2. Materials and methods2.1. Materi

2. Materials and methods
2.1. Materials and reagents

An Agilent 7890A gas chromatograph, equipped with a 5975C mass spectrometer (Agilent, USA), a KH-700TDB CNC high-frequency ultrasonic cleaner (Kun San Ultrasonic Instrument Co., Ltd., Wo Chong, China), and a TTL-DC II-type nitrogen analyser (Beijing with Thai company, China) was used. An HY-4-type multi-speed oscillator and SK-1-type fast mixer (Shanghai GuoHua Electric Company, Shanghai, China) were also used. A Gilson GX-271 ASPEC solid phase extraction device (World Ways Co (HK) Ltd., Hong Kong), and a CARB/NH2 column (500 mg/500 mg, 6 mL) (Dima, Tianjin, China) were used for purification and the final analysis. Analytical-grade sodium chloride (Merck, Germany), dichloromethane (Merck, Germany), acetone (Merck, Germany), acetonitrile (Merck, Germany) and n-hexane (Merck, Germany) were all obtained at HPLC grade. Standards for pesticides with 99.0–99.9% purity were purchased from the Environmental Protection Institute, Ministry of Agriculture, China.

2.2. Sample collection and preparation

The vegetable samples analysed in this study were collected from local agricultural markets, supermarkets and hypermarkets from 2010 to 2013. These samples included cowpea, cauliflower, celery, chives, Chinese lettuce, cucumber, lettuce, rapeseed, spinach, tomato, pepper, eggplant, radish, potato, carrots, wild cabbage, water spinach, green bean, cabbage, and coriander. The samples' wet weight was at least 2 kg for large-sized fresh vegetables (i.e., cabbage). The minimum weight for medium and small samples was 1 kg, and the unit was usually more than 250 g (WHO/FAO, Rome, 2011). The analytical sampling procedure for determining pesticide residues was carried out according to the Codex Alimentarius Commission (CAC, 2011). The vegetables were chopped and mixed thoroughly, and the samples were divided into two portions, one for the initial analysis stored at 4 °C and the other stored at − 20 °C for further investigation. Only the edible parts of the vegetables were analysed to assess the presence of OP and PYR pesticides.

2.3. Extraction and clean-up

Extraction, clean-up and analysis of the vegetables were performed according to the Chinese standard method (SAC, 2008). The initial sample was accurately weighed to 25 g, placed in a 100-mL stoppered Erlenmeyer flask with 50 mL of acetonitrile and covered with a plug. This solution was placed in an ultrasonic extractor for 30 min of extraction and mixed for 30 min with a vortex mixer. Then, the mixture was filtered and collected in a 100-mL graduated cylinder with a stopper. Five grams of sodium chloride was added to this solution and vortexed for 2 min. An aliquot of 25 mL of acetonitrile was transferred to a flat-bottomed beaker and evaporated to near dryness (about 0.5 mL) at 45 °C with a rotary evaporator in a water bath for purification.

The concentrated extract was passed through a solid-phase extraction (SPE) column (CARB/NH2) with an Envi-Carb cartridge (6 mL/500 mg) coupled with a NH2-LC cartridge (6 mL/500 mg) to remove any residual components that would interfere with the GC–MS analysis. The SPE column was activated with 5 mL of acetone/dichloromethane (1:1, v/v), and the residue was washed three times with 3 mL of acetone/dichloromethane (1:1, v/v). The eluate was passed through the SPE column, collected in a 10-mL colorimeter tube and then evaporated to near dryness at 45 °C. Finally, the residue volume was adjusted to 1 mL with acetone and filtered through a 0.45-μm nylon membrane into a vial before injection into the GC–MS system. The adsorbent was never allowed to dry during the conditioning and sample loading periods.

2.4. Preparation of standards and calibration curves

Individual stock solutions of each OP (chlorpyrifos, dichlorvos, omethoate, parathion-methyl, fenitrothion, parathion, methamidophos, acephate, monocrotophos, phorate, triazophos, isocarbophos, profenofos) standard were prepared by dissolving 10 mg of each relevant compound in 10 mL of acetone and each PYR (fenpropathrin, cyfluthrin, cyhalothrin, cypermethrin, fenvalerate, permethrin, bifenthrin, deltamethrin) standard was prepared by dissolving 10 mg of each relevant compound in 10 mL of n-hexane. Standard solutions containing each of the pesticides at a concentration of 10 μg/mL were prepared by appropriately diluting aliquots of the individual pesticide stock solutions with acetone. The working standard solutions were prepared by diluting the mixed standard solutions in a concentration series of 0.25, 0.5, 0.75, 1.0, 1.5, 2.0 μg/mL. The stock and working solutions were stored at 4 °C.

2.5. Gas chromatography–mass spectrometry

An Agilent 7890A system integrated with a 5975C MS detector was equipped with a split/splitless injector that included an electronic pressure control. The analysis was performed on a DB-1701 column (30 m × 0.25 mm × 0.25 μm). The carrier gas was helium (99.999%) at a flow rate of 1.0 mL min− 1. The oven temperature was initially set to 80 °C for 1 min, increased at 20 °C min− 1 to 220 °C for 1 min, and then increased at 10 °C min− 1 to 270 °C for 23 min. The injection mode was splitless, and the temperatures of the injector, ion source, quadrupole and transfer line were set at 250, 230, 150 and 280 °C, respectively. The mass spectrometer was operated with an ion energy of 70 eV in electron impact (EI) mode. The solvent delay was 4 min, and 1.0 μL of the sample was injected for each run. Analysis was performed in the selected ion monitoring (SIM) mode based on the use of one target and two or three qualifier ions. Varian Workstation software (MSD Chemstation E. 02. 02. 1431) was used for instrument control, data acquisition and data processing.

