Young leaves (up to 3 cm length) provided a convenient
source for the purification of b-glucosidase (torvosidase),
because of their high activity and low content of phenolic
compounds and chlorophyll, compared to other tissues
or other leaf development stages. The purification of torvosidase
from young leaves required the following chromatographic
steps, butyl-toyopearl, Con A-Sepharose,
CM-Accell, Sephacryl S-300 HR and butyl-Sepharose FF
chromatography, respectively. The results of purification
of torvosidase are summarized in Table 1. The final cumulative
yield and fold purification of torvosidase, obtained at
the last step of purification, were 12% and 170-fold, respectively.
The enzyme shows only one protein band when
stained with Coomassie blue R-250 on SDS–PAGE
(Fig. 1(a), lane 1). As well, a single protein band was found
on native agarose IEF (Fig. 1(b), lane 1). Therefore, the
purified b-glucosidase appears to be homogeneous, by
SDS–PAGE and native agarose IEF.
Since torvosidase was tightly bound by Con A-Sepharose,
the enzyme is probably glycosylated, as is the case
for many b-glucosidases (Hughes et al., 1992; Akiyama
et al., 1998; Varghese et al., 1999; Ketudat-Cairns et al.,
ใบอ่อน (ขึ้นอยู่กับความยาว 3 ซม.) จัดให้มีสิ่งอำนวยความสะดวก
แหล่งสำหรับการทำให้บริสุทธิ์ของ B-glucosidase (torvosidase) ที่
เพราะกิจกรรมของพวกเขาสูงและเนื้อหาต่ำของฟีนอล
สารคลอโรฟิลและเมื่อเทียบกับเนื้อเยื่ออื่น ๆ
หรือขั้นตอนการพัฒนาใบอื่น ๆ บริสุทธิ์ของ torvosidase
จากใบอ่อนที่จำเป็นต้องใช้สารต่อไปนี้
ขั้นตอนบิวทิล toyopearl, Con A-Sepharose,
CM-Accell, Sephacryl S-300 ฝ่ายทรัพยากรบุคคลและบิวทิล Sepharose FF
โครมาตามลำดับ ผลของการทำให้บริสุทธิ์
ของ torvosidase ได้สรุปไว้ในตารางที่ 1 สะสมสุดท้าย
ผลผลิตและการทำให้บริสุทธิ์ของพับ torvosidase ได้รับใน
ขั้นตอนสุดท้ายของการทำให้บริสุทธิ์ 12% และ 170 เท่าตามลำดับ.
เอนไซม์แสดงเฉพาะโปรตีนวงหนึ่งเมื่อ
ย้อมด้วยสี Coomassie สีฟ้า R-250 บนระบบ SDS-PAGE
(รูป. 1 (ก), เลน 1) รวมทั้งวงเดียวโปรตีนถูกพบ
บนพื้นเมือง agarose IEF (รูป. 1 (ข) เลน 1) ดังนั้น
บริสุทธิ์ B-glucosidase ดูเหมือนจะเป็นเนื้อเดียวกันโดย
ระบบ SDS-PAGE และพื้นเมือง agarose IEF.
ตั้งแต่ torvosidase ถูกผูกแน่นโดย Con A-Sepharose,
เอนไซม์อาจ glycosylated, เป็นกรณีที่
หลาย B-glucosidases (ฮิวจ์เอต อัล 1992. อากิยามะ
. et al, 1998; Varghese et al, 1999;. ทัตแครนส์, et al.
การแปล กรุณารอสักครู่..

ใบอ่อน ( ได้ถึง 3 ซม. ความยาว ) ให้สะดวกแหล่งผลิต b-glucosidase ( torvosidase )เพราะกิจกรรมสูงต่ำของพวกเขาและเนื้อหาของฟีโนลิกสารประกอบคลอโรฟิลล์ , เมื่อเทียบกับเนื้อเยื่ออื่น ๆหรือใบอื่น ๆขั้นตอนการพัฒนา . ผลิต torvosidaseจากใบอ่อนใช้โครมต่อไปขั้นตอน , บิวทิล toyopearl a-sepharose con ,เซนติเมตร accell , HR s-300 sephacryl เกี่ยวข้อง FF และบิวทิลโครมาโตกราฟีตามลำดับ ผลของการบำบัดน้ำเสียของ torvosidase สรุปได้ในตารางที่ 1 สุดท้าย สะสมผลผลิตและผลิต torvosidase พับได้ที่ขั้นตอนสุดท้ายของการฟอก , 12% และ 170 เท่า ตามลำดับเอนไซม์โปรตีนที่แสดงเพียงหนึ่งวงที่เปื้อนบนหน้าเหล่านี้น่าจะเป็นสีฟ้า r-250 SDS จำกัด( รูปที่ 1 ( a ) ซอย 1 ) เช่น วงเดียวโปรตีนพบว่าในพื้นเมือง ( IEF ( ภาพที่ 1 ( B ) , ซอย 1 ) ดังนั้นb-glucosidase บริสุทธิ์ปรากฏเป็นเนื้อเดียวกันโดยหน้า - SDS และพื้นเมือง ( IEF .ตั้งแต่ torvosidase ถูกแน่นผูกพัน a-sepharose con ,เอนไซม์ คือ อาจเป็นกรณีอื่น เช่นหลาย b-glucosidases ( ฮิวจ์ et al . , 1992 ; อากิยามะet al . , 1998 ; วาร์กีซ et al . , 1999 ; เกตุทัต Cairns et al . ,
การแปล กรุณารอสักครู่..
