสรี (CK), น้ำตาลแลคเตท, ยูเรีย, รวม
โปรตีนและแคลเซียม) ได้รับการพิจารณาโดยใช้การวิเคราะห์อัตโนมัติ
(การวิเคราะห์อัตโนมัติ 902 ฮิตาชิ เยอรมนี) น้ำยาทั้งหมดที่ใช้เป็น
จากโรชชิ (Hitachi) รวม hemogram (ปริมาตรเม็ดเลือดแดงอัดแน่น (PCV),
ฮี, ฮีโมโกล, เซลล์เม็ดเลือดแดง (เม็ดเลือดแดง), เซลล์เม็ดเลือดขาว
(WBCs) และเซลล์เม็ดเลือดขาว) ถูกกำหนดโดยใช้โลหิตวิทยาอัตโนมัติ
วิเคราะห์ (CELL DYN® 3700 เจ้าอาวาสสหรัฐอเมริกา) ใช้สัตวแพทย์ แพคเกจ
ซอฟต์แวร์ การวิเคราะห์เชิงปริมาณของ adrenaline (epinephrine)
เนื้อหาในเลือดได้ดำเนินการโดยใช้พลาสม่า Adrenaline Enzyme-
Linked Immunosorbent Assay (ELISA) ชุดที่มีความสำคัญสูง # BA E-4100
(ผ้าห่อ, เยอรมนี) ในขณะที่ noradrenaline (norepinephrine) ปริมาณ
ที่ถูกนำออกมาใช้ noradrenaline วิธี ELISA ชุดพลาสม่าที่มีความสำคัญสูง #
BA E-4200 (ผ้าห่อ, เยอรมนี) ชุด ELISA แข่งขันใช้
รูปแบบแผ่นไมโคร titer ที่ฮอร์โมนเป็นสารสกัดพลาสม่า FROMA
ตัวอย่างโดยใช้เจลความสัมพันธ์ที่ถูกต้อง-diol เฉพาะ acylated และแก้ไขแล้ว
เอนไซม์ แอนติเจนถูกผูกไว้กับของแข็งของ themicro-titer
แผ่นและมาตรฐาน derivatized ควบคุมตัวอย่างเช่นเดียวกับ
เฟสของแข็งวิเคราะห์ผูกพันในการแข่งขันสำหรับจำนวนคงที่ของซีรั่มป้องกัน
เว็บไซต์ที่มีผลผูกพัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วิธีการวัสดุ
2.1 . หมายเหตุ
เพื่อศึกษาจริยธรรมตามจรรยาบรรณการใช้สัตว์แนวทาง
นโยบายการวิจัยของมหาวิทยาลัยมาเลเซีย .
2.2 . สัตว์ทดลอง , สวยงามและฆ่า
ทั้งหมด 80 ชายนิวซีแลนด์กระต่ายขาวหนักระหว่าง
1800 กรัมและ 2000 กรัม ได้จากฟาร์มเชิงพาณิชย์ ( บริษัท
กระต่ายเอเชียตะวันออก ) ตั้งอยู่ในเซเมนยิ ทางตะวันตกของมาเลเซียกระต่าย
แบ่งออกเป็นสองกลุ่มของสัตว์แต่ละ 40 และต้องให้
แก๊สสวยงาม ( GS ) หรือฮาลาลฆ่า ( HS ) ขั้นตอนการฆ่าคือ
ดำเนินการที่โรงฆ่าสัตว์ ภาควิชาสัตวศาสตร์ คณะ
การเกษตร มหาวิทยาลัยปุตรา มาเลเซีย ในวิธีการฮาลาล ( HS ) ,
40 สัตว์ถูกมนุษย์ฆ่าตาม
ฆ่าฮาลาลขั้นตอนที่ระบุในมาเลเซียมาตรฐาน ms1500:2009
( มาตรฐานกรมมาเลเซีย , 2009 ) สัตว์ที่ถูกฆ่าโดยผู้ชายฆ่า
ได้รับใบอนุญาตโดยการบีบคอ
, เส้นเลือดดำใหญ่ ขยายหลอดลม และหลอดอาหาร เส้นประสาทวากัสก็ตัดขาด .
เพื่อที่จะดำเนินก๊าซที่สวยงาม ( GS ) , กลุ่มของกระต่ายสิบ
วางไว้ในห้องรมแก๊สที่มี CO2 61.4 % , 20.3 % O2 และ 18.29 % N2
5 นาทีต่อมามีสัตว์ทั้งหมด 40 การระบายเลือดส่วนเกินจากซาก
.