3. Results and discussion
3.1. Quality assurance, quality control and recovery analysis

Quality assurance and quality control of the analytical method was performed for the following parameters: linearity, accuracy, and precision, limit of detection (LOD) and limit of quantification (LOQ). The calibration curves were evaluated with calibration standards at concentrations of 0.25, 0.5, 0.75, 1.0, 1.5, 2.0 μg/mL (0.01 mg/kg–0.08 mg/kg). Linear regression coefficients were obtained from the calibration curves. The accuracy was calculated by analysing samples with known concentrations and comparing the true values with the measured values. The precision was expressed by the relative standard deviation (RSD) from six replicates. The limits of detection (LOD) of samples ranged from 0.0002 mg/kg–0.003 mg/kg, estimated as three times the signal-to-noise ratio. The limits of quantification (LOQ) of samples ranged from 0.0006 mg/kg–0.009 mg/kg (Table 1), calculated as ten times the signal-to-noise ratio. The vegetable samples were fortified at 0.02 mg/kg and 0.08 mg/kg by adding mixed standard solutions, and the recovery tests were reproduced six times. The pesticide average recovery rate of samples ranged from 73.7%–123.8%. The relative standard deviation (RSD) of samples ranged from 2.4%–8.6% (Table 2). respectively. The reagent and instrument blank was frequently run to exclude interference due to contamination from the apparatus, solvents, instrument or chemicals used.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการ2.1. วัสดุและ reagentsการ Agilent 7890A แก๊ส chromatograph พร้อมกับ 5975C โดยรวมสเปกโตรมิเตอร์ (Agilent สหรัฐอเมริกา), CNC KH 700TDB-ความถี่สูง ultrasonic สะอาด (Kun ซานอัลตราโซนิกเครื่องมือ Co., ltd, Wo ช่อง จีน), และใช้เป็น TTL DC II ชนิดไนโตรเจน analyser (ปักกิ่งกับบริษัทไทย จีน) มี oscillator ชนิดฮี 4 ความเร็วหลายและ SK-1-ชนิดผสมอย่างรวดเร็ว (บริษัทไฟฟ้า GuoHua เซี่ยงไฮ้ เซี่ยงไฮ้ จีน) ยังใช้ Gilson GX 271 ASPEC เฟสของแข็งแยกอุปกรณ์ (โลกวิธี Co (HK) Ltd., Hong Kong), และคอลัมน์ คาร์โบไฮเดรต/NH2 (500 มิลลิกรัม 500 มิลลิกรัม 6 mL) ใช้สำหรับการทำให้บริสุทธิ์และการวิเคราะห์ขั้นสุดท้าย (ลไซด์ เทียนจิน จีน) วิเคราะห์ระดับโซเดียมคลอไรด์ (เมอร์ค เยอรมนี), dichloromethane (เมอร์ค เยอรมนี), อะซิโตน (เมอร์ค เยอรมนี), acetonitrile (เมอร์ค เยอรมนี) และเอ็นเฮกเซน (เมอร์ค เยอรมนี) ถูกทั้งหมดรับที่เกรด HPLC มาตรฐานสำหรับยาฆ่าแมลงที่มีความบริสุทธิ์ 99.0 – 99.9% ซื้อจาก สถาบันป้องกันสิ่งแวดล้อม กระทรวงเกษตร จีน2.2 การเก็บและเตรียมตัวอย่างตัวอย่างผักที่ analysed ในการศึกษานี้ได้รวบรวมจากตลาดเกษตร ซุปเปอร์มาร์เก็ต และมาร์ทจาก 2010 ถึงปี 2013 ตัวอย่างเหล่านี้รวม cowpea กะหล่ำ ขึ้นฉ่าย chives ผักกาดจีน แตงกวา ผักกาด เมล็ดต้นเรพ ผักโขม มะเขือเทศ พริก มะเขือ หัวผักกาด มันฝรั่ง แครอท กะหล่ำปลีป่า น้ำผักโขม ถั่วเขียว กะหล่ำปลี และผักชี น้ำหนักเปียกของตัวอย่างได้น้อย 2 กก.สำหรับขนาดใหญ่ผัก (เช่น กะหล่ำปลี) น้ำหนักต่ำสุดตัวอย่างขนาดกลาง และขนาดเล็กได้ 1 กิโลกรัม และมักจะมีหน่วยมากกว่า 250 g (ที่ / FAO โรม 2011) ขั้นตอนการสุ่มตัวอย่างวิเคราะห์ในการกำหนดสารพิษตกค้างถูกดำเนินตามนาย Alimentarius ตซูบิชิ (CAC, 2011) ผักที่สับ และผสมอย่างละเอียด ตัวอย่างถูกแบ่งออกเป็นสองส่วน สำหรับการวิเคราะห์เริ่มต้นเก็บที่ 4 ° C และอื่น ๆ เก็บที่− 20 ° C เพื่อการตรวจสอบเพิ่มเติม เฉพาะส่วนที่กินผักมี analysed เพื่อประเมินสถานะของ OP และ PYR ยาฆ่าแมลง2.3 การสกัดและการล้างแยก การล้าง และการวิเคราะห์ผักได้ดำเนินการตามวิธีการมาตรฐานจีน (SAC, 2008) ตัวอย่างเริ่มต้นอย่างหนักถึง 25 กรัม วางเป็น 100 mL stoppered Erlenmeyer หนาวกับ 50 mL ของ acetonitrile และครอบคลุมพร้อมปลั๊กแบบ วิธีนี้ถูกวางในการระบายอัลตราโซนิกสำหรับ 30 นาทีของการสกัด และผสมกับผสม vortex สำหรับ 30 นาที แล้ว ส่วนผสมที่กรอง และรวบรวมในทรงกระบอกจบ 100 mL