Briefly, the SCHU S4 ΔwbtI mutant was grown in modified Cysteine Heart Agar (CHA) for 24–36 h at 37˚C within a BioSafety (BS) Level 3 containment facility. Bacteria were harvested from plates and lysed using a solution of 5 M urea, 2 M thiourea, 1% DTT, 4% CHAPS, 0.5% ASB-14, as described in our earlier work . Proteins were separated using immobilized pH gradient strips (IPG), linear pH 4–7, 17 cm (Bio-Rad, Hercules, CA) or linear pH 6–11 (GE Healthcare, Piscataway, NJ), using 100 μg of protein/gel.
โดยย่อ S4 SCHU ΔwbtI mutant ถูกปลูกในปรับเปลี่ยน Cysteine หัวใจ Agar (ชะอำ) สำหรับ 24 – 36 h ที่ 37˚C ในการ BioSafety (BS) ระดับ 3 บรรจุสิ่งอำนวยความสะดวก แบคทีเรียเก็บเกี่ยวจากแผ่น และ lysed โดยใช้โซลูชั่นของยูเรีย 5 เมตร 2 เมตร thiourea, 1% DTT, CHAPS 4%, 0.5% เซฟ-14 ตามที่อธิบายไว้ในการทำงานของเราก่อน โปรตีนถูกแยกโดยใช้ค่า pH เอนไซม์ไล่ระดับสีแถบ (IPG), เส้นค่า pH 4 – 7, cm 17 (Bio Rad เฮอร์คิวลิส แคลิฟอร์เนีย) หรือเชิงเส้นค่า pH 6 – 11 (GE สุขอนามัย ปิสกาตาเวย์ NJ), ใช้ μg 100 ของโปรตีน/เจ
การแปล กรุณารอสักครู่..
สั้น ๆ SCHU S4 กลายพันธุ์ΔwbtIเติบโตเป็นผู้ใหญ่ในการแก้ไข Cysteine หัวใจวุ้น (CHA) สำหรับ 24-36 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37C ภายในความปลอดภัยทางชีวภาพ (BS) ระดับที่ 3 สถานที่บรรจุ แบคทีเรียที่ถูกเก็บเกี่ยวจากจานและ lysed โดยใช้วิธีการแก้ปัญหาของยูเรีย 5 เมตร, 2 M thiourea, 1% DTT, CHAPS 4%, 0.5% ASB-14, ตามที่อธิบายไว้ในการทำงานก่อนหน้านี้ของเรา โปรตีนที่ถูกแยกออกโดยใช้แถบลาดค่า pH ตรึง (IPG), พีเอช 4-7 เชิงเส้น, 17 ซม. (Bio-Rad, Hercules, CA) หรือค่า pH 6-11 เชิงเส้น (GE Healthcare, พิสแคต, นิวเจอร์ซีย์), ใช้ 100 ไมโครกรัมของโปรตีน / เจล
การแปล กรุณารอสักครู่..
สั้น ๆ , schu S4 Δ wbti กลายพันธุ์ที่ปลูกในแบบวุ้นหัวใจ 8-12 ( ชา ) 24 - 36 ชั่วโมง 37 ˚ C ภายในความปลอดภัยทางชีวภาพระดับ 3 ( BS ) สิ่งอำนวยความสะดวกในการควบคุม แบคทีเรียถูกเก็บเกี่ยวจากแผ่น และ lysed ใช้สารละลายยูเรีย 2 เมตร 5 เมตร , Thiourea , 1% ส่วน 4% Chaps , 0.5% asb-14 ตามที่อธิบายไว้ในการทำงานก่อน โปรตีน แยกใช้ตรึงแถบไล่ระดับ pH ( IPG ) เชิง pH 4 – 717 ซม. ( ไบโอ ราด , Hercules , CA ) หรือเชิงเส้น พีเอช 6 – 11 ( GE สุขภาพ , Piscataway , NJ ) , ใช้ 100 μกรัมของโปรตีน / เจล
การแปล กรุณารอสักครู่..