order to investigate the insecticid

order to investigate the insecticidal activities, cry2Al1 gene was expressed in E. coli BL21 (DE3) pLysS. The transformant E. coli BL21 (DE3) pLysS cells were selected using ampicillin containing LB medium and further characterized by PCR and restriction diges- tion followed by SDS PAGE analysis. The cry2Al1 gene was expressed as 65 kDa. However the expected molecular weight from the sequence was 70 kDa. One possible explanation was that Cry2Al1 contains only three cysteines (0.5% of total amino acids), and thus E. coli proteases may easily digest the expressed protein, as earlier reported by Zheng et al. (2010). Among all the Cry pro- teins, Cry1-type proteins have been broadly applied in transgenic plants to render crops resistant to insect pests. Problems of narrow insecticidal range and insect resistance have been observed owing to prolonged use of high concentrations of a solitary Bt toxin (Romeis et al., 2006; Akhurst et al., 2003; Gassmann et al., 2011,
2014). Cry2A toxins are of much importance because of their size, (approximately 65–70 kDa) and wide range of insecticidal activity. Cry2Aa (Winder and Whiteley, 1989; Donovan et al., 1988) and Cry2Ag (Zheng et al., 2010) are toxic to lepidopteran and dipteran larvae, while Cry2Ab (Winder and Whiteley, 1989; Dankocsik et al.,
1990) and Cry2Ac (Wu et al., 1991) have been reported toxic only to lepidopteran species. Moreover, it has been also reported that Cry1A did not share binding sites with Cry2A in brush border membrane vesicles from Lepidopteran pests (Karim and Dean,
2000; Alcantara et al., 2004). Thus, the isolation of new Cry pro- teins with varied sequence, higher toxicity and broader range of pests will be vital to overcome these problems. In the present study, Cry2Al1 showed promising larvicidal activity against S. litura
(LC50 = 2.448 lg/ml) and H. armigera (LC50 = 3.374 lg/ml). Recently
Zheng et al. (2010) reported Cry2Ag1 protein with insecticidal tox- icity towards H. armigera (LC50 = 9.745 lg/ml), Plutella xylostella (LC50 = 23.478 lg/ml) and Aedes aegypti (LC50 = 2.541 lg/ml) pests. Hire et al. (2009) reported the LC50 values of Cry2Aa14 protein against S. litura and H. armigera as 694 ng/cm2 and 122 ng/cm3
respectively. Lenin et al. (2001) reported a Cry2Aa protein which had shown 71.4% mortality and severe (81–99%) inhibition in lar- val growth of H. armigera on the seventh day at the concentration of 2.3 lg/ll. Besides in transgenic cotton plants Cry2Ab/Cry2Ae has been incorporated in addition to the Cry1A as a resistance manag-