พร้อมจุกแบบ 5 กรัมของโซเดียมคลอไรด์ที่เพิ่มเมื่อต้องการแก้ไขปัญหานี้และ vortexed สำหรับ 2 นาที เป็นส่วนลงตัวของ 25 mL ของ acetonitrile ถูกโอนย้ายไปบีกเกอร์ flat-bottomed และที่ใกล้ความแห้งกร้าน (ประมาณ 0.5 mL) ที่ 45 ° C กับ evaporator โรตารี่ในน้ำอาบน้ำฟอกที่หายไปสารสกัดเข้มข้นถูกส่งผ่านผ่านคอลัมน์แยกเฟสของแข็ง (SPE) (NH2 คาร์โบไฮเดรต) มีคาร์โบไฮเดรตสามารถตลับหมึก (6 mL/500 มิลลิกรัม) ควบคู่กับตลับหมึก NH2-LC (6 mL/500 มิลลิกรัม) เพื่อลบส่วนประกอบเหลือที่จะแทรกแซงกับการวิเคราะห์ GC – MS คอลัมน์ SPE ที่ใช้ 5 mL ของ dichloromethane อะซีโตน (1:1, v/v), และสารตกค้างถูกล้าง 3 ครั้ง ด้วย 3 mL ของอะซี โตน/dichloromethane (1:1, v/v) Eluate ที่ผ่านคอลัมน์ SPE เก็บในหลอด 10 mL เครื่อง และหายไปแล้ว ที่ใกล้ความแห้งกร้านที่ 45 องศาเซลเซียส ในที่สุด ปริมาณสารตกค้างถูกปรับ 1 mL ด้วยอะซีโตน และกรองผ่านเยื่อไนล่อนเป็น 0.45-μm เป็นคอนแทคก่อนฉีดเข้าในระบบ GC – MS Adsorbent ไม่เคยได้ได้รับอนุญาตให้แห้งนี่และตัวอย่างการโหลดรอบระยะเวลา2.4 การจัดทำมาตรฐานและเส้นโค้งเทียบโซลูชั่นของแต่ละมาตรฐาน OP (chlorpyrifos, dichlorvos, omethoate, parathion methyl, fenitrothion, parathion, methamidophos, acephate, monocrotophos, phorate, triazophos, isocarbophos, profenofos) ถูกเตรียม โดยยุบ 10 มก.แต่ละสารประกอบที่เกี่ยวข้องใน 10 mL ของอะซีโตนและแต่ละมาตรฐาน PYR (fenpropathrin, cyfluthrin, cyhalothrin, cypermethrin, fenvalerate, permethrin ไบเฟนทริน deltamethrin) หุ้นแต่ละถูกเตรียม โดยยุบ 10 มก.ของแต่ละสารประกอบที่เกี่ยวข้องใน 10 mL ของเอ็นเฮกเซน โซลูชั่นมาตรฐานที่ประกอบด้วยยาฆ่าแมลงที่มีความเข้มข้นของ μg 10 mL แต่ละถูกเตรียม โดย diluting aliquots ในแมลงแต่ละหุ้นโซลูชั่นด้วยอะซีโตนอย่างเหมาะสม โซลูชั่นมาตรฐานทำงานได้เตรียมไว้ โดย diluting โซลูชั่นมาตรฐานผสมลำดับความเข้มข้น 0.25, 0.5, 0.75, 1.0, 1.5, 2.0 μg/mL หุ้นและโซลูชั่นการทำงานถูกเก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียส2.5. chromatography ก๊าซ – มวล spectrometryระบบ Agilent 7890A การรวมกับจับ 5975C MS ถูกพร้อมอัด แยก/splitless ที่รวมตัวควบคุมความดันอิเล็กทรอนิกส์ ทำการวิเคราะห์ในคอลัมน์นี้ DB (30 m × 0.25 มม.× 0.25 μm) ผู้ขนส่งก๊าซมีฮีเลียม (99.999%) ที่อัตราการไหลของ min− 1.0 mL 1 อุณหภูมิเตาอบถูกตั้งค่า 80 องศาเซลเซียสใน 1 นาที 20 ° C min− 1-220 องศาเซลเซียสใน 1 นาทีเพิ่มขึ้น และเพิ่มขึ้น 10 ° C min− 1 270 ° C สำหรับ 23 นาทีแล้ว วิธีฉีดคือ splitless และอุณหภูมิของเครื่องทำบุหรี่ แหล่งไอออน quadrupole และโอนย้ายบรรทัดที่ตั้ง 230, 250, 150 และ 280 ° C ตามลำดับ สเปกโตรมิเตอร์มวลถูกดำเนินการกับการพลังงานไอออนของ 70 eV ในโหมดผลกระทบ (EI) อิเล็กตรอน ระหว่างตัวทำละลายคือ 4 นาที และ μL 1.0 ของตัวอย่างที่ฉีดสำหรับการรันแต่ละ ทำการวิเคราะห์ไอออนเลือกที่ตรวจสอบตามเป้าหมายที่หนึ่งการใช้โหมด (SIM) และประจุตัวบ่งคุณลักษณะสอง หรือสาม ซอฟต์แวร์ของเวิร์กสเตชันแล้วแต่กำหนด (มือ Chemstation E. 02 02. 1431) ใช้ สำหรับควบคุมเครื่องมือวัด ข้อมูลการประมวลผลข้อมูล3. ผลลัพธ์ และสนทนา3.1 การคุณภาพ ควบคุมคุณภาพ และการวิเคราะห์การกู้คืนดำเนินการประกันคุณภาพและควบคุมคุณภาพของวิธีการวิเคราะห์พารามิเตอร์ต่อไปนี้: แบบดอกไม้ แม่นยำ และความ แม่นยำ ขีดจำกัดของการตรวจสอบ (ลอด) และจำนวนนับ (LOQ) เทียบเส้นโค้งถูกประเมิน ด้วยมาตรฐานการปรับเทียบที่ความเข้มข้น 0.25, 0.5, 0.75, 1.0, 1.5, 2.0 μg/mL (0.01 mg/kg – 0.08 ตามลำดับ mg/kg) ค่าสัมประสิทธิ์การถดถอยเชิงเส้นได้รับมาจากการเทียบเส้นโค้ง ความถูกต้องถูกตามตัวอย่างที่ มีความเข้มข้นรู้จักวิเคราะห์ และเปรียบเทียบค่าจริงกับค่าที่วัด ความแม่นยำถูกแสดง โดยญาติส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน (RSD) จาก 6 เหมือนกับ ขีดจำกัดของการตรวจสอบ (ลอด) ของตัวอย่างอยู่ในช่วงตั้งแต่ 0.0002 mg/kg-0.003 มิลลิกรัม/กิโลกรัม ประเมินครั้งที่สามอัตราส่วนสัญญาณต่อเสียง ขีดจำกัดของนับ (LOQ) ของตัวอย่างอยู่ในช่วงตั้งแต่ 0.0006 mg/kg – 0.009 มิลลิกรัม/กิโลกรัม (ตารางที่ 1), คำนวณ 10 ครั้งอัตราส่วนสัญญาณต่อเสียง ตัวอย่างผักมีธาตุที่ 0.02 mg/kg และ 0.08 ตามลำดับมิลลิกรัม/กิโลกรัม โดยเพิ่มโซลูชั่นมาตรฐานผสม และการทดสอบการกู้คืนถูกทำซ้ำ 6 ครั้ง อัตราการกู้คืนเฉลี่ยแมลงตัวอย่างอยู่ในช่วงจาก 73.7 – 123.8% ญาติส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน (RSD) ตัวอย่างที่อยู่ในช่วงจาก 2.4 – 8.6% (ตารางที่ 2) ตามลำดับ รีเอเจนต์และมือเปล่าถูกมักเรียกใช้เพื่อแยกสัญญาณรบกวนเนื่องจากการปนเปื้อนจากเครื่อง หรือสารทำละลาย อุปกรณ์ หรือสารเคมีที่ใช้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ
