2. Materials and methods2.1. Materi

2. Materials and methods
2.1. Materials
Bovine serum albumins are biological reagent with purity of more than 98.0%
by weight, which were bought from Sinopharm Chemical Reagent Shanghai Co.,
Ltd. Protein concentrations were measured using the BCA protein assay kit (Biocolor
BioScience and Technology, Shanghai, China). All other chemicals were of analytical
grade. Chrysoidine was obtained from Aladdin Reagent (Shanghai, China). NaH2PO4-
2H2O and Na2HPO412H2O were produced by Tianjin Kermel Chemical Reagent Co.,
Ltd. A mixture solution of NaH2PO4 and Na2HPO4 (pH 7.4, 0.2 mol L1
) was used to
control the pH. All solutions were prepared with ultrapure water.
2.2. Isothermal titration calorimetry
In order to investigate the binding affinity constant, binding stoichiometry,
enthalpy changes and entropy changes of interactions between chrysoidine and
BSA, ITC experiments were carried out with a Microcal ITC200 microcalorimeter
at 298 K. Approximately 40 lL of BSA (0.198 mM) were titrated into a buffermatched
chrysoidine solution (200 lL, 0.340 mM) with stirring speed fixed at
1000 rpm. The first drop was set to 0.4 lL followed by 13 subsequent 3 lL injections.
To achieve complete equilibration, the spacing time between each injection
was set to 120 s.
0

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการ2.1. วัสดุAlbumins ซีรั่มวัวเป็นรีเอเจนต์ชีวภาพ มีความบริสุทธิ์มากกว่า 98.0%โดยน้ำหนัก ซึ่งถูกซื้อจาก Sinopharm เคมีรีเอเจนต์เซี่ยงไฮ้ จำกัดความเข้มข้นของโปรตีนจำกัดถูกวัดโดยใช้ชุดทดสอบโปรตีน BCA (Biocolorวิทยาศาสตร์ชีวภาพและเทคโนโลยี เซี่ยงไฮ้ จีน) สารเคมีอื่น ๆ ได้วิเคราะห์เกรด Chrysoidine ได้รับจากรีเอเจนต์ Aladdin (เซี่ยงไฮ้ จีน) NaH2PO4-2H2O และ Na2HPO412H2O ผลิต โดยเทียนจิน Kermel เคมีรีเอเจนต์ จำกัดจำกัด โซลูชั่นส่วนผสมของ Na2HPO4 และ NaH2PO4 (pH 7.4, 0.2 โมล L1) ที่ใช้ในการควบคุม pH โซลูชั่นทั้งหมดได้เตรียมน้ำ ultrapure2.2 การการไทเทรต isothermal calorimetryการตรวจสอบค่าคงความสัมพันธ์ผูก ผูก stoichiometryความร้อนแฝงเปลี่ยนแปลงและการเปลี่ยนแปลงเอนโทรปีของการโต้ตอบระหว่าง chrysoidine และบีเอสเอ ซีทดลองได้ดำเนินการกับ microcalorimeter Microcal ITC200ที่ 298 คุณประมาณ 40 จะของบีเอสเอ (0.198 mM) ถูก titrated เข้า buffermatchedchrysoidine โซลูชั่น (200 จะ 0.340 mM) กับกวนความเร็วคงที่1000 รอบต่อนาที ฝากครั้งแรกถูกตั้งค่าเป็น 0.4 จะตาม ด้วย 13 ตามมา 3 จะฉีดเพื่อให้บรรลุสมบูรณ์ equilibration เวลาระยะห่างระหว่างการฉีดแต่ละถูกตั้งค่าเป็น 120 s0

