Eleven g of cheese was homogenized (1:10 v/v) with 3M™Flip-Top Butterfield's Buffer (3M, St. Paul, MN, USA) in a stomacher for 2 min at 260 rpm. Starters were enumerated in MRS agar (Difco BD, Franklin Lakes, NJ, USA). Lactobacillus spp. were enumerated in Rogosa SL agar (Difco BD). Non-starter lactic acid bacteria (NSLAB) were enumerated in Rogosa SL agar (Difco BD) with 6% (w/w) sodium chloride, this medium does not allow the growth of Lb. helveticus (Johnson M.E., unpublished results). Allplates were incubated at 32 _C for 3 days anaerobically. For DNA extraction, homogenized cheese (30 ml) was centrifuged 5 min at 800 g at 4 _C. Ten ml of the supernatant were collected in a sterile 15 ml tube and centrifuged 10 min at 12,000 g at 4 _C. Cell pelletwas washed with 1ml of Butterfield's Buffer (3M) and centrifuged. DNA was isolated with DNeasy Blood & Tissue Kit (Qiagen) according to the manufacture instructions with minor changes. Lysozyme and proteinase K treatment were prolonged to 1 h.
Eleven g of cheese was homogenized (1:10 v/v) with 3M™Flip-Top Butterfield's Buffer (3M, St. Paul, MN, USA) in a stomacher for 2 min at 260 rpm. Starters were enumerated in MRS agar (Difco BD, Franklin Lakes, NJ, USA). Lactobacillus spp. were enumerated in Rogosa SL agar (Difco BD). Non-starter lactic acid bacteria (NSLAB) were enumerated in Rogosa SL agar (Difco BD) with 6% (w/w) sodium chloride, this medium does not allow the growth of Lb. helveticus (Johnson M.E., unpublished results). Allplates were incubated at 32 _C for 3 days anaerobically. For DNA extraction, homogenized cheese (30 ml) was centrifuged 5 min at 800 g at 4 _C. Ten ml of the supernatant were collected in a sterile 15 ml tube and centrifuged 10 min at 12,000 g at 4 _C. Cell pelletwas washed with 1ml of Butterfield's Buffer (3M) and centrifuged. DNA was isolated with DNeasy Blood & Tissue Kit (Qiagen) according to the manufacture instructions with minor changes. Lysozyme and proteinase K treatment were prolonged to 1 h.
การแปล กรุณารอสักครู่..

11 กรัมชีสมันบด ( 1 : 10 v / v ) กับ 3M ™พลิกยอดฟีลด์เป็นบัฟเฟอร์ ( 3M , St . Paul , MN , USA ) ในแผงประดับหน้าอกสำหรับ 2 นาทีที่ 260 รอบต่อนาที เริ่มถูกระบุใน MRS agar ( difco BD Franklin Lakes , NJ , USA ) Lactobacillus spp . ) ที่ระบุใน rogosa SL ( difco BD )ไม่เชื้อแบคทีเรียกรดแล็กติก ( nslab ) ระบุใน rogosa SL ( difco BD ) กับ 6 % ( w / w ) โซเดียมคลอไรด์ สื่อประเภทนี้ไม่อนุญาตให้มีการเจริญเติบโตของปอนด์ helveticus ( จอห์นสันชันสูตรผลลัพธ์ที่พิมพ์ ) allplates อุณหภูมิ 32 _c 3 วันพ . การสกัดดีเอ็นเอ บดชีส ( 30 ml ) คือระดับ 5 นาที 800 กรัมที่อุณหภูมิ 4 _c .มิลลิลิตรในสิบของจำนวนในการฆ่าเชื้อสูง 15 ml หลอดไฟฟ้า 10 นาทีที่ 12 , 000 กรัม 4 _c เซลล์ pelletwas ล้างด้วย 1ml ของบัตเตอร์ฟิลด์เป็นบัฟเฟอร์ ( 3M ) และที่ระดับ . ดีเอ็นเอที่แยกกับ dneasy เลือด&เนื้อเยื่อชุด ( เพิ่ม ) ตามการผลิตคำแนะนำที่มีการเปลี่ยนแปลงเล็กน้อย ไลโซไซม์และการรักษาอยู่เป็นเวลานานถึง 1 ชั่วโมง เค โปร
การแปล กรุณารอสักครู่..