2.1 วัสดุและสารเคมีก๊าซ Chromatograph Agilent 7890A พร้อมกับสเปกโตรมิเตอร์มวล 5975C (Agilent, สหรัฐอเมริกา) ซึ่งเป็น KH-700TDB CNC ความถี่สูงทำความสะอาดอัลตราโซนิก (คุนซานอัลตราโซนิกตราสาร จำกัด , วอปากช่อง, จีน) และ TTL-DC วิเคราะห์ไนโตรเจนสองชนิด (ปักกิ่งกับ บริษัท ไทยจีน) ถูกนำมาใช้ HY-4 ประเภท oscillator หลายความเร็วและ SK-1 ชนิดผสมได้อย่างรวดเร็ว (Shanghai Guohua บริษัท ไฟฟ้า, เซี่ยงไฮ้, ประเทศจีน) นอกจากนี้ยังถูกนำมาใช้ Gilson GX-271 ASPEC ของแข็งอุปกรณ์สกัด (โลกวิธีร่วม (HK) จำกัด ฮ่องกง) และ CARB / คอลัมน์ NH2 (500 มก. / 500 มก., 6 มิลลิลิตร) (Dima, เทียนจิน, จีน) ถูกนำมาใช้ การทำให้บริสุทธิ์และการวิเคราะห์สุดท้าย การวิเคราะห์ระดับโซเดียมคลอไรด์ (เมอร์ค, เยอรมนี), ไดคลอโรมีเทน (เมอร์ค, เยอรมนี), อะซิโตน (เมอร์ค, เยอรมนี) acetonitrile (เมอร์ค, เยอรมนี) และเฮกเซน (เมอร์ค, เยอรมนี) ที่ได้รับทั้งหมดในชั้นประถมศึกษาปี HPLC มาตรฐานสารกำจัดศัตรูพืชที่มีความบริสุทธิ์ 99.0-99.9% กำลังซื้อจากสถาบันคุ้มครองสิ่งแวดล้อม, กระทรวงเกษตร, จีน. 2.2 การเก็บตัวอย่างและการจัดทำตัวอย่างผักวิเคราะห์ในการศึกษานี้ได้ถูกรวบรวมจากตลาดเกษตรท้องถิ่นซูเปอร์มาร์เก็ตและไฮเปอร์มาร์เก็ตจาก 2010 ถึง 2013 ตัวอย่างเหล่านี้รวมถึงถั่วพุ่ม, กะหล่ำ, คื่นฉ่าย, กระเทียม, ผักกาดหอมจีน, แตงกวา, ผักกาดหอม, เรพซีด, ผักขม, มะเขือเทศ พริกมะเขือ, หัวไชเท้ามันฝรั่งแครอทกะหล่ำปลีป่า, ผักขมน้ำถั่วเขียว, กะหล่ำปลีและผักชี ตัวอย่าง 'น้ำหนักเปียกอยู่ที่ไม่น้อยกว่า 2 กิโลกรัมผักสดขนาดใหญ่ (เช่นกะหล่ำปลี) น้ำหนักขั้นต่ำสำหรับการขนาดกลางและขนาดเล็กเป็นตัวอย่าง 1 กิโลกรัมและหน่วยงานที่มักจะมากกว่า 250 กรัม (WHO / FAO, โรม 2011) ขั้นตอนการสุ่มตัวอย่างวิเคราะห์การกำหนดสารเคมีตกค้างได้ดำเนินการตามที่คณะกรรมการ Codex Alimentarius (CAC 2011) ผักถูกสับและผสมอย่างทั่วถึงและตัวอย่างถูกแบ่งออกเป็นสองส่วนหนึ่งสำหรับการวิเคราะห์ครั้งแรกเก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียสและอื่น ๆ ที่เก็บไว้ที่ - 20 องศาเซลเซียสเป็นเวลาตรวจสอบต่อไป เฉพาะในส่วนที่กินได้ของผักที่ได้มาวิเคราะห์เพื่อประเมินการปรากฏตัวของ OP และยาฆ่าแมลง PYR ได้. 2.3 การสกัดและการทำความสะอาดสกัดที่สะอาดขึ้นและการวิเคราะห์ของผักได้ดำเนินการตามวิธีการมาตรฐานจีน (SAC 2008) กลุ่มตัวอย่างที่เริ่มต้นได้รับการชั่งน้ำหนักอย่างถูกต้องถึง 25 กรัมอยู่ใน 100 มิลลิลิตรขวดจุก Erlenmeyer 50 มิลลิลิตร acetonitrile และปกคลุมด้วยปลั๊ก วิธีการแก้ปัญหานี้ถูกวางไว้ในระบายอัลตราโซนิกเป็นเวลา 30 นาทีของการสกัดและการผสมเป็นเวลา 30 นาทีด้วยการผสมน้ำวน จากนั้นผสมถูกกรองและรวบรวมไว้ใน 100 มิลลิลิตรจบการศึกษากระบอกอุด ห้ากรัมของโซเดียมคลอไรด์ถูกเพิ่มเข้ามาเพื่อแก้ปัญหานี้และการ vortex เวลา 2 นาที aliquot 25 มิลลิลิตร acetonitrile ถูกย้ายไปบีกเกอร์ที่ราบต่ำและระเหยความแห้งกร้านที่อยู่ใกล้ (ประมาณ 0.5 มิลลิลิตร) ที่ 45 องศาเซลเซียสด้วยเครื่องระเหยแบบหมุนในอ่างน้ำสำหรับการทำให้บริสุทธิ์. สารสกัดเข้มข้นก็ผ่านไปผ่านขั้นตอนแข็ง สกัด (SPE) คอลัมน์ (CARB / NH2) กับตลับหมึก Envi-Carb (6 mL / 500 มก.) ควบคู่ไปกับตลับหมึก NH2-LC (6 mL / 500 มก.) เพื่อเอาชิ้นส่วนที่เหลือใด ๆ ที่จะยุ่งเกี่ยวกับ GC-MS การวิเคราะห์ คอลัมน์ SPE ถูกเปิดใช้งาน 5 มิลลิลิตรอะซีโตน / ไดคลอโรมีเทน (1: 1, v / v) และสารตกค้างถูกล้างสามครั้งมี 3 มลอะซีโตน / ไดคลอโรมีเทน (1: 1, v / v) eluate ก็ผ่านไปผ่านคอลัมน์ SPE เก็บในหลอด colorimeter 10 มิลลิลิตรแล้วระเหยความแห้งกร้านที่อยู่ใกล้ที่ 45 ° C ในที่สุดปริมาณสารตกค้างที่ถูกปรับให้ 1 มิลลิลิตรด้วยอะซิโตนและกรองผ่านเยื่อไนลอน 0.45 