2.3 ตัวอย่างเลือดเพื่อหาค่า
( วิเคราะห์พารามิเตอร์ bloodwas
เก็บจากเส้นเลือดดำของสิบสุ่มเลือกหูสัตว์มอบหมาย เช่น
กลุ่มควบคุม สัตว์ที่ถูกกักขังในโฆษณาสบาย
กระต่ายและ 5 มิลลิลิตรยับยั้งเลือดที่เก็บจากหู
หลอดเลือดดำโดยใช้ 21 เข็มวัด ที่ไหลหมดตัว , 5 ml ของการผสาน
เลือดได้จากการเจาะเลือดที่คอของสิบสุ่ม
เลือกสัตว์ต่อรักษาทั้งจาก HS และ GS 10 ผู้แทน
ตัวอย่างเลือดต่อรักษาค่าโลหิตวิทยาศึกษา
ในหลอดลิเธียม heparin ก่อนแช่เย็นและส่งไปยัง
โลหิตวิทยาทางห้องปฏิบัติการ คณะสัตวแพทย์มหาวิทยาลัย
มาเลเซียได้ภายในเวลาไม่ถึง 2 ชั่วโมง ตัวอย่างการวิเคราะห์ฮอร์โมน
เก็บตัว EDTA หลอดก่อนแช่เย็นก่อนที่ระดับที่ 800 g
15 นาทีที่อุณหภูมิ 4 องศา พลาสมาผลออกเป็นเฉยๆ
เก็บไว้ที่อุณหภูมิ 80 องศา C −จนถึงการวิเคราะห์ที่ตามมา
2.4 . ซากตัวอย่าง
หลังจาก evisceration dressing ซากประมาณ 20 กรัม
แพทยศาสตร์ ( BF ) กล้ามเนื้อจากขาหลังซ้าย ถูกรวบรวมอย่างถูกต้อง
ป้ายสูญญากาศบรรจุและเก็บไว้ใน 4 ° C และ หาการสูญเสีย
หยด ( honikel , 1998 ) การ lumborum ซ้ายโค ( ll )
ระหว่าง 6 และ 8 บริเวณกระดูกสันหลังถูกเอาออก และแบ่งเป็น 2
และแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวถ่ายก่อนที่จะถูกเก็บไว้ที่
− 80 °องศาเซลเซียสสำหรับการหาที่ตามมาของพีเอช ( ก่อนตรวจสอบ ) และไกลโคเจน
เนื้อหาและลดลงของดัชนี ( MFI ) ที่ d 0 ซาก
แล้วแขวนใน 4 ° C และเย็น หลังจากตัดออกๆ เนื้อเยื่อเกี่ยวพันเนื้อเยื่อ
มองเห็นกล้ามเนื้อจะถูกถูกชำแหละ ( 6
8 9 10 และ 11 – 12 บริเวณกระดูกสันหลัง ) ใน 3 ช่วงเวลาที่เฉพาะเจาะจง
คือ 1 , 7 และ 14 D การชันสูตรศพ ตามลำดับสูญญากาศบรรจุและ
เก็บไว้ใน− 80 ° C ช่องแช่แข็งจนต่อมาวิเคราะห์ pH , สี ,
แรงเฉือนและการสูญเสียอาหาร ด้านซ้ายจะกล้ามเนื้อจาก 9 ถึง 12
เอวชิ้นถูกผ่าออกเป็นสามส่วนที่เฉพาะเจาะจงระยะเวลา
1 , 7 และ 14 D ชันสูตรศพเพื่อการวิเคราะห์ที่ตามมาของ MFI .
2.5 การตอบสนองทางสรีรวิทยาความเครียด
การตอบสนองความเครียดทางสรีรวิทยา ( ตัวชี้วัดสวัสดิภาพสัตว์ )
กำหนดผ่านพลาสม่าแคทีโคลามีน ( adrenaline และ noradrenaline )
เช่นเดียวกับทางชีวเคมี และทางพารามิเตอร์ ชีวเคมี
และพารามิเตอร์ ( คำนวณโดยใช้วิธีของ nakyinsige sazili
, et al . ( 2013 ) พารามิเตอร์ทางชีวเคมี ( alanine aminotransferase ( ALT )
, aspartate aminotransferase ( AST )
lactate dehydrogenase ( LDH ) , creatine kinase ( CK ) , กลูโคส , lactate , ยูเรีย , โปรตีนและแคลเซียม ) ซึ่งรวม

ใช้วิเคราะห์อัตโนมัติ ( อัตโนมัติวิเคราะห์ 902 Hitachi , เยอรมนี ) สารเคมีที่ใช้ทั้งหมด
จากโรช ( ฮิตาชิ ) hemogram ทั้งหมด ( บรรจุปริมาณเซลล์ ( PCV )
เม็ดเลือดแดงฮีโมโกลบิน เซลล์เม็ดเลือดแดง ( rbcs ) , เซลล์เม็ดเลือดขาว
( wbcs )และ เม็ดเลือดขาว ) ตั้งใจใช้วิเคราะห์โลหิตวิทยา
อัตโนมัติ ( เซลล์มนุษย์® 3700 , เจ้าอาวาส , USA ) โดยใช้แพคเกจซอฟต์แวร์สัตวแพทย์
. การวิเคราะห์เชิงปริมาณของ adrenaline ( epinephrine )
เนื้อหาในเลือด โดยใช้เอนไซม์ adrenaline พลาสมา -
ลิงค์ immunosorbent assay ( ELISA ) ไวสูงชุด#บา e-4100
( เนื่องจาก® , เยอรมนี ) ในขณะที่ noradrenaline ( norepinephrine ) ปริมาณ
ได้ดำเนินการโดยใช้ noradrenaline พลาสมา ELISA ไวสูงชุด#
e-4200 ( เนื่องจาก® , เยอรมัน ) การแข่งขันใช้วิธีไมโครไตเตอร์เพลท
ชุดรูปแบบที่ฮอร์โมนสกัดจากพลาสมา
ตัวอย่างเฉพาะกลุ่ม CIS ไดออลเจล acylated และแก้ไขแล้ว
enzymatically . แอนติเจนที่ถูกผูกไว้กับของแข็งเฟสของ themicro
: จานและ derivatized มาตรฐานการควบคุมตัวอย่างรวมทั้ง
เฟสของแข็งผูกพันกรณีแข่งขันกันเพื่อกำหนดจำนวนแต้มเซรั่ม
ผูกพันเว็บไซต์