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ
2.1 วัสดุ
albumins โคเซรั่มที่มีสารชีวภาพที่มีความบริสุทธิ์มากกว่า 98.0%
โดยน้ำหนักซึ่งถูกซื้อมาจากสารเคมี Sinopharm เซี่ยงไฮ้ Co. ,
Ltd. ความเข้มข้นของโปรตีนที่ถูกวัดโดยใช้ชุดทดสอบโปรตีน BCA (Biocolor
ชีววิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีเซี่ยงไฮ้ประเทศจีน) สารเคมีอื่น ๆ
ทั้งหมดเป็นของการวิเคราะห์ชั้นประถมศึกษาปี chrysoidine ที่ได้รับจากอรีเอเจน (เซี่ยงไฮ้) NaH2PO4-
2H2O และ Na2HPO412H2O ถูกผลิตโดยเทียนจิน KERMEL สารเคมี Co. ,
Ltd. วิธีการแก้ปัญหามีส่วนผสมของ NaH2PO4 และ Na2HPO4 (pH 7.4, 0.2 mol
L1) ถูกใช้ในการควบคุมค่า pH
โซลูชั่นทั้งหมดถูกปรุงด้วยน้ำบริสุทธิ์.
2.2 calorimetry ไตเตรท isothermal
เพื่อที่จะตรวจสอบความสัมพันธ์ผูกพันคงปริมาณสารสัมพันธ์ผูกพันการเปลี่ยนแปลงเอนทัลปีและการเปลี่ยนแปลงเอนโทรปีของการมีปฏิสัมพันธ์ระหว่าง chrysoidine และ BSA ทดลอง ITC ได้ดำเนินการกับ microcalorimeter Microcal ITC200 ที่ 298 เคประมาณ 40 LL ของบีเอสเอ (0.198 มิลลิเมตร) ถูกปรับขนาดเป็น buffermatched แก้ปัญหา chrysoidine (200 LL, 0.340 มิลลิ) ด้วยความเร็วกวนคงที่1,000 รอบต่อนาที ลดลงเป็นครั้งแรกที่ตั้ง 0.4 จะตามมาด้วย 13 ตามมาจะฉีด 3. เพื่อให้เกิดความสมดุลที่สมบูรณ์เป็นครั้งระยะห่างระหว่างการฉีดแต่ละถูกกำหนดให้ 120 วินาที. 0

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ
2.1 . วัสดุทางชีวภาพที่ใช้เซรั่ม
วัวลบูมินเป็นมีความบริสุทธิ์มากกว่า 98.0 %
โดยน้ำหนักซึ่งซื้อจาก sinopharm สารเคมีเซี่ยงไฮ้ Co . ,
จำกัดโปรตีนความเข้มข้นวัดใช้ BCA โปรตีนต่อชุด ( biocolor
วิทยาศาสตร์ชีวภาพและเทคโนโลยี , เซี่ยงไฮ้ , จีน ) สารเคมีอื่น ๆทั้งหมดถูกวิเคราะห์
เกรดchrysoidine ได้จาก Aladdin รีเอเจนต์ ( เซี่ยงไฮ้ , จีน ) nah2po4 -
2H2O-dx na2hpo412h2o และถูกผลิตโดยเทียนจินเคอร์เมลสารเคมี Co . ,
จำกัด ผสมแก้ไขและ nah2po4 na2hpo4 ( pH 7.4 0.2 mol l1

) ใช้ควบคุม pH โซลูชั่นทั้งหมดถูกเตรียมน้ำบริสุทธิ์มาก .
2.2 . คำนวณไทเทรตนิง
เพื่อหาความคงที่ผูกความสัมพันธ์การเปลี่ยนแปลงและการเปลี่ยนแปลงปริมาณสารสัมพันธ์
เอนทาลปีเอนโทรปีของปฏิสัมพันธ์ระหว่าง chrysoidine และ
BSA , ITC การทดลองกับ microcal itc200 microcalorimeter
ที่ 298 K . ประมาณ 40 จะของ BSA ( 0.198 มม. ) pH เป็น buffermatched
chrysoidine โซลูชั่น ( 200 จะ 0.340 มม. ) กับความเร็วในการกวนคงที่
1000 รอบต่อนาที น้ำตาหยดแรกถูกตั้งค่าเป็น 04 จะตามมาด้วย 13 ต่อ 3 จะฉีด .
เพื่อให้บรรลุ equilibration สมบูรณ์ ระยะเวลาระหว่างแต่ละฉีด
ถูกตั้งไว้ 120
0 S