ไมครอนลงไปในขวดก่อนที่จะฉีดเข้าสู่ระบบ GC-MS ดูดซับก็ไม่เคยได้รับอนุญาตให้แห้งในช่วงที่เครื่องและโหลดตัวอย่าง. 2.4 การจัดทำมาตรฐานและเส้นโค้งการสอบเทียบโซลูชั่นหุ้นส่วนบุคคลของแต่ละ OP (chlorpyrifos, dichlorvos, omethoate, parathion-methyl, fenitrothion, parathion, methamidophos, acephate, monocrotophos, phorate, triazophos, isocarbophos, profenofos) มาตรฐานได้จัดทำขึ้นโดยการละลาย 10 มิลลิกรัมของแต่ละ สารประกอบที่เกี่ยวข้องใน 10 มิลลิลิตรอะซีโตนและแต่ละ PYR (fenpropathrin, cyfluthrin, ไซฮาโลทริน, cypermethrin, fenvalerate, Permethrin, ไบเฟนทริน, deltamethrin) มาตรฐานถูกจัดทำขึ้นโดยการละลาย 10 มิลลิกรัมของสารแต่ละที่เกี่ยวข้องใน 10 มิลลิลิตร n-เฮกเซน การแก้ปัญหาที่มีมาตรฐานในแต่ละสารกำจัดศัตรูพืชที่มีความเข้มข้น 10 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรเตรียมโดยเจือจาง aliquots เหมาะสมของการแก้ปัญหายาฆ่าแมลงหุ้นของแต่ละบุคคลด้วยอะซิโตน โซลูชั่นมาตรฐานการทำงานที่ถูกจัดทำขึ้นโดยเจือจางสารละลายมาตรฐานผสมในชุดความเข้มข้น 0.25, 0.5, 0.75, 1.0, 1.5, 2.0 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร สต็อกและการแก้ปัญหาการทำงานที่ถูกเก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียส. 2.5 มวลสาร-แก๊ส chromatography ระบบ Agilent 7890A รวมกับเครื่องตรวจจับ 5975C MS ติดตั้งแยก / หัวฉีด Splitless ที่รวมถึงการควบคุมความดันอิเล็กทรอนิกส์ การวิเคราะห์ได้ดำเนินการในคอลัมน์ DB-1701 (30 เมตร× 0.25 × 0.25 มมไมครอน) ผู้ให้บริการก๊าซเป็นฮีเลียม (99.999%) ที่อัตราการไหล 1.0 มิลลิลิตร min- 1. อุณหภูมิเตาอบได้รับการตั้งค่าเริ่มต้นถึง 80 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 นาทีเพิ่มขึ้นที่ 20 ° C min- 1-220 ° C เป็นเวลา 1 นาที และจากนั้นเพิ่มขึ้นที่ 10 ° C min- 1-270 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 23 นาที โหมดการฉีดเป็น Splitless และอุณหภูมิของหัวฉีดที่มาไอออน quadrupole และสายโอนตั้งอยู่ที่ 250, 230, 150 และ 280 องศาเซลเซียสตามลำดับ สเปกโตรมิเตอร์มวลได้รับการดำเนินการกับพลังงานไอออน 70 eV ในผลกระทบอิเล็กตรอน (EI) โหมด ความล่าช้าเป็นตัวทำละลาย 4 นาทีและ 1.0 ไมโครลิตรของกลุ่มตัวอย่างได้รับการฉีดสำหรับการทำงานในแต่ละ การวิเคราะห์ที่ได้ดำเนินการในการตรวจสอบไอออนที่เลือก (SIM) โหมดตามการใช้งานของหนึ่งในเป้าหมายและสองหรือสามไอออนรอบคัดเลือก ซอฟแวร์เวิร์คสเตชั่ Varian (เอ็มเอสอี ChemStation 02. 02. 1431) ถูกนำมาใช้สำหรับการควบคุมที่ใช้ในการเก็บข้อมูลและการประมวลผลข้อมูลที่. 3 และการอภิปรายผล3.1 การประกันคุณภาพการควบคุมคุณภาพและการวิเคราะห์การกู้คืนการประกันคุณภาพและการควบคุมคุณภาพของวิธีการวิเคราะห์ที่ได้ดำเนินการสำหรับพารามิเตอร์ต่อไปนี้: เชิงเส้นความถูกต้องและความแม่นยำของการตรวจสอบการ จำกัด (LOD) และขีด จำกัด ของปริมาณ (LOQ) เส้นโค้งการสอบเทียบได้รับการประเมินตามมาตรฐานการสอบเทียบที่ความเข้มข้น 0.25, 0.5, 0.75, 1.0, 1.5, 2.0 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร (0.01 mg / kg-0.08 mg / kg) ค่าสัมประสิทธิ์การถดถอยเชิงเส้นที่ได้รับจากเส้นโค้งการสอบเทียบ ความถูกต้องที่คำนวณได้จากการวิเคราะห์ตัวอย่างที่มีความเข้มข้นเป็นที่รู้จักและเปรียบเทียบค่าที่แท้จริงที่มีค่าที่วัดได้ ความแม่นยำถูกแสดงโดยค่าเบี่ยงเบนมาตรฐานสัมพัทธ์ (RSD) ตั้งแต่หกซ้ำ ข้อ จำกัด ของการตรวจสอบ (LOD) ของกลุ่มตัวอย่างอยู่ในช่วง 0.0002 mg / kg-0.003 mg / kg ประมาณสามครั้งสัญญาณต่อเสียงรบกวนอัตราส่วน ข้อ จำกัด ของปริมาณ (LOQ) ของกลุ่มตัวอย่างอยู่ในช่วง 0.0006 mg / kg-0.009 mg / kg (ตารางที่ 1) คำนวณเป็นสิบครั้งสัญญาณต่อเสียงรบกวนอัตราส่วน กลุ่มตัวอย่างผักเป็นคนจัดการที่ 0.02 มก. / กก. และ 0.08 มก. / กก. โดยการเพิ่มมาตรฐานการแก้ปัญหาการผสมและการทดสอบการกู้คืนที่ถูกทำซ้ำหกครั้ง อัตราการกู้คืนสารกำจัดศัตรูพืชเฉลี่ยของกลุ่มตัวอย่างอยู่ในช่วง 73.7% -123.8% ค่าเบี่ยงเบนมาตรฐานสัมพัทธ์ (RSD) ของกลุ่มตัวอย่างอยู่ในช่วง 2.4% -8.6% (ตารางที่ 2) ตามลำดับ ว่างน้ำยาและเครื่องมือที่ถูกเรียกใช้บ่อยจะไม่รวมการรบกวนเกิดจากการปนเปื้อนจากอุปกรณ์ตัวทำละลายที่ใช้หรือสารเคมีที่ใช้