ing mechanism (Christou et al., 2006; https://www.isaaa.org).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สั่งการตรวจสอบกิจกรรม insecticidal ยีน cry2Al1 ได้แสดงออกใน E. coli BL21 (DE3) pLysS Transformant E. coli BL21 (DE3) pLysS เซลล์ถูกเลือกใช้โกคอที่ประกอบด้วยปอนด์กลาง และลักษณะเพิ่มเติม โดย PCR และจำกัด diges-ทางการค้าตาม ด้วย SDS หน้าวิเคราะห์ ยีน cry2Al1 ถูกแสดงเป็น 65 kDa อย่างไรก็ตาม น้ำหนักโมเลกุลคาดจากลำดับถูก 70 kDa หนึ่งสามารถอธิบายได้ว่า Cry2Al1 ประกอบด้วยสาม cysteines (0.5% ของกรดอะมิโนรวม), และดังนั้น โปรตีเอส E. coli อาจง่ายย่อยโปรตีนแสดง ตามรายงานก่อนหน้านี้โดยเจิ้ง et al. (2010) ในบรรดาทั้งหมดร้อง pro-teins, Cry1 ชนิดโปรตีนมีการอย่างกว้างขวางใช้ในพืชจำลองจะทำให้พืชทนต่อแมลงศัตรูพืช ปัญหาช่วง insecticidal แคบและต้านทานแมลงได้รับการปฏิบัติเนื่องจากความเข้มข้นของสารพิษ Bt โดดเดี่ยว (Romeis et al. 2006 สูงใช้เวลานาน Akhurst et al. 2003 Gassmann et al. 20112014) สารพิษ Cry2A มีความสำคัญมากเนื่องจากขนาดของพวกเขา, (ประมาณ 65-70 kDa) และหลากหลายกิจกรรม insecticidal Cry2Aa (ม้วนและ Whiteley, 1989 โดโนแวน et al. 1988) และ Cry2Ag (เจิ้ง et al. 2010) มีพิษต่อ lepidopteran และ dipteran อ่อน ขณะ Cry2Ab (ม้วนและ Whiteley, 1989 Dankocsik et al.,ปี 1990) และ Cry2Ac (Wu et al. 1991) ได้รายงานเป็นพิษเท่า lepidopteran พันธุ์ นอกจากนี้ มียังรายงานว่า Cry1A ไม่แบ่งไซต์ผูกกับ Cry2A ในถุงเยื่อหุ้มขอบแปรงจากแมลง Lepidopteran (Karim และคณบดี2000 เซาท์แธมป์ตัน et al. 2004) ดังนั้น แยกของใหม่ Cry pro-teins ลำดับที่แตกต่างกัน ความเป็นพิษสูง และของศัตรูพืชจะเป็นสิ่งสำคัญที่จะเอาชนะปัญหาเหล่านี้ ในการศึกษาปัจจุบัน Cry2Al1 พบกิจกรรม larvicidal สัญญากับ S. litura(LC50 = 2.448 lg/ml) และ H. armigera (LC50 = 3.374 lg/ml) เมื่อเร็ว ๆ นี้เจิ้ง et al. (2010) รายงาน Cry2Ag1 โปรตีน insecticidal tox-icity ต่อ H. armigera (LC50 = 9.745 lg/ml), Plutella xylostella (LC50 = 23.478 lg/ml) และ Aedes aegypti (LC50 = 2.541 lg/ml) ศัตรูพืช เช่า et al. (2009) รายงานค่า LC50 ของโปรตีน Cry2Aa14 S. litura และ H. armigera 694 ฉบับ/cm2 และ 122 ฉบับ/cm3ตามลาดับ เลนิน et al. (2001) รายงานโปรตีน Cry2Aa ซึ่งแสดงเงิน 71.4% อัตราการตายและการยับยั้งรุนแรง (81-99%) โตวาลลาร์ของ H. armigera กับวันเจ็ดที่ความเข้มข้นของ 2.3 lg/ll นอกจากนี้ ในพืชฝ้ายจำลอง Cry2Ab/Cry2Ae ได้ถูก incorporated นอกจาก Cry1A ที่เป็น manag ต้านทาน-ing กลไก (Christou et al. 