2.1. Plant material and aseptic cul

2.1. Plant material and aseptic culture establishment

Three commercial self-heading cultivars of Philodendron (i.e. ‘Imperial Green’, ‘Imperial Red’ and ‘Imperial Rainbow’) were used in the present study. The plants were purchased from a local nursery and sprayed with fungicides Ridomil MZ and Mancozeb (1000× dilution) each for one week prior to explant excision and establishment in vitro. After defoliation, shoot cuttings measuring 5–10 cm long were washed under running tap water for 15 min and divided into single nodal segments each containing a lateral bud. The nodal segments were then surface-sterilized with 70% EtOH for 1 min followed by 1% (v/v) sodium hypochlorite (NaOCl) containing several drops of Tween-20 for 20 min on a rotary shaker. After three rinses with sterile water and removal of the damaged ends, the explants were cultured on MS ( Murashige and Skoog, 1962) medium supplemented with 0.1 mg l−1 of 1-naphthaleneacetic acid (NAA), 1 mg l−1 of 6-benzyladenine (BA), 3% (w/v) of sucrose and 0.7% (w/v) of agar. The pH of the medium was adjusted to 5.7 prior to autoclaving. Cultures were checked regularly for contaminations and those presented apparent infection symptoms were immediately discarded. The outgrowth of the lateral bud (i.e. approximately 2 cm long) was excised from the nodal segments and subcultured on the same medium for further shoot multiplication. Regenerated shoot clusters were divided and subcultured every eight weeks to build up a stock shoot culture. Shoots from the fifth subculture and measuring approximately 3 cm in height were used for the subsequent experiments.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.1 การปลูกวัสดุและการก่อตั้งวัฒนธรรมที่เข้มข้น3 พันธุ์หัวข้อด้วยตนเองเชิงพาณิชย์ของ Philodendron (เช่น 'อิมพีเรียลเขียว' 'อิมพีเรียลแดง' และ 'อิมพีเรียลรุ้ง') ถูกใช้ในการศึกษาปัจจุบัน พืชถูกซื้อจากเรือนเพาะชำท้องถิ่น และฉีดพ่น ด้วยซึ่งเกิดจากเชื้อ Ridomil MZ และ Mancozeb (1000 ×เจือจาง) แต่ละสัปดาห์หนึ่งก่อน explant ตอนการผ่าตัดและในสถานประกอบการ หลังจาก defoliation, cuttings ยิงวัดนาน 5 – 10 ซม.ถูกล้างภายใต้การทำน้ำประปาสำหรับ 15 นาที และแบ่งเซ็กเมนต์ดังเดียวละประกอบด้วยตาด้านข้าง เซ็กเมนต์ดังแล้วถูกผิว sterilized 70% EtOH ใน 1 นาทีตาม ด้วย 1% (v/v) ฟอกขาว (NaOCl) ที่ประกอบด้วย Tween-20 สำหรับ 20 นาทีในเชคเกอร์โรตารี่หลายหยด หลังจาก rinses สามกระบอกน้ำและเอาปลายเสียหาย explants มีอ่างบน MS (Murashige และ Skoog, 1962) สื่อเสริม ด้วย l−1 0.1 มิลลิกรัมของกรด 1-naphthaleneacetic (NAA), l−1 1 มิลลิกรัมของ 6-benzyladenine (BA), 3% (w/v) ของซูโครส และ 0.7% (w/v) ของ agar PH ของตัวกลางมีการปรับปรุงการ 5.7 ก่อน autoclaving วัฒนธรรมถูกตรวจสอบอย่างสม่ำเสมอสำหรับปน และผู้แสดงอาการติดเชื้อที่ชัดเจนได้ถูกยกเลิกทันที ไปตาด้านข้าง (เช่นประมาณ 2 ซม.ยาว) excised จากเซ็กเมนต์ดัง และ subcultured ในสื่อเดียวกันสำหรับการคูณยิงเพิ่มเติม ยิงสร้างคลัสเตอร์ถูกแบ่ง และ subcultured ทุกแปดสัปดาห์สร้างวัฒนธรรมยิงหุ้น ถ่ายภาพจากวัฒนธรรมห้าและวัดความสูงประมาณ 3 ซม.ใช้สำหรับการทดลองภายหลัง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.1 วัสดุโรงงานและสถานประกอบการปลอดเชื้อวัฒนธรรมสามสายพันธุ์การค้าที่จะมุ่งหน้าตนเองของ Philodendron (เช่น 'อิมพีเรียลสีเขียว', 'อิมพีเรียลแดง' และ 'อิมพีเรียลรุ้ง) ถูกนำมาใช้ในการศึกษาในปัจจุบัน พืชที่ซื้อมาจากสถานรับเลี้ยงเด็กท้องถิ่นและฉีดพ่นด้วยสารฆ่าเชื้อรา Ridomil MZ และ Mancozeb (1000 ×เจือจาง) แต่ละหนึ่งสัปดาห์ก่อนที่จะมีการตัดออกชิ้นและสถานประกอบการในหลอดทดลอง หลังจากที่ร่วงยิงตัดวัด 5-10 เซนติเมตรยาวถูกล้างภายใต้การทำงานของน้ำประปาเป็นเวลา 15 นาทีและแบ่งออกเป็นกลุ่มเดียวที่สำคัญแต่ละที่มีตาข้าง ส่วนสำคัญถูกแล้วผิวฆ่าเชื้อด้วย 70% EtOH เวลา 1 นาทีตามด้วย 1% (v / v) โซเดียมไฮโปคลอไรต์ (NaOCl) ที่มีหลายหยด Tween-20 เป็นเวลา 20 นาทีในเครื่องปั่นหมุน หลังจากสามล้างด้วยน้ำสะอาดผ่านการฆ่าเชื้อและการกำจัดของปลายเสียหายชิ้นส่วนที่ถูกเพาะเลี้ยงบน MS (Murashige และ Skoog, 1962) การเสริมขนาดกลางที่มี 0.1 มิลลิกรัมต่อลิตร-1 ของกรด 1 แนปธาลี (NAA) 1 มิลลิกรัม l-1 จาก 6 -benzyladenine (BA), 3% (w / v) และซูโครส 0.7% (w / v) ของวุ้น ค่า pH ของกลางที่ได้รับการปรับให้ 5.7 ก่อนที่จะนึ่งฆ่าเชื้อ วัฒนธรรมได้รับการตรวจสอบอย่างสม่ำเสมอสำหรับการปนเปื้อนและผู้ที่นำเสนอมีอาการติดเชื้อที่ชัดเจนถูกโยนทิ้งทันที ผลพลอยได้ของตาข้าง (คือประมาณ 2 ซม. ยาว) ถูกตัดจากส่วนสำคัญและเลี้ยงในสื่อเหมือนกันสำหรับการคูณยิงต่อไป สร้างใหม่กลุ่มยิงถูกแบ่งออกและเลี้ยงทุกแปดสัปดาห์ในการสร้างวัฒนธรรมหุ้นยิง ถ่ายจากวัฒนธรรมที่ห้าและวัดประมาณ 3 ซม. ความสูงที่ใช้ในการทดลองที่ตามมา