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ
2.1 . วัสดุและสารเคมี

เป็นเลนต์ 7890a แก๊สโครมาโตกราฟพร้อมกับ 5975c แมสสเปกโตรมิเตอร์ ( Agilent , USA ) , ความถี่สูง ultrasonic cleaner kh-700tdb CNC ( คุนซาน ultrasonic อุปกรณ์ Co . , Ltd . wo ชอง จีน ) และ ttl-dc 2 ประเภทไนโตรเจนวิเคราะห์ ( ปักกิ่ง กับ บริษัท ไทย , จีน ) ที่ใช้การ hy-4-type oscillator หลายความเร็วและผสมอย่างรวดเร็ว ( sk-1-type Guohua ไฟฟ้าของ บริษัท เซี่ยงไฮ้ , เซี่ยงไฮ้ , จีน ) ยังใช้ เป็นกิลสัน gx-271 aspec ของแข็งขั้นตอนการสกัดอุปกรณ์ ( ทางโลก จำกัด ( HK ) จำกัด , ฮ่องกง ) , และคาร์โบไฮเดรต / nh2 คอลัมน์ ( 500 มิลลิกรัม / 500 มิลลิกรัม , 6 ml ) ( DIMA , เทียนจิน , จีน ) ใช้สำหรับบำบัดน้ำเสีย และการวิเคราะห์ขั้นสุดท้าย โซเดียมคลอไรด์เกรดวิเคราะห์ ( Merck , เยอรมัน ) ,ไดคลอโรมีเทน ( Merck , เยอรมัน ) , อะซิโตน ( Merck , เยอรมัน ) , ไน ( Merck , เยอรมนี ) และบีบ ( Merck , เยอรมนี ) ทั้งหมดที่ได้รับเกรด HPLC . มาตรฐานสำหรับสารกำจัดศัตรูพืชกับ 99.0 – 99.9% บริสุทธิ์ ซื้อมาจากสถาบันคุ้มครองสิ่งแวดล้อม กระทรวงการเกษตรจีน

