2.2.1. Sample preparationThe cells

2.2.1. Sample preparation
The cells are seeded the day before analysis at 5–20  103 cells
in 100 ll per well in 96-well plates. After induction of cell death,
50 ll of cell supernatant is transferred to a new 96-well plate for
the LDH assay (see below), while the source 96-well plate containing
the cells is used for crystal violet staining at a pre-defined time.
After several gentle washes with PBS (up to 5 times), 100 ll of 0.1%
crystal violet solution is added to each well and the plate is incubated
at room temperature for 30 min. After several washes with
PBS (up to 10 times), 100 ll of acetic acid (33%) is added to each
well to dissolve the stained cells. Gently shaking the plates can
speed up the solubilization. Finally, absorbance is measured at
595 nm in a plate reader.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.2.1. ตัวอย่างเซลล์มี seeded วันก่อนวิเคราะห์ที่เซลล์ 5-20 103ใน 100 จะต่อดีในแผ่น 96-ดี หลังจากการเหนี่ยวนำของเซลล์ตาย50 ของ supernatant เซลล์จะถูกโอนย้ายไปแผ่น 96 ดีใหม่สำหรับทดสอบ LDH (ดูด้านล่าง), ในขณะที่ต้นฉบับแผ่น 96 ดีประกอบด้วยเซลล์ที่ใช้สำหรับคริสตัลไวโอเลตย้อมสีในเวลาที่กำหนดไว้ล่วงหน้าหลังจากหลายอ่อนโยน washes ด้วย PBS (ถึง 5 ครั้ง), 100 ll ของ 0.1%โซลูชันคริสตัลไวโอเลตเพิ่มให้แต่ละดีและจาน incubatedที่อุณหภูมิห้องสำหรับ 30 นาที หลังจาก washes หลายด้วยPBS (ถึง 10 เท่า), 100 ของกรดน้ำส้ม (33%) จะถูกเพิ่มเข้าไปแต่ละด้วยการละลายเซลล์ทิ้งคราบ ค่อย ๆ เขย่าแผ่นสามารถเร็วการ solubilization ในที่สุด วัด absorbance ที่595 nm ในเครื่องอ่านแผ่น

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.2.1 การเตรียมตัวอย่าง
เซลล์ที่มีเมล็ดวันก่อนการวิเคราะห์ที่ 5-20? 103 เซลล์
ใน 100 LL ต่อดีในแผ่น 96 หลุม หลังจากที่เหนี่ยวนำการตายของเซลล์,
50 LL ของสารละลายเซลล์ถูกโอนไปยังจาน 96 ช่องใหม่สำหรับ
การทดสอบ LDH (ดูด้านล่าง) ในขณะที่แหล่งที่มาของแผ่น 96 หลุมที่มี
เซลล์ที่ใช้สำหรับการย้อมสีม่วงคริสตัลที่กำหนดไว้ล่วงหน้า เวลา.
หลังจากล้างอ่อนโยนหลายกับพีบีเอส (ไม่เกิน 5 ครั้ง), 100 LL 0.1%
แก้ปัญหาคริสตัลสีม่วงจะถูกเพิ่มในแต่ละดีและแผ่นที่มีการบ่ม
ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 30 นาที หลังจากล้างหลายกับ
พีบีเอส (ไม่เกิน 10 ครั้ง), 100 LL ของกรดอะซิติก (33%) จะถูกเพิ่มในแต่ละ
ดีในการละลายเซลล์ย้อมสี ค่อยๆสั่นแผ่นสามารถ
เพิ่มความเร็วในการละลาย สุดท้ายเป็นวัดการดูดกลืนแสงที่
595 นาโนเมตรในเครื่องอ่านแผ่น

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.2.1 . ตัวอย่างการเตรียม
เซลล์เมล็ดก่อนวันที่ 5 – 20 การวิเคราะห์  103 เซลล์
100 จะต่อใน 96 ด้วยแผ่น หลังจากการเหนี่ยวนำให้เซลล์ตาย
50 จะนำเซลล์มาเป็นจานใหม่ 96 ดี
3 หลัง ( ดูด้านล่าง ) ส่วนแหล่ง 96 ดีจานที่มี
เซลล์ใช้คริสตัลสีม่วงย้อมในเวลาที่กำหนดไว้ล่วงหน้า .
หลังจากหลายอ่อนโยนล้างด้วย pbs ( ถึง 5 ครั้ง ) , 100 จะ 0.1 %
คริสตัลสีม่วงโซลูชั่นเพิ่มแต่ละอย่างดีและจานถูกบ่ม
ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 30 นาที หลังจากหลายตัวกับ
PBS ( ถึง 10 เท่า ) , 100 จะของกรด ( ร้อยละ 33 ) เพิ่ม แต่ละ
ก็ละลายย้อมเซลล์ ค่อย ๆเขย่าจานสามารถ
เพิ่มความเร็วในขณะ ในที่สุด ค่าวัดที่
595 nm ในการอ่านแผ่น .