AbstractpH gradient protein separat

Abstract
pH gradient protein separations are widely used techniques in the field of protein analytics, of which isoelectric focusing is the most well known application. The chromatographic variant, based on the formation of pH gradients in ion exchange columns is only rarely applied due to the difficulties to form controllable, linear pH gradients over a broad pH range. This work describes a method for the systematic generation of buffer compositions with linear titration curves, resulting in well controllable pH gradients. To generate buffer compositions with linear titration curves an in silico method was successfully developed. With this tool, buffer compositions for pH gradient ion exchange chromatography with pH ranges spanning up to 7.5 pH units were established and successfully validated. Subsequently, the buffer systems were used to characterize the elution behavior of 22 different model proteins in cation and anion exchange pH gradient chromatography. The results of both chromatographic modes as well as isoelectric focusing were compared to describe differences in between the methods.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

นามธรรมการแยกโปรตีน
ph ลาดใช้กันอย่างแพร่หลายในด้านเทคนิคของการวิเคราะห์โปรตีนซึ่ง isoelectric มุ่งเน้นเป็นโปรแกรมที่รู้จักกันดีที่สุด โครที่แตกต่างบนพื้นฐานของการก่อตัวของการไล่ระดับสี ph ในคอลัมน์แลกเปลี่ยนไอออนเป็นเพียงไม่ค่อยนำมาใช้เนื่องจากความยากลำบากในรูปแบบที่สามารถควบคุมการไล่ระดับสี ph เชิงเส้นในช่วง ph กว้างงานนี้อธิบายถึงวิธีการในการสร้างระบบขององค์ประกอบบัฟเฟอร์ที่มีเส้นโค้งไตเตรทเชิงเส้นที่มีผลในการไล่ระดับสี ph ควบคุมได้ดี เพื่อสร้างองค์ประกอบบัฟเฟอร์ที่มีเส้นโค้งไตเตรทเชิงเส้นในการ silico ได้รับการพัฒนาที่ประสบความสำเร็จ ด้วยเครื่องมือนี้องค์ประกอบบัฟเฟอร์ ph ลาดโคแลกเปลี่ยนไอออนที่มีช่วง ph ทอดถึง 75 หน่วย ph เป็นที่ยอมรับและประสบความสำเร็จในการตรวจสอบ ต่อมาระบบบัฟเฟอร์ถูกนำมาใช้พฤติกรรมลักษณะจำเพาะของโปรตีน 22 รูปแบบที่แตกต่างกันในไอออนบวกและไอออนแลกเปลี่ยน ph โคลาด ผลของทั้งสองโหมดโครเป็น isoelectric เน้นถูกนำมาเปรียบเทียบเพื่ออธิบายความแตกต่างในระหว่างวิธี.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

นามธรรม
ประโยชน์โปรตีนไล่ระดับค่า pH เป็นเทคนิคที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในการวิเคราะห์โปรตีน ซึ่ง isoelectric เน้นเป็นที่สุดรู้จักประยุกต์ ตัวแปร chromatographic ตามการก่อตัวของ ไล่ระดับสีในคอลัมน์แลกเปลี่ยนไอออนเท่านั้นไม่ค่อยใช้เนื่องจากความยากลำบากแบบไล่ระดับสีแบบเส้นตรง ควบคุมค่า pH ค่า pH กว้างช่วง งานนี้อธิบายวิธีการสำหรับการสร้างระบบบัฟเฟอร์เท่ากับการไทเทรตเส้นโค้ง ในค่า pH ที่ดีควบคุมไล่ระดับสี การสร้างบัฟเฟอร์เท่ากับเส้นโค้งของการไทเทรตเชิง silico การใน วิธีสำเร็จกล่าว ด้วยเครื่องมือ กันชนองค์สำหรับ chromatography สารกรองไล่ระดับค่า pH ด้วย pH ช่วงรัฐถึง 7หน่วย pH 5 ได้ก่อตั้งขึ้น และตรวจสอบเรียบร้อยแล้ว ในเวลาต่อมา ระบบบัฟเฟอร์ที่ใช้กำหนดลักษณะพฤติกรรม elution ของโปรตีนรูปแบบต่าง ๆ 22 ใน cation และ anion exchange ค่า pH ไล่ระดับ chromatography ผลลัพธ์ของทั้งโหมด chromatographic ตลอดจนเน้น isoelectric ได้เปรียบเทียบเพื่ออธิบายความแตกต่างระหว่างวิธีการ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ค้าปลีกการไล่ระดับสี
ซึ่งจะช่วยค่า pH โปรตีนได้มีการใช้กันอย่างแพร่หลายเป็นนามธรรมใช้เทคนิคในการวิเคราะห์ของโปรตีนที่ isoelectric เน้นมากที่สุดคือแอปพลิเคชันที่มีชื่อเสียงได้ เบนซ์ chromatographic ที่ใช้ในการก่อตัวขึ้นของการไล่สี pH ในคอลัมน์แลกเปลี่ยนไอออนเป็นสิ่งที่แทบจะไม่เกิดขึ้นนำไปใช้เนื่องจากปัญหาเพื่อไปที่แบบฟอร์มการไล่สี pH linear สามารถควบคุมได้มากกว่าช่วง pH กว้างเท่านั้นงานนี้จะอธิบายถึงวิธีการที่สำหรับรุ่นของบทเพลงพระราชนิพนธ์อย่างเป็นระบบที่มีความโค้งมนบัฟเฟอร์วิเคราะห์(วัตถุตามแนวยาวทำให้ในการไล่สี pH สามารถควบคุมได้อย่างดี ในการสร้างส่วนประกอบบัฟเฟอร์พร้อมด้วยโค้งวิเคราะห์(วัตถุตามแนวยาวในวิธีการ silico สำเร็จแล้วพัฒนา พร้อมด้วยบทเพลงพระราชนิพนธ์บัฟเฟอร์สำหรับเครื่องมือนี้สำหรับค่า pH chromatography แลกเปลี่ยนไอออนการไล่ระดับสีพร้อมด้วยโปรโตคอล spanning tree ช่วงค่า pH สูงถึง 7ชุด 5 pH ถูกสร้างขึ้นและประสบความสำเร็จได้รับการทดสอบ ภายหลัง ระบบ Buffer ที่ได้ถูกนำมาใช้เพื่อแสดงลักษณะพฤติกรรม elution ที่ 22 โปรตีนรุ่นที่แตกต่างออกไปในการไล่ระดับสี pH chromatography แลกเปลี่ยนธาตุและประจุลบ ผลที่ได้จากโหมด chromatographic และ isoelectric โดยเน้นการปรับทั้งสองเป็นเมื่อเทียบกับการอธิบายถึงความแตกต่างในระหว่างวิธีการ.