2.2 . การเก็บตัวอย่างและการเตรียมตัว

ตัวอย่างที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้ เก็บผักเก็บจากตลาดเกษตรท้องถิ่น ซูเปอร์มาร์เก็ตและไฮเปอร์มาร์เก็ต จาก 2010 ถึง 2013 เหล่านี้ได้แก่ถั่วพุ่ม , กะหล่ำ , คื่นฉ่าย , กระเทียม , ผักกาดขาว แตงกวา , ผักกาดหอม , rapeseed , ผักขม , มะเขือเทศ , พริก , มะเขือ , หัวไชเท้า , มันฝรั่ง , แครอท , ป่า กะหล่ำปลี ผักบุ้ง เมล็ดถั่วเขียว กะหล่ำปลี และผักชีตัวอย่างน้ำมีน้ำหนักอย่างน้อย 2 กิโลกรัม สำหรับผักสดที่มีขนาดใหญ่ ( เช่น กะหล่ําปลี ) น้ำหนักขั้นต่ำสำหรับขนาดกลางและขนาดเล็กจำนวน 1 กิโลกรัม และ หน่วยเป็นปกติมากกว่า 250 กรัม ( ใคร / FAO , โรม , 2011 ) วิเคราะห์ตัวอย่างกระบวนการกำหนดสารพิษตกค้าง ได้ดำเนินการไปตาม Codex Alimentarius Commission ( CAC , 2011 )ผักที่ถูกสับและผสมอย่างทั่วถึง และแบ่งกลุ่มตัวอย่างออกเป็นสองส่วน หนึ่งในการวิเคราะห์เบื้องต้น เก็บรักษาที่อุณหภูมิ 4 องศา C และอื่น ๆ ที่อุณหภูมิ 20 ° C −เพื่อสอบสวนต่อไป เพียง แต่กินส่วนของผักที่นำมาวิเคราะห์เพื่อประเมินสถานะของ OP และ pyr ยาฆ่าแมลง

2.3 การสกัดและการทำความสะอาด

การสกัดทำความสะอาดและการวิเคราะห์ของผักมีการปฏิบัติตามวิธีการมาตรฐานจีน ( SAC , 2008 ) ตัวอย่างเบื้องต้นได้ถูกต้อง หนัก 25 กรัม อยู่ในขวด 100 ml stoppered เออร์เลนเมเยอร์กับ 50 มิลลิลิตร ไนและครอบคลุมกับปลั๊ก โซลูชั่นนี้จะถูกวางไว้ในการแยกสกัดและผสม 30 นาที 30 นาที กับ Vortex Mixer . จากนั้นส่วนผสมจะถูกกรองและเก็บในกระบอกตวง 100 มิลลิลิตร กับกันชน 5 กรัมของโซเดียม คลอไรด์ ได้เพิ่ม เพื่อแก้ปัญหานี้ และ vortexed 2 นาทีเป็นส่วนลงตัวของ 25 มล. ไนถูกส่งไปแบน bottomed บีกเกอร์และระเหยไปใกล้แห้ง ( ประมาณ 0.5 ml ) 45 ° C กับเครื่องโรตารี่ในน้ำอาบฟอก .

สารสกัดเข้มข้นที่ผ่านผ่านส่วนการสกัด ( SPE ) คอลัมน์ ( คาร์โบไฮเดรต / nh2 ) กับ envi carb ตลับ ( 6 ml / 500 มก. ) คู่กับ nh2-lc ตลับ ( 6 ml / 500 มก. ) เพื่อลบใด ๆที่เหลือ องค์ประกอบ ที่ จะไม่ไปยุ่งกับ GC - นางสาวการวิเคราะห์ การใช้คอลัมน์เปิดกับ 5 ml ของอะซิโตน / ไดคลอโรมีเทน ( 1 : 1 v / v )และที่เหลือก็ล้าง 3 ครั้ง 3 มล. ของอะซิโตน / ไดคลอโรมีเทน ( 1 : 1 v / v ) ในสารละลาย ( eluate ) คือผ่าน SPE คอลัมน์ที่รวบรวมใน 10 ml colorimeter หลอดแล้วระเหยไปใกล้ความแห้งกร้านที่ 45 องศา และสารตกค้างปริมาณ 1 ml ปรับด้วยอะซิโตน และกรองผ่านเยื่อไนลอน 0.45 - μ M ในขวดก่อนฉีดเข้าไปใน GC - MS ระบบใช้แล้วไม่เคยอนุญาตให้แห้งในการปรับอากาศและโหลดตัวอย่างคาบ