2006; https://www.isaaa.org)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เพื่อตรวจสอบกิจกรรมฆ่าแมลง, cry2Al1 ยีนที่แสดงออกใน E. coli BL21 (DE3) pLysS transformant E. coli BL21 (DE3) เซลล์ pLysS ได้รับการคัดเลือกโดยใช้ ampicillin ที่มีขนาดกลางและ LB ลักษณะต่อไปโดยวิธี PCR และข้อ จำกัด การ diges- ตามด้วยวิเคราะห SDS ยีน cry2Al1 ถูกแสดงเป็น 65 กิโลดาลตัน อย่างไรก็ตามคาดว่าน้ำหนักโมเลกุลจากลำดับเป็น 70 กิโลดาลตัน คำอธิบายที่เป็นไปได้คือการที่ Cry2Al1 มีเพียงสาม cysteines (0.5% ของกรดอะมิโนรวม) และทำให้เชื้อ E. coli โปรตีเอสได้อย่างง่ายดายอาจย่อยโปรตีนแสดงตามที่รายงานก่อนหน้านี้โดยเจิ้งเหอ et al, (2010) ในทุก teins โปรร้องไห้กลุ่ม cry1 ประเภทโปรตีนที่มีการใช้กันอย่างแพร่หลายในพืชดัดแปรพันธุกรรมที่จะทำให้พืชทนต่อแมลงศัตรูพืช ปัญหาที่เกิดขึ้นในช่วงแคบฆ่าแมลงและความต้านทานต่อแมลงได้รับการปฏิบัติเนื่องจากใช้เวลานานความเข้มข้นสูงของสารพิษบาทโดดเดี่ยว (Romeis et al, 2006;. Akhurst et al, 2003;.. Gassmann et al, 2011,
2014) สารพิษ Cry2A มีความสำคัญมากเพราะขนาดของพวกเขา (โดยประมาณ 65-70 กิโลดาลตัน) และความหลากหลายของกิจกรรมฆ่าแมลง Cry2Aa (Winder ไวท์ลีย์และ 1989. โดโนแวน, et al, 1988) และ Cry2Ag. (เจิ้งเหอ et al, 2010) เป็นพิษต่อ Lepidopteran และตัวอ่อน dipteran ขณะ Cry2Ab (Winder ไวท์ลีย์และ 1989. Dankocsik, et al,
1990) และ Cry2Ac (Wu et al., 1991) ได้รับรายงานที่เป็นพิษเพียงสายพันธุ์ Lepidopteran นอกจากนี้ยังได้รับรายงานว่า Cry1A มิได้มีส่วนร่วมกับเว็บไซต์ที่มีผลผูกพันใน Cry2A แปรงชายแดนถุงเมมเบรนจากศัตรูพืช Lepidopteran (Karim และคณบดี,
2000. Alcantara, et al, 2004) ดังนั้นการแยกเสียงร้องใหม่โปร teins ลำดับที่แตกต่างกัน, ความเป็นพิษสูงขึ้นและช่วงกว้างของศัตรูพืชจะเป็นสิ่งสำคัญที่จะเอาชนะปัญหาเหล่านี้ ในการศึกษาครั้งนี้แสดงให้เห็นว่ากิจกรรม Cry2Al1 ฆ่าลูกน้ำยุงที่มีแนวโน้มกับหนอนกระทู้ผัก
(LC50 = 2.448 LG / ml) และเอช armigera (LC50 = 3.374 LG / ml) เมื่อเร็ว ๆ นี้
เจิ้งเหอ et al, (2010) รายงานโปรตีน Cry2Ag1 กับ icity tox- ฆ่าแมลงที่มีต่อเอช armigera (LC50 = 9.745 LG / ml) วัชรีมีศิลป์ใยผัก (LC50 = 23.478 LG / ml) และยุงลาย (LC50 = 2.541 LG / ml) ศัตรูพืช เช่า et al, (2009) รายงานค่า LC50 ของ Cry2Aa14 โปรตีนกับหนอนกระทู้ผักและเอช armigera เป็น 694 ng / cm2 และ 122 ng / cm3
ตามลำดับ เลนิน, et al (2001) รายงานโปรตีน Cry2Aa ซึ่งได้แสดงให้เห็นการตาย 71.4% และรุนแรง (81-99%) การยับยั้งการเจริญเติบโตใน Val lar- ของเอชหนอนเจาะสมอฝ้ายในวันที่เจ็ดที่ความเข้มข้น 2.3 LG / ของ LL นอกจากนี้ในพืชดัดแปรพันธุกรรมฝ้าย Cry2Ab / Cry2Ae ได้รับการจดทะเบียนนอกเหนือไปจาก Cry1A เป็นความต้านทาน manag-
ไอเอ็นจีกลไก (Christou et al, 2006;. https://www.isaaa.org)