PurificationMetal chelation chromat

Purification
Metal chelation chromatography was performed utilizing the
hexahistidine fusion tag added to the N-terminus of PTRHD1. From
this single chromatography step, PTRHD1 was purified to greater
than 90% as determined from Coomassie stained SDS-PAGE band
intensity analysis (Fig. 1C). It should be noted that elution of
PTRHD1 required 250 mM imidazole, or nearly a two-fold increase
compared to other Pth proteins similarly expressed and purified
[15,17,18]. Table 1 indicates the purity of and yield of soluble
PTRHD1 with the final yield of PTRHD1 of approximately 9 mg per
gram wet weight cells.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ทำให้บริสุทธิ์Chromatography รวมโลหะทำการใช้การhexahistidine แท็กฟิวชั่นที่เพิ่มไป N-ของ PTRHD1 จากขั้นตอนนี้เดี่ยว chromatography, PTRHD1 บริสุทธิ์มากขึ้นไปกว่า 90% ตามที่กำหนดจาก Coomassie ย้อม SDS หน้าวงการวิเคราะห์ความเข้ม (รูปที่ 1C) ควรสังเกตว่า ชะของPTRHD1 อิมิดาโซล 250 มม. หรือเกือบเพิ่มขึ้นสองเท่าที่จำเป็นเมื่อเทียบกับโปรตีนอื่น ๆ Pth ในทำนองเดียวกันแสดง และบริสุทธิ์[15,17,18] . ตารางที่ 1 แสดงความบริสุทธิ์และผลผลิตของละลายPTRHD1 กับผลผลิตสุดท้ายของ PTRHD1 ประมาณ 9 มิลลิกรัมต่อกรัมน้ำหนักเปียกเซลล์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

บริสุทธิ์
โลหะ Chelation โครมาโตได้ดำเนินการใช้
แท็ก hexahistidine ฟิวชั่นเพิ่มไปยัง N-ปลายทางของ PTRHD1 จาก
ขั้นตอนนี้โครมาโตเดียว PTRHD1 บริสุทธิ์ที่จะมากขึ้น
กว่า 90% ตามที่กำหนดจาก Coomassie เปื้อนระบบ SDS-วงหน้า
การวิเคราะห์ความเข้ม (รูป. 1C) มันควรจะตั้งข้อสังเกตว่าการชะของ
PTRHD1 ต้อง 250 มิลลิ imidazole หรือเกือบเพิ่มขึ้นสองเท่า
เมื่อเทียบกับโปรตีน Pth อื่น ๆ ในทำนองเดียวกันแสดงความบริสุทธิ์
[15,17,18] ตารางที่ 1 แสดงให้เห็นความบริสุทธิ์ของและผลผลิตของที่ละลายน้ำได้
PTRHD1 กับผลผลิตสุดท้ายของ PTRHD1 ประมาณ 9 มิลลิกรัมต่อ
กรัมน้ำหนักเปียกเซลล์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

บำบัดน้ำเสียการใช้เทคนิคการล้างพิษโลหะการเพิ่มแท็กฟิวชั่นของยีน ptrhd1 . จากวิธีนี้ขั้นตอนเดียว ptrhd1 ทำให้บริสุทธิ์มากขึ้นกว่า 90 % ตามที่กำหนดจาก เอนไซม์เหล่านี้น่าจะเป็นคราบ วงดนตรีการวิเคราะห์ความเข้ม ( ภาพที่ 1c ) มันควรจะตั้งข้อสังเกตว่าชนิดของptrhd1 ต้องอิมิดาโซล 250 มม. หรือเกือบสองเท่า เพิ่มเมื่อเทียบกับโปรตีนอื่น ๆในทำนองเดียวกัน PTH แสดง และบริสุทธิ์[ 15,17,18 ] ตารางที่ 1 แสดงความบริสุทธิ์และผลผลิตที่ละลายได้ptrhd1 กับผลผลิตของ ptrhd1 ประมาณ 9 มิลลิกรัมต่อกรัม น้ำหนักเปียกเซลล์