2.4 . จัดทำมาตรฐานและเส้นโค้งสอบเทียบ

แต่ละหุ้นโซลูชั่นของแต่ละสหกรณ์ ( คลอร์ไพริฟอส ไดคลอวอส , โอเมโทเเมทไธทางสังคมวิทยา , , , โดย , เมทามิโดฟอสซีเฟต monocrotophos , ฟอเรทไอโซคาร์โบฟอสไทราโซฟอส , , , ,โปรเฟนโน ) มาตรฐานที่เตรียมโดยละลาย 10 mg ของแต่ละที่เกี่ยวข้อง 10 ml สารอะซิโตนและแต่ละ pyr ( เฟนโพรพาทรินไซฟลูทรินลง , , , cypermethrin , เฟนวาลีเรทเพอร์เมทริน deltamethrin ไบเฟนทริน , , , ) มาตรฐานที่ถูกเตรียมโดยละลาย 10 mg ของแต่ละสารประกอบใน 10 มิลลิลิตรที่บีบ .โซลูชั่นมาตรฐานที่มีแต่ละชนิดที่ความเข้มข้น 10 μกรัม / มิลลิลิตรเตรียมอย่างเหมาะสมจะเฉยๆของแต่ละหุ้นโซลูชั่น ด้วยสารอะซิโตน การทำงานมาตรฐานโซลูชั่นเตรียมโดยละลายผสมในชุดโซลูชั่นมาตรฐานความเข้มข้น 0.25 , 0.5 , 0.75 , 1.0 , 1.5 , 2.0 μกรัม / มล. และหุ้นโซลูชั่นงานเก็บรักษาที่อุณหภูมิ 4 องศา

2.5 แก๊สโครมาโทกราฟี - แมสสเปกโทรเมทรี

เป็นเลนต์ 7890a ระบบบูรณาการกับ MS 5975c เครื่องตรวจจับพร้อมแยก / รวมแรงดันที่ splitless หัวฉีดอิเล็กทรอนิกส์ควบคุม ผลจากการวิเคราะห์ใน db-1701 คอลัมน์ ( 30 m × 0.25 มม. × 0.25 μ M ) บริษัทขนส่งแก๊สฮีเลี่ยม ( 99.999 % ) ที่อัตราการไหล 1.0 มิลลิลิตรต่อนาที− 1อุณหภูมิเตาอบที่ถูกตั้งค่าเริ่มต้น 80 ° C เป็นเวลา 1 นาทีที่ 20 ° C ( มิน− 1 220 องศา C เป็นเวลา 1 นาที แล้วเพิ่มเวลา 10 ° C ถึง 270 ° C − 1 นาที 23 นาที โหมดการฉีดคือ splitless และอุณหภูมิของหัวฉีด , คำแหล่งไอออน และสายการตั้งค่าที่ 250 , 230 , 150 และ 280 องศาองศาเซลเซียส ตามลำดับมวลสเปก ดำเนินการกับไอออนพลังงาน 70 EV ในอิเล็กตรอนกระทบ ( EI ) โหมด ความล่าช้าตัวทำละลายคือ 4 นาที และμ 1.0 ลิตรจำนวนการฉีดแต่ละคนวิ่ง การวิเคราะห์ในการเลือกไอออน ( SIM ) โหมดขึ้นอยู่กับการใช้เป้าหมายหนึ่งและสอง หรือ สาม รอบคัดเลือก ไอออน เครื่องเวิร์กสเตชันซอฟต์แวร์ ( เอ็มเอส chemstation E 02 02 . 1431 ) ใช้สำหรับควบคุมอุปกรณ์การเก็บข้อมูลและการประมวลผลข้อมูล

3 ผลและการอภิปราย
3.1 . การประกันคุณภาพ , การควบคุมคุณภาพและการกู้คืนข้อมูล

การประกันคุณภาพและการควบคุมคุณภาพของการวิเคราะห์ได้แสดงพารามิเตอร์ต่อไปนี้ : ถึงความถูกต้องและความแม่นยำ จำกัด ของการตรวจสอบ ( LOD ) และจำกัดปริมาณ ( loq )เส้นโค้งสอบเทียบ ได้แก่ มาตรฐานการสอบเทียบที่ความเข้มข้น 0.25 , 0.5 , 0.75 , 1.0 , 1.5 , 2.0 μ g / ml ( ( 0.01 มิลลิกรัม / กิโลกรัม 0.08 มิลลิกรัม / กิโลกรัม ) การถดถอยเชิงเส้นได้จากเส้นโค้งสอบเทียบ ความถูกต้องถูกคำนวณโดยการวิเคราะห์ตัวอย่างที่ทราบความเข้มข้น และเปรียบเทียบค่าจริงกับค่าวัด .ความแม่นยำถูกแสดงออกมาด้วยส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานสัมพัทธ์ ( RSD ) จาก 6 ได้แก่ ขีดจำกัดของการตรวจหา ( LOD ) ของตัวอย่างอยู่ระหว่าง 0.0002 mg / kg และ 0.003 มิลลิกรัม / กิโลกรัม ประมาณสามครั้งเป็นสัญญาณวิทยุ ขีดจำกัดของปริมาณ ( loq ) ของตัวอย่างอยู่ระหว่าง 0.0006 mg / kg ) 0.048 มิลลิกรัม / กิโลกรัม ( ตารางที่ 1 ) คิดเป็น 10 เท่าของสัญญาณวิทยุผักจำนวนป้อมที่ 0.02 mg / kg และ 0.08 มิลลิกรัมต่อกิโลกรัม โดยการเพิ่มโซลูชั่นมาตรฐานผสมและการกู้คืนแบบทำซ้ำ 6 ครั้ง สารตัวอย่างมีค่าเฉลี่ยอัตราการกู้คืน 123.8 73.7% % ) % ความเบี่ยงเบนมาตรฐานสัมพัทธ์ ( RSD ) ของตัวอย่างอยู่ระหว่าง 2.4 % – 8.6 % ( ตารางที่ 2 ) ตามลำดับการใช้เครื่องดนตรีต่างๆ และมักเรียกรวมการรบกวนเนื่องจากการปนเปื้อนจากอุปกรณ์ , ตัวทำละลาย , เครื่องมือหรือสารเคมีที่ใช้