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.1 . วัสดุโรงงานและสถานประกอบการ

3 . วัฒนธรรมเชิงพาณิชย์ของตนเองไปพันธุ์ฟิโลเดนดร ( เช่น ' Imperial สีเขียว ' , ' จักรพรรดิแดง ' และ ' รุ้ง ' อิมพีเรียล ) สถิติที่ใช้ในการศึกษาปัจจุบัน พืชที่ซื้อมาจากสถานที่ท้องถิ่น และฉีดพ่นด้วยสารเคมีแมนโคเซบ ( ridomil MZ และ 1000 ×เจือจาง ) แต่ละหนึ่งสัปดาห์ก่อนที่จะตัดการต่อหลอดหลังจากตัดยิงตัดวัด 5 – 10 เซนติเมตร ถูกล้างภายใต้น้ำสำหรับวิ่ง 15 นาทีและแบ่งออกเป็นส่วนข้อเดียวที่แต่ละที่มีดอกตูมด้านข้าง ส่วนข้อ แล้วฆ่าเชื้อที่ผิวด้วยแอลกอฮอล์ 70% 1 นาทีตามด้วย 1% ( v / v ) โซเดียมไฮโปคลอไรต์ ( ไม่ระบุ ) ที่มีหลายหยด tween-20 20 นาทีบนเครื่องปั่นหมุนหลังจากที่สาม rinses น้ำฆ่าเชื้อและการกำจัดปลายเสียหาย , อาหารเพาะเลี้ยงบนอาหารสูตร MS ( Murashige และ Skoog , 1962 ) ที่เติม 0.1 mg L − 1 ของบลูเบิร์ด ( NAA ) 1 mg L − 1 6-benzyladenine ( BA ) 3% ( w / v ) และ 0.7% ของน้ำตาลซูโครส ( w / v ) ของวุ้น พีเอชของอาหารปรับระดับก่อนอัตราส่วนโฟกัส .วัฒนธรรมที่ถูกตรวจสอบอย่างสม่ำเสมอสำหรับการปนเปื้อนและผู้ที่นำเสนอชัดเจนการติดเชื้ออาการทันทีทิ้ง ส่วนผลพลอยได้ของดอกตูมด้านข้าง ( เช่นประมาณ 2 ซม. ) ถูกตัดจากส่วนที่เป็นปุ่ม subcultured ในตัวกลางเดียวกันและการคูณยิงต่อไปกลุ่มที่ถูกยิง ถูกแบ่งออกและ subcultured ทุกแปดสัปดาห์เพื่อสร้างสต็อก ยิง วัฒนธรรม ยิงจากวัฒนธรรม 5 และวัดได้ประมาณ 3 เซนติเมตร สูง ใช้สำหรับการทดลองที่ตามมา