The monolayer of GP cell cultures w

The monolayer of GP cell cultures were infected with the grouper iridovirus isolate A3/12/98 as described in the above. After appearance ofadvanced CPE from 36 to 48 h of post-infection, the virus-infected GP cells were harvested and pelleted by centrifugation at 200×g for 5 min. The cell pellets were first fixed with 2.5% glutaraldehyde (SPI, EM grade) in 0.1 M cacodylate buffer, pH7.2 for 2–3 h, the cells were then washed with cacodylate buffer, and finally postfixed in 1% osmium tetroxide for 1 h. The cell pellet was mixed carefully with 2% molten agrose solution at 45 °C and immediately cooled on ice. One-mm3 cubes of the agrose-cell mixture were then dehydrated in a graded series of ethanol and embedded in resin (EMS, SPUR’S Kit). Ultrathin sections were cut with ultramicrotome (Reichert-Jung), and then double-stained with saturated aqueous uranyl acetate and lead citrate.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Monolayer ของวัฒนธรรมถูกติด iridovirus ปลาเก๋าเซลล์ GP แยก A3/12/98 ตามที่อธิบายไว้ในข้างต้น หลังจากปรากฏ ofadvanced CPE จาก 36 กับ 48 h ของการติดเชื้อหลัง เซลล์ GP ไวรัสถูกเก็บเกี่ยว และ pelleted โดย centrifugation ที่ 200 × g ใน 5 นาที ขี้เซลล์ได้ก่อนคง มี 2.5% glutaraldehyde (SPI, EM เกรด) ในบัฟเฟอร์ 0.1 M cacodylate, pH7.2 สำหรับ 2 – 3 h เซลล์ได้แล้ว ล้าง ด้วยบัฟเฟอร์ cacodylate และ postfixed ในที่สุด ในเทโตรไซด์ออสเมียม 1% สำหรับ 1 h เม็ดเซลล์ผสมอย่างระมัดระวัง ด้วยวิธีหลอมละลาย agrose 2% ที่ 45 ° C และระบายความร้อนด้วยน้ำแข็งในทันที 1 mm3 ลูกบาศก์ของเซลล์ agrose ผสมแล้วอบแห้งในชุดมีการจัดระดับของเอทานอล และฝังอยู่ในยาง (EMS ชุดของแรง) ส่วน ultrathin ถูกตัด ด้วย ultramicrotome (Reichert Jung), แล้ว สองสี ด้วยซิเตรต acetate และตะกั่ว uranyl อควีอิ่มตัว

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

monolayer ของ GP เซลล์เพาะเลี้ยงมีการติดเชื้อเก๋า iridovirus แยก A3 / 12/98 ตามที่อธิบายไว้ในข้างต้น หลังจากการปรากฏตัว ofadvanced CPE 36-48 ชั่วโมงหลังการติดเชื้อไวรัสที่ติดเชื้อเซลล์ GP ถูกเก็บเกี่ยวและเม็ดโดยการหมุนเหวี่ยงที่ 200 ×กรัมเป็นเวลา 5 นาที เม็ดเซลล์ได้รับการแก้ไขครั้งแรกกับ glutaraldehyde 2.5% (SPI เกรด EM) ใน 0.1 M บัฟเฟอร์ cacodylate, pH7.2 2-3 ชั่วโมงเซลล์ถูกล้างแล้วกับบัฟเฟอร์ cacodylate และหลังค่าเงินในที่สุด 1% ออสเมียม tetroxide 1 ชั่วโมง ตะกอนเซลล์ผสมอย่างระมัดระวังกับ 2% วิธีการแก้ปัญหา agrose หลอมเหลวที่ 45 องศาเซลเซียสและทำให้เย็นลงทันทีบนน้ำแข็ง ก้อนหนึ่ง mm3 ของส่วนผสม agrose เซลล์อยู่แล้วแห้งในชุดอย่างช้า ๆ ของเอทานอลและฝังตัวอยู่ในเรซิน (EMS, SPUR'S ชุด) ส่วน Ultrathin ถูกตัดด้วย ultramicrotome (แชร์-Jung) จากนั้นดับเบิลย้อมด้วยสีอะซิเตท uranyl อิ่มตัวน้ำและนำไปสู่​​ซิเตรต

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

อย่างของ GP เซลล์วัฒนธรรมติดเชื้อปลาเก๋าอิริโดไวรัสแยก A3 / 12 / 98 ตามที่อธิบายไว้ในข้างต้น หลังจากการปรากฏตัว ofadvanced CPE 36 ถึง 48 ชั่วโมงหลังการติดเชื้อ , การติดเชื้อไวรัส GP เซลล์เก็บเม็ด 200 กรัม โดย 3 × 5 นาที เซลล์เม็ดแรกคงที่ด้วย 2.5% glutaraldehyde ( SPI EM เกรด ) ใน 0.1 M จากนั้นนำบัฟเฟอร์ , การสกัด .2 2 – 3 ชั่วโมง แล้วล้างด้วยจากนั้นนำเซลล์มีบัฟเฟอร์ และสุดท้าย postfixed 1% ออสเมียม tetroxide เป็นเวลา 1 ชั่วโมง เซลล์เม็ดผสมด้วย 2% สารละลายเหลวที่ 45 ° C และ agrose ทันทีลงบนน้ำแข็ง one-mm3 ก้อนของ agrose เซลล์ส่วนผสม แล้วอบแห้งในระดับชุดของเอทานอลและฝังตัวอยู่ในเรซิ่น ( EMS 20 ชุด )ส่วน ultrathin ถูกตัดกับ ultramicrotome ( ไรเคิร์ตจอง ) แล้วคู่ที่เปื้อนน้ำอิ่มตัวและตะกั่วอะซิเตทยูเรนิลซิเตรต .